cd147與mmp-2在葡萄胎組織中的表達(dá)以及意義

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1、～虢始臌章期二簍蒜j河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注等內(nèi)容外，文中不包含其他人已發(fā)表或撰寫(xiě)的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫(xiě)，文責(zé)自負(fù)。，研究生簽名：怒焉拐V導(dǎo)師簽章：川年廠月7日目錄中文摘要??????????????????????????1英文摘要??????????????????????????4研究論文CDl47、MMP．2在葡萄胎組織中的表達(dá)以及意義前言??????????????????????????8日¨舌??????????????

2、????????????8材料與方法???????????????????????9結(jié)果??????????????????????????11附圖??????????????????????????13附表??????????????????????????16討論??????????????????????????18結(jié)論??????????????????????????24參考文獻(xiàn)????????????????????????24綜述CDl47、MMP．2在婦科腫瘤中的研究進(jìn)展?????????．28致謝??????????????????

3、?????????34個(gè)人簡(jiǎn)歷??????????????????????????35中文摘要CDl47與MMP．2在葡萄胎組織中的表達(dá)以及意義摘要目的：葡萄胎是妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞疾病中最常見(jiàn)的一種疾病，分為完全性葡萄胎和部分性葡萄胎。葡萄胎為良性病變，但具有一定的惡變傾向，約有20％的葡萄胎會(huì)發(fā)展成為滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤，其中有6％．32％的完全性葡萄胎(completehydatidiformmole，CHM)和5％的部分性葡萄(partialhydatidiformmole，PHM)會(huì)發(fā)展為滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤【l】。大部分葡萄胎患者經(jīng)過(guò)清宮可以治愈，但葡萄胎具有生

4、長(zhǎng)活躍及潛在惡性的特點(diǎn)，完全性葡萄胎惡變率約20％，目前確定葡萄胎患者預(yù)后主要是通過(guò)清宮后隨訪，觀察患者血D-HCG的變化及臨床特征，至少需要8周時(shí)間才能發(fā)現(xiàn)惡變，但部分患者因?qū)ζ咸烟フJ(rèn)識(shí)不夠全面或者由于各地區(qū)醫(yī)療條件不完善不能定期隨訪，這些患者經(jīng)常在出現(xiàn)臨床癥狀時(shí)才就診，以致延誤就診，使之惡變甚至發(fā)展為晚期而危急生命。由于尚無(wú)預(yù)測(cè)葡萄胎惡變及愈后的可靠指標(biāo)，因此尋找預(yù)測(cè)葡萄胎惡變的相關(guān)指標(biāo)具有十分重要的臨床意義。本研究通過(guò)測(cè)定CDl47和MMP．2在葡萄胎組織中的表達(dá)，以探討二者在葡萄胎發(fā)生發(fā)展以及侵襲轉(zhuǎn)移中作用，及二者間的相互聯(lián)系，以確定其是否能

5、成為預(yù)測(cè)葡萄胎惡變的重要指標(biāo)。方法：標(biāo)本的采集和處理：收集2005年11月至2012年7月年于河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院就診并行清宮術(shù)后病理診斷為葡萄胎患者的首次清宮組織30例；并收集正常早孕(6—8周)無(wú)其它疾病，要求終止妊娠的絨毛組織20例。所收集組織用4％的中性甲醛浸泡，清水沖洗，100％，90％，75％的梯度酒精脫水，二甲苯透明，石蠟包埋。連續(xù)石蠟切片，厚度為0．5um。分組：將組織分為正常絨毛組(20例)、葡萄胎組(24例)、侵葡組(3例)研究lVlMP．2、CDl47在各組的表達(dá)及意義；再將葡萄胎高危組(23例)分為惡變組(3例)、未惡變組(2

6、0例)進(jìn)一步研究MMP．2、CDl47在有高危因素的葡萄胎患者的表達(dá)情況及與葡萄胎組織惡變的關(guān)中文摘要系。試驗(yàn)方法：石蠟切片脫蠟，二甲苯4分鐘×2遍，95％酒精1分鐘×1遍，75％酒精1分鐘×1遍。清水沖洗3遍，放入95。C以上的修復(fù)液中進(jìn)行熱水浴修復(fù)10分鐘(葡萄胎組織修復(fù)10分鐘，絨毛組織修復(fù)8分鐘)。放置室溫待修復(fù)液溫度降為37。C以下，清水沖洗3次。放入3％H202溶液37。C敷育20分鐘。蒸餾水沖洗后，PBS浸泡5分鐘。滴加鼠抗人MMP．2、CDl47單克隆抗體一抗MMP．2濃度為為1：200，CDl47為1：200，4。C過(guò)夜。清水清洗3

7、遍，滴加鼠抗羊二抗37℃溫育40min；清水沖洗3遍，滴加新鮮配置DAB試劑，在光學(xué)顯微鏡下觀察染色，適時(shí)終止染色。蘇木精復(fù)染，分化反藍(lán)，脫水、透明。中性樹(shù)脂封片，在光鏡下行結(jié)果判斷。檢測(cè)方法：每個(gè)切片隨機(jī)挑選5個(gè)視野，用HMIAS．2000圖像處理系統(tǒng)統(tǒng)計(jì)灰度值，取平均灰度值作為切片結(jié)果，灰度值越低說(shuō)明蛋白表達(dá)越多。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：采用SPSS13．0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，對(duì)CDl47、MMP．2在侵蝕性葡萄胎、葡萄胎以及正常絨毛表達(dá)強(qiáng)度的比較采用兩個(gè)獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)，尸<0．05說(shuō)明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MMP．2、CDl47之間的相關(guān)性采用pearson積

8、差相關(guān)，P<0．05說(shuō)明差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果：1正常絨毛的鏡下形態(tài)：絨毛中的合體滋養(yǎng)層細(xì)胞與細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞