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1、上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文羧甲基殼聚糖聯(lián)合阿霉素抗腫瘤作用的研究姓名：王曉霽申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：食品科學(xué)與工程指導(dǎo)教師：楊靖亞20100118上海海洋火學(xué)碩士論文羧甲基殼聚糖聯(lián)合阿霉素抗腫瘤作用的研究摘要本文研究了羧甲基殼聚糖(Carboxymethylchitosan，CM．CTS)和阿霉素(Adriamycin，ADM)聯(lián)合用藥在體外和體內(nèi)的抗腫瘤作用，并對(duì)其調(diào)控機(jī)理進(jìn)行了探討。本文采用四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)LL色法測(cè)定單獨(dú)和合用羧甲基殼聚糖與阿霉素對(duì)癌細(xì)胞的生長抑制作用，探討羧甲基殼聚糖與阿霉素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)人宮頸
2、癌Hela細(xì)胞及人結(jié)腸腺癌LSl74．T細(xì)胞生長的影響?！瘧?yīng)用金氏公式進(jìn)行聯(lián)合用藥分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)羧甲基殼聚糖和阿霉素均可有效的抑制癌細(xì)胞生長，且同時(shí)給藥對(duì)癌細(xì)胞可產(chǎn)生單純相加至增強(qiáng)的協(xié)同殺傷效果。序貫給藥法中先給阿霉素后給羧甲基殼聚糖結(jié)果為協(xié)同作用，先給羧甲基殼聚糖后給阿霉素為拮抗作用。試驗(yàn)中，我們還探討了CM．CTS和ADM對(duì)不同腫瘤細(xì)胞的作用，發(fā)現(xiàn)在給藥的細(xì)胞生長的潛伏期、對(duì)數(shù)期、平臺(tái)期和衰亡期前期均有協(xié)同作用，而隨著時(shí)間的增加，+在細(xì)胞生長的衰亡期中后期協(xié)同作用降低。根據(jù)藥物對(duì)細(xì)胞的殺傷率的計(jì)算我們可以看出，兩藥合
3、用時(shí)對(duì)細(xì)胞的殺傷效果明顯。癌細(xì)胞的克隆形成能力、移動(dòng)能力和粘附能力在癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移擴(kuò)散的過程中起非常重要的作用。本研究通過粘附試驗(yàn)?zāi)Ｐ?、“?chuàng)傷”試驗(yàn)?zāi)Ｐ汀⒖寺⌒纬稍囼?yàn)的建立，測(cè)定和評(píng)價(jià)了CM．CTS和ADM體外抗增殖和抗遷移的能力。結(jié)果表明CM．CTS和ADM能顯著抑制腫瘤細(xì)胞的克隆形成能力、移動(dòng)能力、粘附能力，兩藥聯(lián)合具有協(xié)同作用。在小鼠體內(nèi)成功移植了黑色素瘤B16細(xì)胞，進(jìn)一步的評(píng)價(jià)了CM．CTS和ADM體內(nèi)抑制腫瘤生長的作用。本研究采用低、中、高濃度CM．CTS組考察了不同濃度的CM．CTS對(duì)小鼠B16黑色素瘤生長情況的
4、影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明：CM．CTS和ADM在體內(nèi)能明顯的抑制腫瘤生長，兩藥聯(lián)合具有協(xié)同作用。通過HPLC觀察了CM—CTS和ADM的血藥濃度與時(shí)間的關(guān)系，即初步的藥代動(dòng)力學(xué)研究。研究結(jié)果表明，CM—CTS和ADM在小鼠體內(nèi)是比較穩(wěn)定的，其表觀半衰期超過了8小時(shí)。本研究采用流式細(xì)胞儀法分別檢測(cè)了細(xì)胞凋亡率以及細(xì)胞分布周期的變化，上海海洋大學(xué)碩士論文以初步討論CM．CTS和ADM的抗腫瘤機(jī)理，結(jié)果顯示CM．CTS和ADM都可誘導(dǎo)Hela細(xì)胞發(fā)生凋亡，但尚不能提示CM．CTS和ADM聯(lián)合用藥是通過影響細(xì)胞凋亡來發(fā)揮其抗腫瘤作用的。
5、通過細(xì)胞周期分析提示CM．CTS對(duì)Hela細(xì)胞所產(chǎn)生的抑制作用是通過影響細(xì)胞周期的進(jìn)程而發(fā)揮作用的，其他更深入的機(jī)理研究有待進(jìn)一步證實(shí)。關(guān)鍵詞羧甲基殼聚糖，阿霉素，Hela，LSl74．T，B16，藥物協(xié)同作用Ilj：海海洋大學(xué)碩士論文Studiesofantitumoreffectbycombinationwithcarboxymethyl—chitosanandadriamycinABSTRACTT11ispaperstudiedontheinhibitionofthecombiningcarboxymethylch
6、itosan(Carboxymethylchitosan,CM-CTS)withAdriamycin(Adriamycin，ADM)ontheproliferationandmetastasis，andmakesadeepapproachtoitsregulationmechanism．MMTisadoptedtoestimatetheinhibitionofcarboxymethylchitosanandAdriamycinontheproliferationofCarcinomacellapplicativelyan
7、drespectively,investigatingthecombinationeffectsofCarboxymethylchitosan(CM-CTS)andAdriamycin(ADM)ontheproliferationofHumanCervicalCarcinomacelllineHelaandhumancolonadenocarcinomacelllineLS174一Tinvitro．111eJing’Sformulaisusedtoanalyzetheeffectofthecombinationdrugs
8、．nleresultsshowsthatbothCM—CTSandADMCaninhibittumorcellsproliferationeffectivelyandsynergisticinhibitoryeffectscanbeimprovedwhentwodrugsarecombined．Insequentia
