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2、密論文留論文作者簽名:也魚呸日期:雌必導(dǎo)師簽名:,瓣日期:趔蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不含為獲得蘇州大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名:毒冬雌日天然鈣網(wǎng)蛋白和重組鈣網(wǎng)蛋白免疫生物學(xué)活性的比較研究目錄目錄中文摘要???????????????
3、?????????????5Abstract?????????????????????????????????????.j7第一章前言??????????????????????????9第二章實驗材料與方法???????????????????.112.1實驗材料??????????????????????????122.1.1試劑與培養(yǎng)基??????????????????????..122,1.2菌株與細(xì)胞株??????????????????????..122.1.3抗體????????????????
4、???????????????????122.1.4ELISA檢測試劑盒?????????????????????122.1.5實驗動物及細(xì)胞?????????????????????..122.1.6儀器設(shè)備與耗材??..:???????????????????132.2試驗方法??????????????????????????132.2.1N-CRT純化方法??...???????????????????132.2.2rCRT純化方法??????????????????????152.2.3rCRT各個組
5、分分離..?????????????????????162.2.4SDS-PAGE及Native-PAGE???????????????????????.172.2.5Westernblot實驗過程???????????????????..172.2.6考馬斯亮藍法測定蛋白濃度?????????????????182.2.7MTT法檢測細(xì)胞增殖???????????????????..192.2.8小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的制備??????????????????192.2.9蛋白刺激細(xì)胞實驗?????????????
6、????????192.2.10N-CRT與LPS之間共刺激實驗???????????????.202.2.11ELISA法檢測細(xì)胞因子??????????????????..211旦莖一天然鈣網(wǎng)蛋白和重組鈣網(wǎng)蛋白免疫生物學(xué)活性的比較研究——————————————————————————————————————————————一::::::二:=:::::::=::::=::二:::2.2.12PolymyxinB去除內(nèi)毒素方法????????????????.222.2.13NO檢測????????????
7、????????????????????.7,2.2.14動物免疫和血清效價檢測?????????????????一232.2.15數(shù)據(jù)分析????????????????????????24第三章N-CRT和rCRT的純化????????????????...253.1N-CRT純化條件摸索?????????????????????.263.1.1硫酸銨沉淀飽和度的摸索??????????????????263.1.2柱結(jié)合雜蛋白洗滌條件摸索?????????????????273.2N-CRT純化過程及結(jié)果
8、????????????????????..283.3rCRT的純化????????????????????????????????...293.4N-CRT和rCRT生化特點鑒定??????????????????303.5本章小結(jié)??????????????????????????.31第四章N-CRT和rCRT免疫生物學(xué)活性研究?????????--:-324.1N-CRT和rC