cd133及aldh在腫瘤侵襲中的作用及機制研究

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1、博士學(xué)位論文學(xué)校代碼:10023學(xué)號:B2010005073CDl33及ALDH在腫瘤侵襲中的作用及機制研究所院:姓名:指導(dǎo)教師:學(xué)科專業(yè):研究方向:完成日期:基礎(chǔ)學(xué)院劉艷艷劉玉琴病理學(xué)與病理生理學(xué)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)機理研究2013.04.】0北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生學(xué)位論文目錄中文摘要?????????????????????????????????。sABST隊CT???????????????????????????????????????????..8第一部分lCDl33對結(jié)直腸癌侵襲能力的作用研究及機制探討???????????..11弓

2、l言??????????????????????????????????????????????12實驗才5j科???????????????????????????????????????????.1s實驗方法?????????????????????????????????201.細胞培養(yǎng)????????????????????????????????????..202.細胞總蛋白的提取????????????????????????????????.203.BCA法檢測蛋白濃度???????????????????????????????..

3、204.RealTimePCR?......??.?......????....?????..?????.....???...........?.?.?.....?.???......?..21S.WesternBlotting????????????.......????...。?????.?....??.???.??.....????....?.?.246.細胞CDl33+率分析及CDl33Mg“、CDl33㈨分選????????????????????.257.M1Hr法檢測細胞增殖??????????????????????????????

4、??268.細胞集落形成率測定???????????????????????????????..269.Transwell體外侵襲實驗??????????????????????????????..2610.siRNA干擾CDl33或TIMP2的表達?????????????????????????2711.MMP2明膠酶譜檢測???????????????????????????????2812.質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、擴增?????????????????????????????????2913.CDl33shRNA表達載體構(gòu)建???????????????

5、?????????????2914.慢病毒包裝???????????????????????????????????3215.慢病毒感染目的細胞及穩(wěn)定細胞株篩選???????????????????????3216.統(tǒng)計學(xué)方法???????????????????????????????????33實驗結(jié)果????????????????????????????????..341.CDl33在六種結(jié)直腸癌細胞系中的表達???????????????????????..341.1流式細胞術(shù)檢測CDl33在六種結(jié)腸癌細胞系中的表達情況。????????

6、??????341.2Westernblotting檢測CDl33在六種結(jié)腸癌細胞系中的表達情況????????????一342.CDl33M曲亞群比CDl33¨亞群具有更高的體外增殖能力與侵襲能力???????????一352.1流式細胞術(shù)分選CDl33‰gh與CDl33嘶細胞并檢測分選純度???????????????352.2CDl33拍gh亞群比CDl33J0w亞群具有更高的體外增殖能力????????????????。352.3CDl33m8h亞群比CDl33h亞群具有更強的集落形成能力????????????????.362.4CDl3

7、3M曲比CDl33

8、0”亞群具有更強的體外侵襲能力??????????????????.363.siRNA下調(diào)CDl33后降低了HCTll6細胞的侵襲能力??????????????????371北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生學(xué)位論文3。1siRNA可有效下調(diào)HCTll6細胞中CDl33的表達????????????????????373.2siRNA下調(diào)CDl33后對HCTll6細胞增殖能力沒有影響?????????????????383.3siRNA下調(diào)CDl33后降低了HCTll6細胞的體外侵襲能力????????????????394.CDl33

9、的下調(diào)影響TIMP.2的表達??????????????????????????.394.1侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)信號通路分子篩查?

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