納豆激酶的酶學(xué)特性及其微膠囊的制備研究

納豆激酶的酶學(xué)特性及其微膠囊的制備研究

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1、碩士學(xué)位論文納豆激酶的酶學(xué)特性及其微膠囊的制備研究STUDIESONENZYMATICPROPERTIESOFNATTOKINASEANDPREPARATIONOFMICROCAPSULES程云哈爾濱工業(yè)大學(xué)2015年6月國內(nèi)圖書分類號:TS235.1學(xué)校代碼:10213國際圖書分類號:664密級:公開工學(xué)碩士學(xué)位論文納豆激酶的酶學(xué)特性及其微膠囊的制備研究碩士研究生:程云導(dǎo)師:馬鶯教授申請學(xué)位級別:工學(xué)碩士學(xué)科、專業(yè):化學(xué)工程所在單位:化工學(xué)院答辯日期:2015年6月30日授予學(xué)位單位:哈爾濱工業(yè)大學(xué)ClassifiedIn

2、dex:TQ468.1U.D.C:619DissertationfortheMasterDegreeinEngineeringSTUDIESONENZYMATICPROPERTIESOFNATTOKINASEANDPREPARATIONOFMICROCAPSULESCandidate:ChengYunSupervisor:Prof.MaYingAcademicDegreeAppliedfor:MasterofEngineeringSpecialty:ChemicalEngineeringAffiliation:Schoolo

3、fChemicalEngineeringandTechnologyJune,30th,2015DateofDefence:Degree-Conferring-Institutio:HarbinInstituteofTechnology哈爾濱工業(yè)大學(xué)工學(xué)碩士學(xué)位論文摘要納豆激酶是由枯草芽孢桿菌產(chǎn)生的一種絲氨酸蛋白酶,它主要的功能是溶解血栓,也作為新一代的溶栓藥物得到相應(yīng)的發(fā)展與研究。本文主要對納豆激酶的酶學(xué)特性以及海藻酸鈉對其包埋制備微膠囊的工藝優(yōu)化以及微膠囊穩(wěn)定性的研究。采用SDS-PAGE法以及Zeta電位法分別測得納豆激

4、酶的分子量為28kDa以及等電點為8.58。采用纖維蛋白-瓊脂糖平板法測定納豆激酶的酶活,得到納豆激酶的酶活為62520U/g。納豆激酶在不同的加熱溫度時,溫度越高,其酶活越低。在pH6.5的緩沖溶液中,納豆激酶的相對酶活為最高。在40℃的水浴中,保溫不同的時間,納豆激酶在保溫60min時,達到最高的酶活。NaCl在濃度低于1.35mol/L時,對納豆激酶的酶活起到促進作用,但是高于此濃度時,納豆激酶的酶活明顯的受到了抑制;Mg2+、Ca2+對納豆激酶有促進作用;Cu2+、Zn2+對納豆激酶的活性有抑制作用;Fe2+對納豆激

5、酶的抑制作用,即使在較低的濃度時對納豆激酶的酶活穩(wěn)定性的抑制作用也十分的明顯。使用海藻酸鈉包埋納豆激酶制備微膠囊的單因素最佳工藝條件是:海藻酸鈉的濃度為1.60%,羧甲基纖維素鈉的濃度為0.50%,CaCl2濃度為0.30%。正交實驗所得的最佳工藝條件是:海藻酸鈉的濃度為1.80%,羧甲基纖維素鈉的濃度為0.50%,CaCl2濃度為0.30%。對包埋的納豆激酶與游離狀態(tài)下的納豆激酶酶學(xué)性質(zhì)的比較,在不同的溫度以及不同的pH下,包埋的納豆激酶比游離的納豆激酶的相對酶活要高。并且在酶活溫度為50℃時,游離的納豆激酶的相對酶活是5

6、1.69%,包埋的納豆激酶的相對酶活為71.67%;在pH8.5的條件下,游離的納豆激酶的相對酶活是38.09%,包埋納豆激酶的相對酶活是55.99%。經(jīng)過包埋的納豆激酶,其酶活受到了一定程度的保護。因此,經(jīng)過海藻酸鈉包埋的納豆激酶可以較好的保護酶的活性,免受外界環(huán)境的影響。同樣,關(guān)于混合多糖的研究發(fā)現(xiàn),海藻酸鈉/CMC包埋的納豆激酶,有以下優(yōu)點:粒徑小、外觀規(guī)則并且酶活的回收率高、硬度強。關(guān)鍵詞:納豆激酶;海藻酸鈉;微膠囊I哈爾濱工業(yè)大學(xué)工學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractNattokinaseisaserineproteas

7、ethatproducedbytheBacillussubtilis,itsmainfunctionistodissolvethethrombus,andalsoasanewgenerationofthrombolyticdrugsgotthecorrespondingdevelopmentandresearch.Thispapermainlystudiestheenzymaticpropertiesofnattokinaseandtheproductionprocessandstabilityofmicrocapsules

8、whichembeddedbysodiumalginate.Themolecularweightofnattokinasewas28kDaandtheisoelectricpointofitwas8.58.Theenzymaticactivityofnattokinasewas62520U

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