聚乳酸-骨基質明膠多孔復合材料制備及骨誘導活性研究

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資源描述:

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1、中國修復重建外科雜志2007年2月第21卷第2期·135·聚乳酸2骨基質明膠多孔復合材料制備及骨誘導活性研究1232241張育敏李寶興李冀馬紹英趙亞平王建茹原林【摘要】目的采用CO2超臨界法制備一種新型的具有生物活性的聚乳酸(polylacticacid,PLA)2骨基質明膠(bonematrixgelatin,BMG)多孔復合型骨支架材料,并檢測骨誘導活性。方法選取健康成人供體皮質骨進行脫脂、脫鈣和脫蛋白處理制備BMG,將按體積比3∶1混合的BMG2PLA及純PLA,分別置入超臨界CO2反應裝置中,同時

2、加入粒徑為100~200Lm的NaCl顆粒作為制孔劑,反應制備多孔PLA2BMG和PLA復合材料。在含10%胎牛血清的DMEM6高糖培養(yǎng)基中培養(yǎng)MC3T32E1成骨前體細胞,按20Ll?孔2×10?ml濃度的細胞懸液加入含不同材料的24孔培養(yǎng)板內共培養(yǎng)2周,其中PLA2BMG組:每孔含100Lg粉碎的PLA2BMG復合材料;PLA組:每孔含100Lg粉碎的PLA材料;DMEM高糖培養(yǎng)基組作為對照組;每組設6個復孔。通過茜素紅S染色法染色鈣化結節(jié),定量分析鈣化面積;收集共培養(yǎng)細胞并在1ml0.2%的Noni

3、detP240溶液中超聲裂解,檢測細胞內鈣含量和ALP活性。結果超臨界CO2法所制備PLA2BMG多孔復合材料中BMG與PLA混合均勻,孔隙大小為50~150Lm,孔徑聯(lián)通性好;PLA2BMG組ALP活性、鈣含量及鈣化面積均值分別為325159±70140U?gprot、3151±1164mmol?gprot和42198%±4144%,均高于PLA組63162±30101U?gprot、1104±0121mmol?gprot和9155%±1194%,及對照組2140±1147U?gprot、0170±01

4、24mmol?gprot和0186%±0141%,比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0105),且PLA組的ALP活性及鈣化結節(jié)面積與對照組也有統(tǒng)計學意義(P<0105)。結論采用CO2超臨界法制備的PLA2BMG多孔復合支架材料具有良好的骨誘導活性,有可能作為一種有前景的骨植入材料及骨組織工程支架材料。【關鍵詞】組織工程骨基質明膠聚乳酸骨誘導中圖分類號:R329.2R318文獻標識碼:AFABRICATIONOFPOROUSPOLYLACTICACID-BONEMATRIXGELATINCOMPOSITEBI

5、OACTIVEMATERIALANDITSOSTEOINDUCTIVEACTIVITY?ZHANGYumin,LIBaoxing,LIJi,etal.ResearchCenterofTissueEngineering,SouthernMedicalUniversity,GuangzhouGuangdong,510515,P.R.China.E2mail:zymsir@sina.comCorrespondingauthor:ZHANGYumin,E2mail:zymsir@sina.com【Abstract

6、】ObjectiveTofabricateanovelporousbioactivecompositebiomaterialconsistingofpolylacticacid(PLA)2bonematrixgelatin(BMG)byusingthesupercriticalcarbondioxidefluidtechnique(SC2CO2)andtoevaluateitsosteoinductiveactivity.MethodsThecorticalbonesselectedfromhealthy

7、adultdonorswereprocessedintoBMGbythedefatting,demineralizing,anddeproteinizingprocesses.PLAandBMGweremixedatavolumeradioof3∶1;then,thePLA2BMGmixedmaterialandthepurePLAmaterialwererespectivelyplacedinthesupercriticalcarbondioxidereactionkettles,andwereresp

8、ectivelyaddedbytheNaClparticles1002200LmindiameterfortheporosityofthematerialssothattheporousPLA2BMGcompositematerialandtheporousPLAcompositematerialcouldbeformed.Themouseosteoblast2likeMC3T32E1cellswereculturedinth

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