莪術(shù)油誘導(dǎo)卵巢癌上皮細(xì)胞系調(diào)亡及其對stat信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響

莪術(shù)油誘導(dǎo)卵巢癌上皮細(xì)胞系調(diào)亡及其對stat信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響

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2、作及取得的研究成果,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫,文責(zé)自負(fù)。研究生簽名:b一彈、靛I導(dǎo)師簽章:d島Ⅵ沙鄺年3月≯7日目錄中文摘要?????????????????????????1英文摘要??.:_?????????????????????..3研究論文莪術(shù)油誘導(dǎo)卵巢上皮細(xì)胞癌系凋亡及其對STAT信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響前言?????????????????????????6日lJ舌?????????????????

3、????????6材料與方法??????????.???????????..7結(jié)果?????????????????????????15附圖?????????????????????????19附表?????????????????????????29討論?????????????????????????31結(jié)論?????????????????????????34參考文獻(xiàn)???????????????????????35綜述STAT3信號(hào)傳導(dǎo)通路與卵巢癌化療耐藥的研究進(jìn)展?????40致謝??????

4、???????.??????????????..43個(gè)人簡歷????.??????????????????????44中文摘要莪術(shù)油誘導(dǎo)卵巢上皮細(xì)胞癌凋亡及其對STAT信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響摘要目的:卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤之一,其死亡率據(jù)婦科惡性腫瘤之首。由于其起病隱匿且缺乏早期診斷手段,大多數(shù)患者初次就診時(shí)已發(fā)展為卵巢癌晚期,甚至廣泛轉(zhuǎn)移,手術(shù)已不能完全去除,目前,腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)及術(shù)后聯(lián)合化療是目前公認(rèn)的治療方法。以順鉑為基礎(chǔ)的化療是治療卵巢癌的常用藥物,但在治療過程中約80%患者表現(xiàn)出不同

5、程度的獲得性耐藥,嚴(yán)重影響患者的預(yù)后n。21。因此,如何利用新的敏感的藥物設(shè)計(jì)出抗腫瘤活性最佳,而毒性及耐藥性最小的聯(lián)合化療方案,進(jìn)而提高卵巢癌患者的生存率和生活質(zhì)量,是我們深入研究的重點(diǎn)。莪術(shù)油是從姜科植物莪術(shù)的干燥根莖中提取的揮發(fā)油成分。莪術(shù)中富含揮發(fā)油,且成分相當(dāng)復(fù)雜,主要化學(xué)成分為13一欖香烯、莪術(shù)醇、莪術(shù)酮、新莪術(shù)二酮、樟腦等∞3。其具有很好的抗腫瘤、抗病毒、抗炎、抗血栓形成和調(diào)節(jié)免疫功能等n。61廣泛的生物學(xué)效應(yīng),尤其是其抗腫瘤作用受到廣泛關(guān)注。有研究證實(shí),莪術(shù)油對胃癌,肝癌,宮頸癌,子宮內(nèi)

6、膜癌細(xì)胞等有抑制作用,但莪術(shù)油對化療耐藥的卵巢癌是否有作用目前尚未見報(bào)道。研究認(rèn)為STAT3信號(hào)傳導(dǎo)通路及其調(diào)控的下游靶基因可以作為腫瘤對化療耐藥的標(biāo)志口刮。本實(shí)驗(yàn)擬通過體外實(shí)驗(yàn)將莪術(shù)油作用于人卵巢癌上皮細(xì)胞SKOV3和卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞株SKOV3/DDP觀察其對細(xì)胞增殖的影響,是否可逆轉(zhuǎn)卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞對順鉑的耐藥性,并初步探討其對STAT信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響,為耐藥性卵巢癌的臨床治療提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:(1)細(xì)胞培養(yǎng):體外培養(yǎng)人卵巢癌上皮細(xì)胞SKOV3和卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞株SKOV3/DDP

7、24小時(shí)后,加入不同濃度的莪術(shù)油,采用細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、HE染色法觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化。(2)分別加用16、32、64、128、256lag/m1莪術(shù)油作用于卵巢癌細(xì)胞SKOV3和SKOV3/DDP,同時(shí)設(shè)立空白對照組,培養(yǎng)24,48小時(shí)后,利用噻唑藍(lán)比色法(MTT)中文摘要法檢測不同濃度莪術(shù)油對細(xì)胞SKOV3及SKOV3/DDP增殖抑制情況。(3)順鉑,莪術(shù)油及其聯(lián)合應(yīng)用于SKCIV3/DDP24小時(shí),利用免疫組織化學(xué)法檢測細(xì)胞信號(hào)通路中STAT3及Survivin、Caspase一3、VEGFCmRNA

8、蛋白的表達(dá)變化情況。(4)半定量逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT—PCR)法測定STAT3及其轉(zhuǎn)錄激活因子Survivin、VEGFC和Caspase一3的表達(dá)情況。結(jié)果:(1)倒置顯微鏡及HE染色觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化:對照組生長旺盛,形狀規(guī)則,呈梭形;加藥組見胞數(shù)量明顯減少,細(xì)胞間隙變大,細(xì)胞體積脹大,顆粒增多,包膜不清。(2)不同濃度莪術(shù)油對卵巢癌細(xì)胞SKOV3和SKoV3/DDP細(xì)胞增殖的影響:隨著藥物濃度和作用時(shí)間的增加,抑制率明顯增高,具

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