水飛薊賓通過誘導(dǎo)自噬抑制腺樣囊性癌肺轉(zhuǎn)移的實(shí)驗研究

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1、中圖分類號UDCR739．87610碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q533密級公玨水飛薊賓通過誘導(dǎo)自噬抑制腺樣囊性癌肺轉(zhuǎn)移的實(shí)驗研究AnexperimentalstudyoninhibitionofadenoidCVStiCCarCinomalungmetaStaSlSlnnudemlCeDy·●l．●1●■●1●■●1J■slliblnlnlnducedautopnagy作者姓名：蔣智升學(xué)科專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學(xué)研究方向：口腔頜面外科學(xué)學(xué)院(系、所)：口腔醫(yī)學(xué)院指導(dǎo)教師：蔣燦華教授答辯委員會主席盈中南大學(xué)二O一三年五月原創(chuàng)性聲明㈣舢圳㈣Ⅷ咖

2、姍Ⅷ㈣舢lY2423356本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明。作者簽名：日期：立嶼年￡月垣日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文，允許學(xué)位論文被查閱和借閱；學(xué)校可以公布學(xué)位論文的全

3、部或部分內(nèi)容，可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。一名：料鈰簽趔吼埡鋤羔曰水飛薊賓通過誘導(dǎo)自噬抑制腺樣囊性癌肺轉(zhuǎn)移的實(shí)驗研究摘要目的研究水飛薊賓對腺樣囊性癌實(shí)驗性肺轉(zhuǎn)移的抑制作用并探討其機(jī)制。方法20只雌雄各半3～4周齡BALB／cnu／nu裸鼠隨機(jī)分為實(shí)驗組和對照組，每組10只。經(jīng)尾靜脈注射O．2ml細(xì)胞密度為1×106／ml的唾液腺腺樣囊性癌肺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞(ACC—M)懸液。24h后，對照組裸鼠每天腹腔注射O．8m

4、1I瀋MI．1640培養(yǎng)液，實(shí)驗組裸鼠每天腹腔注射O．8m1經(jīng)Ⅺ’MI一1640稀釋的水飛薊賓溶液(濃度：1mg／m1)。6W后處死裸鼠，分別檢測兩組裸鼠的肺重量、肺腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)目及大小。采用逆轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)、免疫印跡法(Westemblot)和免疫組化(IHC)檢測裸鼠肺部腺樣囊性癌轉(zhuǎn)移灶自噬相關(guān)基因LC3的表達(dá)，應(yīng)用SPSS13．O統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，氏O．05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果對照組裸鼠肺重量為(4．20±o．06)g，實(shí)驗組肺重量為(4．08士O．11)g；對照組裸鼠左、右肺腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)為(

5、9．29土5．91)個和(10．71土7．83)個，實(shí)驗組裸鼠左、右肺腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)為(3．11土3．76)個和(2．22士3．46)個；實(shí)驗組裸鼠肺重量及左、右肺腫瘤結(jié)節(jié)數(shù)均顯著低于對照組(尸

6、．418土0．098)相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0．05、)。免疫組化實(shí)驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗組裸鼠肺轉(zhuǎn)移灶LC3陽性表達(dá)率(80％)顯著高于對照組(30％)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(尸

7、lem1CebVSlllblnln1nQUCeCI●●'●●●1'AbstractautophagyObjectiveTostudythee艉ctofsilibininon1ungmetastasisofACC—M，andtoinVestigatetheinhibitorymechanism．Method20nudemicewhichwereinjectedO．2mlRPMI1640withACC-Mcells(106／m1)ViacaudalVein，werediVidedatrandomintotwogroups：experi

8、mentalgroupandcontr01group．ThemiceinexperimentalgroupweregiVen0．8mlsilibininsolution(1m∥m1)dilutedbyRPMIl640byintr印eritoneal