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1、中國(guó)藥理通訊2011年第二十八卷第二期癌EC一109細(xì)胞株、人結(jié)腸癌HCT一8細(xì)胞株和人肝癌SMMC-7701細(xì)胞株的生長(zhǎng)抑制作用，實(shí)驗(yàn)設(shè)生理鹽水對(duì)照組、濃度分別為0．2、1、5、25、50、100、200、400、800t~g／ml的CBMC實(shí)驗(yàn)組和相同濃度梯度的MMC溶液組(CBMC組劑量按含MMC的量計(jì))。結(jié)果：球磨懸浮沉淀法制備的ACNP顆粒大小均勻、形狀規(guī)則、近似球狀、表面光滑，平均粒徑為60±20nm；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)全波長(zhǎng)掃描結(jié)果顯示，MMC在217nm和365nm吸收較強(qiáng)，且在365n
2、m處吸收較為穩(wěn)定，故實(shí)驗(yàn)中選擇MMC的測(cè)定波長(zhǎng)為365nm。在0．1—20mg／L的濃度范圍內(nèi)，MMC的吸光度A與其濃度C呈直線正相關(guān)，回歸方程為A一0．00421+0．06591C(r一0．99987，P<0．0001)。在25℃時(shí)，25min左右ACNP吸附MMC達(dá)到平衡狀態(tài)，且隨著時(shí)問(wèn)的延長(zhǎng)吸附量不再發(fā)生明顯變化；室溫條件下，所得等溫方程式為C／X=-0．0123+0．00506C(r一0．99916，P-40．0001)，ACNP對(duì)MMC的飽和吸附量Xm199．63mg／g。lgACNP吸附19
3、9．63mgMMC達(dá)到飽和。故配制CBMC時(shí)MMC與ACNP質(zhì)量比為1：5。CBMC體外釋放實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，MMC對(duì)照組8h累積釋放量為989／6，CBMC釋放28d累積釋放量為7O．15，緩釋效果明顯。體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中，與陰性對(duì)照組相比，對(duì)于所選取的四種細(xì)胞，含有相同劑量MMC的CBMC組與單純使用MMC組抑瘤率相比，抑瘤效果明顯，結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，各組之間的統(tǒng)計(jì)結(jié)果P值大都維持在0．001以下，ACNP組與陰性對(duì)照組相比抑瘤率均沒(méi)有顯著性差異。結(jié)論；本實(shí)驗(yàn)室通過(guò)球磨懸浮沉淀法制備出的活性炭納米粒子與市
4、售的相比，顆粒小且均勻，質(zhì)量可控，可批量生產(chǎn)；MMC與ACNP最佳混合吸附配比為1：5，吸附時(shí)間為25min；CBMC具有明顯的緩釋效應(yīng)，突釋效應(yīng)不明顯；含有相同劑量MMC的CBMC體外對(duì)人胃癌BGC一823細(xì)胞株、人食管癌EC一109細(xì)胞株、人結(jié)腸癌HCT一8細(xì)胞株和人肝癌SMMC-7701細(xì)胞株的抑制作用均好于單獨(dú)使用MMC，活性炭本身沒(méi)有殺傷細(xì)胞的作用，但可顯著增強(qiáng)MMC的體外抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。鼠鈣網(wǎng)蛋白單克隆抗體的制備汪龔澤劉朝奇三峽大學(xué)分子生物學(xué)研究所湖北宜昌443002鈣網(wǎng)蛋白(Calre
5、ticulin，CRT)是高度保守，普遍存在于哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的Ca儲(chǔ)存蛋白，位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡、應(yīng)激、心血管炎癥反應(yīng)等多種生理和病理生理過(guò)程的多功能蛋白。最新研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，膜表面CRT分子增多、聚集成簇，成為凋亡細(xì)胞的“吞噬我”信號(hào)，啟動(dòng)吞噬、清除凋亡細(xì)胞被的過(guò)程。經(jīng)提取蛋白質(zhì)研究發(fā)現(xiàn)凋亡細(xì)胞表面的CRT主要為其保守序列，也即鈣網(wǎng)蛋白的N、P段。依此我們通過(guò)PCR克隆小鼠的N、P段序列并將該段構(gòu)建到PET一28a(+)中，表達(dá)融合his標(biāo)簽的融合蛋白純化后免疫小鼠制備單克隆抗
6、體。三次免疫后取脾與雜交瘤細(xì)胞SP20融合篩選抗小鼠CRT的單克隆抗體株，命名為7C3．獲得的單克隆株分泌的抗體經(jīng)ELISA測(cè)定其效價(jià)為64萬(wàn)，并經(jīng)Westerblot鑒定制備的單克隆抗體不僅能過(guò)特異性的識(shí)別原核和真核鼠的CRT，同時(shí)能識(shí)別人、猴、雞、鴨、魚(yú)、36中國(guó)藥理通訊2011年第二十八卷第二期牛和狗的CRT蛋白。同時(shí)我們應(yīng)用化療藥物米托蒽醌誘導(dǎo)小鼠黑色素瘤BI6細(xì)胞，小鼠淋巴瘤細(xì)胞EL4細(xì)胞CRT外翻，并本別通過(guò)免疫熒光和流式細(xì)胞術(shù)觀察BI6和EL4的CRT的膜表達(dá)情況，結(jié)果顯示制備的單克隆抗體
7、能過(guò)識(shí)別由化療藥物誘導(dǎo)的膜外翻的CRT。由此，我們可以得出結(jié)論我們制備了小鼠的鈣網(wǎng)蛋白的單克隆株，制備的單克隆抗體能應(yīng)用于Westerblot、ELISA、免疫熒光、和流式；并且由于我們制備的單克隆抗體特異性的識(shí)別鈣網(wǎng)蛋白的免疫調(diào)節(jié)活性區(qū)，因此我們相信該單克隆抗體能夠很好的應(yīng)用于抗腫瘤的研究，并可能成為一種特異性抗腫瘤靶向藥物。BC1—2家族在阿司匹林誘導(dǎo)宮頸癌Caski細(xì)胞凋亡中的作用楊建林韓鈺周永芹張偉三峽大學(xué)分子生物學(xué)研究所宜昌443002目的：阿司匹林(acetysalicylicacid，AS
8、A)，又名乙酰水楊酸，是非甾體類(lèi)抗炎藥(NSAIDs)的代表藥物，主要通過(guò)抑制環(huán)氧化酶(COXs)的活性進(jìn)而降低前列腺素(PGs)的產(chǎn)生發(fā)揮作用。文獻(xiàn)報(bào)道阿司匹林對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)有抑制作用，可以抑制食管癌、胃癌、結(jié)腸癌、卵巢癌、肝癌、乳腺癌、肺癌、淋巴瘤以及子宮內(nèi)膜癌的生長(zhǎng)；普通抗炎抗風(fēng)濕用的阿司匹林應(yīng)用在半年以上，可有效降低宮頸癌的發(fā)病率。最近流行病學(xué)研究證實(shí)，阿司匹林及其它非甾體類(lèi)消炎藥具有降低腫瘤發(fā)病率的作用，減少PGE2的產(chǎn)生，恢復(fù)
