資源描述：
《不同發(fā)育時期小鼠睪丸引帶erα、erβ、gper表達的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士畢業(yè)論文不同發(fā)育時期小鼠睪丸引帶ERα、ERβ、GPER表達的研究中文摘要目的：睪丸引帶是影響睪丸下降的重要因素。在不同發(fā)育時期，睪丸引帶變化不同，包括生長、增大、退化、收縮等，這些變化與胚胎期睪丸的發(fā)育和下降密切相關(guān)。睪丸的發(fā)育和下降不全影響睪丸的功能，并進而直接影響雄性生殖系統(tǒng)的發(fā)育。近年來研究表明，外源性雌激素可引起雄性生殖系統(tǒng)發(fā)育異常增加。在有關(guān)的機理方面，已有研究發(fā)現(xiàn)經(jīng)典的雌激素受體（ERα和ERβ）可以不同程度地表達于睪丸引帶組織，此外，也發(fā)現(xiàn)新型雌激素受體--G蛋白偶聯(lián)的雌激素膜受體（GPER/GPR30）也表達于睪丸、膀胱、輸精管等男性泌尿
2、生殖器官。提示雌激素有可能通過多種受體途徑影響男性泌尿生殖系統(tǒng)的發(fā)育。雌激素（包括外源性雌激素）與男性生殖系統(tǒng)發(fā)育異常的相關(guān)關(guān)系及機理目前備受關(guān)注，其中，外源性雌激素對睪丸引帶的影響還很少研究。本實驗通過免疫組織化學(xué)，免疫電鏡，westernblot等多種方法對不同發(fā)育時期小鼠睪丸引帶中的上述三種雌激素受體進行了定性、定位和定量的研究。以期了解三種雌激素受體在睪丸引帶中的表達，為后續(xù)研究雌激素通過睪丸引帶途徑影響小鼠生殖系統(tǒng)發(fā)育的機理奠定基礎(chǔ)。材料和方法：昆明小鼠90只，按雌雄比例2：1合籠交配，以出現(xiàn)陰道栓作為受孕標(biāo)志，發(fā)現(xiàn)陰栓當(dāng)天定為妊娠0天，記為GD0（gestati
3、onday，GD），胎鼠組分別于GD17、GD19時取材。孕雌鼠待其自然分娩，以幼鼠出生當(dāng)天記為生后0天，計為PD0（postnatalday，PD）。分別于PD0、PD3、PD7、PD14、PD21時取材。分析不同發(fā)育時期（胎齡17天、19天，生后0天、3天、7天、14天、21天）小鼠睪丸引帶中雌激素受體（ERα、ERβ、GPER）的表達情況：1.取上述不同發(fā)育時期的小鼠睪丸引帶，利用免疫組織化學(xué)檢測睪丸引帶上三種雌激素受體的表達情況。I汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士畢業(yè)論文2.取3天小鼠睪丸引帶，利用免疫電鏡技術(shù)對三種雌激素受體進行定位，了解其表達情況。3.取上述不同發(fā)育時期的小鼠
4、睪丸引帶，利用蛋白質(zhì)印跡方法了解三種雌激素受體的表達情況（定量）。結(jié)果：1.免疫組織化學(xué)觀察：各個時間點的小鼠睪丸引帶上ERα、ERβ及GPER陽性細胞均呈棕黃色或棕褐色，主要表達在睪丸引帶內(nèi)層疏松的間葉組織區(qū)內(nèi)，外周較致密的細胞區(qū)內(nèi)弱表達或不表達。2.免疫組織化學(xué)染色：隨著小鼠天齡的增加，可見各組ERα及GPER的陽性染色細胞均為生后3天小鼠睪丸引帶最高，但GPER的陽性染色細胞較ERα明顯弱且少；ERβ陽性染色細胞為生后0天最高。統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果：①ERα表達分析：生后0天、3天兩兩相比無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），余各發(fā)育階段組兩兩相比有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。②E
5、Rβ表達分析：孕17天與孕19天兩兩相比有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），及生后0天與各組兩兩相比有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），余各發(fā)育階段之間無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。③GPER表達分析：孕17天、孕19天、生后7天、生后14天、生后21天與各組之間相比均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；生后0天、3天兩兩相比無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。3.免疫電鏡觀察：①ERα：細胞核可見散在的膠體金顆粒標(biāo)記。②ERβ：細胞核和細胞質(zhì)可見少量膠體金顆粒標(biāo)記。③GPER：細胞質(zhì)內(nèi)偶見個別膠體金顆粒標(biāo)記。4.Westernblot檢測：隨著小鼠天齡的增加，均檢測到ERα、ERβ及GPER的表
6、達，各組目的蛋白表達均不一致。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析：①ERα的表達量：胎齡時期（孕17天、孕19天）兩兩比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（p>0.05）；生后0天、生后3天兩兩比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（p>0.05）；其余各組之間相互比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）。②ERβ的表達量：孕19天、生后0天、生后3天兩兩比較差異存在統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05），其余各組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（p>0.05）。③GPER的表達量：孕17天、孕19天與生后各組之間比較均有差異（p<0.05）；生后3天與各組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（p<0.05）；生后7天、14天、21天與生后各組（生后3天、7天、14天
7、、21天）比較差異均有統(tǒng)計意義（p<0.05），其余各組之間無統(tǒng)計學(xué)意義（p>0.05）。結(jié)論：II汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士畢業(yè)論文1.正常小鼠睪丸引帶組織中，各個發(fā)育階段均有ERα、ERβ及GPER表達，但表達的位置及含量均不一致。2.正常小鼠睪丸引帶組織中，ERα、ERβ及GPER主要存在于睪丸引帶內(nèi)層疏松間葉組織區(qū)，外周致密區(qū)表達弱或不表達。3.隨著小鼠天齡的增加，小鼠睪丸引帶組織中的ERα主要表達于細胞核中，睪丸下降第一階段較第二階段前表達逐漸增加，第二階段后表達逐漸減弱。4.隨著小鼠天齡的增加，小鼠睪丸引帶組織
