dna分子標(biāo)記與小麥抗性基因定位研究

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1、河南農(nóng)業(yè)科學(xué)DNA分子標(biāo)記與小麥抗性基因定位研究3張現(xiàn)偉,姬生棟,祝紅燕,薛華政,盛有名(河南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,河南新鄉(xiāng)453007)摘要:綜述了幾種DNA分子標(biāo)記技術(shù)(RFLP,RAPD,SSR,AFLP)在小麥抗性基因定位上的研究進(jìn)展,并對(duì)它們?cè)谛←溈剐曰蚨ㄎ恢写嬖诘膯?wèn)題進(jìn)行了探討。同時(shí)比較了基因定位的幾種方法,肯定了DNA分子標(biāo)記在基因定位上的優(yōu)越性,并就DNA分子標(biāo)記在小麥輔助育種上的應(yīng)用作了探討。關(guān)鍵詞:小麥;分子標(biāo)記;抗性基因;基因定位中圖分類號(hào):S512.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1

2、0043268(2007)03000505[4,5]小麥?zhǔn)俏覈?guó)的主要糧食作物,其產(chǎn)量的高低直將Pm18修訂為Pm1c。賈繼增等通過(guò)16個(gè)接影響人民的生活水平及整個(gè)社會(huì)的安定。目前,RFLP探針鑒定了攜帶擬斯卑爾脫山羊草白粉病基白粉病、條銹病及小麥濕害等在小麥生產(chǎn)中發(fā)生較因Pm12的春小麥品系Line31為6B6S易位系,為普遍,嚴(yán)重影響了小麥產(chǎn)量和品質(zhì)。科學(xué)研究和Pm12基因位于易位染色體6BS-6SS.6SL短臂生產(chǎn)實(shí)踐均表明,培育抗病小麥品種是控制小麥發(fā)上,從分子水平上否定了Pm12定位在6A上的觀

3、病的經(jīng)濟(jì)而又有效的手段,尋找抗性基因并對(duì)它們點(diǎn),并利用分子標(biāo)記將該基因重新定位到易位染色[6]進(jìn)行定位和顯微操作是當(dāng)今育種工作的主要課體T6BS-6SS.6SL上。Rong等將以色列野生[1]題。為此,針對(duì)RFLP,RAPD,SSR和AFLP等二粒小麥TTD140中的1個(gè)隱性抗白粉病基因在小麥抗性基因定位的研究進(jìn)展作一綜述。Pm26轉(zhuǎn)移到普通小麥Bethlehem中,通過(guò)一系列染色體臂代換系(chromosome2armsubstitution1分子標(biāo)記與小麥抗性基因定位linesCASLs)進(jìn)行RFL

4、P標(biāo)記被定位于2BS上。[7]1.1RFLP分子標(biāo)記技術(shù)與小麥抗性基因定位Autrique等用普通小麥與人工合成六倍體小麥1974年Grodicker等創(chuàng)立了限制性片段長(zhǎng)度多雜種的單粒傳F7代群體的114個(gè)株系進(jìn)行RFLP態(tài)性(restrictionfragmentlengthpolymorphism,分析,把抗條銹病基因Yr18定位在7D染色體的短RFLP)技術(shù),它是一種以DNA雜交為基礎(chǔ)的第1臂上,同時(shí)定位了光周期反應(yīng)基因Ppd1和抗腥黑[8]代遺傳標(biāo)記。RFLP自產(chǎn)生以來(lái)發(fā)展很快。它除用穗病基因。

5、Autrique等根據(jù)抗性基因在其染色體于構(gòu)建遺傳圖譜外,在小麥抗性基因定位中發(fā)揮了上所處的位置選擇克隆和雜交的方法尋找多態(tài)性分如經(jīng)典遺傳分析法、非整倍體分析法、寄主基因推導(dǎo)子標(biāo)記,發(fā)現(xiàn)定位在染色體7DL和3DL上的8個(gè)法等難以替代的作用。分子標(biāo)記與抗性基因Lr19和Lr24共分離,并將Lr[2,3]Hartl等利用近等位基因系和BSA法,先9定位在染色體6B上。隨后,來(lái)自野生二粒小麥的[9,10]后篩選出分別和Pm3a,Pm2緊密連鎖的xwhs179,抗條銹病基因Yr15被定位在染色體1B上。whs3

6、50,以及分別與Pm1,Pm2基因相距3cM的RFLP變異豐富,穩(wěn)定,技術(shù)成熟,可靠,區(qū)分能whs178,whs295;并用缺體-四體系定位whs178力強(qiáng);標(biāo)記為共顯性,能區(qū)分純合顯性和雜合體,且在7A上,whs295定位在5D上,xwhs350-6.5kb-非等位基因間無(wú)互作。RFLP標(biāo)記的應(yīng)用需飽和的EcoRⅤ位點(diǎn)定位在5D染色體上;并發(fā)現(xiàn)與Pm1緊RFLP連鎖圖(標(biāo)記間的距離應(yīng)小于20m)、與目的[11]密連鎖的探針whs178也與Pm18基因連鎖,從而基因緊密連鎖的RFLP標(biāo)記及高效的實(shí)驗(yàn)技術(shù)

7、。收稿日期:20060912基金項(xiàng)目:河南省自然科學(xué)基金資助(0511020600)作者簡(jiǎn)介:張現(xiàn)偉(1979),男,河南鹿邑人,在讀碩士研究生,研究方向:細(xì)胞分子生物學(xué)。通訊作者:姬生棟(1963),男,河南沁陽(yáng)人,副教授,碩士生導(dǎo)師,主要從事細(xì)胞分子生物學(xué)研究?！?·2007年第3期[12]但小麥RFLP連鎖圖的“飽和”程度還不高,且小1.3AFLP分子標(biāo)記技術(shù)與小麥抗性基因定位麥基因組DNA大、染色體多和RFLP多態(tài)性較低,AFLP(amplifiedfragmentlengthpolymor2要

8、獲得清晰的放射自顯影圖片較困難。在實(shí)驗(yàn)技術(shù)phism)是1993年由Zabeau發(fā)現(xiàn),并由Vos發(fā)展起方面,RFLP操作繁瑣,需接觸放射性物質(zhì)、致癌性來(lái)的基于PCR技術(shù)擴(kuò)增基因組DNA限制性片段[18]物質(zhì)EB等,且實(shí)驗(yàn)設(shè)備昂貴。因此,RFLP技術(shù)在的一項(xiàng)專利技術(shù)。上世紀(jì)末,該技術(shù)應(yīng)用于小麥應(yīng)用中有一定的局限性。基因的標(biāo)記,由于它可以在不知道基因組序列特點(diǎn)1.2RAPD分子標(biāo)記技術(shù)與小麥抗性基因定位的情況下進(jìn)行研究,而被認(rèn)為是一種十分理想的