低氧或結(jié)合耐力運(yùn)動(dòng)對(duì)肥胖大鼠骨骼肌細(xì)胞自噬的影響.pdf

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1、分類號(hào):學(xué)校代碼:10585密級(jí):學(xué)號(hào):105852015100042廣州體育學(xué)院碩士學(xué)位論文低氧或結(jié)合耐力運(yùn)動(dòng)對(duì)肥胖大鼠骨骼肌細(xì)胞自噬的影響學(xué)科門(mén)類:教育學(xué)一級(jí)學(xué)科:體育學(xué)學(xué)科專業(yè):運(yùn)動(dòng)人體科學(xué)研究方向:身體機(jī)能評(píng)定研究生:趙芳芳指導(dǎo)教師:林文弢二〇一八年六月DissertationSubmittedtoGuangzhouSportUniversityforMasterDegreeEffectofHypoxiaorEnduranceExerciseonAutophagyofSkeletalMuscleCellsinObeseRatsMasterCandidate:Z

2、haoFangfangSupervisor:LinWentaoJune,2018廣州體育學(xué)院學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬?gòu)V州體育學(xué)院。廣州體育學(xué)院擁有在著作權(quán)法規(guī)定范圍內(nèi)學(xué)位論文的使用權(quán),包括:(1)已獲學(xué)位的研究生必須按學(xué)校規(guī)定提交學(xué)位論文,學(xué)??梢圆捎糜坝?、縮印或其他復(fù)制手段保存研究生上交的學(xué)位論文;(2)為教學(xué)和科研目的,學(xué)校可以將公開(kāi)的學(xué)位論文作為資料在圖書(shū)館、資料室等場(chǎng)所供校內(nèi)師生閱讀,或在校園網(wǎng)上供校內(nèi)師生瀏覽部分內(nèi)容;(3)學(xué)校有權(quán)向國(guó)家主管部門(mén)或其指定機(jī)構(gòu)送交論文的

3、電子版或紙質(zhì)版,允許學(xué)位論文被檢索、查閱和借閱。本人保證遵守上述規(guī)定。(保密的論文在解密后遵守此規(guī)定)作者簽名:導(dǎo)師簽名:日期:日期:廣州體育學(xué)院學(xué)位論文聲明本人鄭重聲明:本人所呈交《低氧或結(jié)合耐力運(yùn)動(dòng)對(duì)肥胖大鼠骨骼肌細(xì)胞自噬的影響》是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明并致謝。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。作者簽名:導(dǎo)師簽名:摘要研究目的本實(shí)驗(yàn)通過(guò)建立營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠模型以及低氧耐力運(yùn)動(dòng)模型,運(yùn)用

4、三種低氧濃度(11.3%、13.3、16.3%氧濃度)結(jié)合耐力運(yùn)動(dòng)對(duì)營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠進(jìn)行干預(yù),并通過(guò)WesternBlot以及實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)自噬調(diào)控因子Sestrin2、AMPKɑ2和自噬因子Beclin1、LC3IImRNA的表達(dá),探討低氧或結(jié)合耐力運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌細(xì)胞自噬相關(guān)因子的影響,為探索低氧運(yùn)動(dòng)減肥及防治或減輕自噬相關(guān)疾病提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究方法構(gòu)建8周高脂飼料喂養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠模型,并將其隨機(jī)分為8組,分別為常氧安靜組(A)、常氧運(yùn)動(dòng)組(AE)、16.3%低氧安靜組(B)和16.3%低氧運(yùn)動(dòng)組(BE)、13.3%低氧安靜組(C)、13.3%低氧運(yùn)動(dòng)組(

5、CE)、11.3%低氧安靜組(D)、11.3%低氧運(yùn)動(dòng)組(DE),每組各10只,并繼續(xù)以高脂飼料喂養(yǎng)。正式實(shí)驗(yàn)干預(yù)期,大鼠訓(xùn)練方案如下:運(yùn)動(dòng)組大鼠均進(jìn)行中等強(qiáng)度耐力運(yùn)動(dòng),其中時(shí)間為40min,跑臺(tái)坡度為0,跑速為20m/min;運(yùn)動(dòng)頻率為一周5次(每周一到周五),持續(xù)8周。末次訓(xùn)練結(jié)束后,禁食24小時(shí),處死大鼠并采樣。生化指標(biāo)測(cè)血脂四項(xiàng)及血糖濃度;WesternBlot測(cè)骨骼肌細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白Sestrin2、AMPKɑ2、Beclin1的表達(dá)水平以及LC3II/LC3I的比值;實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)自噬調(diào)控因子Sestrin2、AMPKɑ2和自噬因子Beclin1

6、、LC3IImRNA的表達(dá);石蠟切片、HE染色觀察各組大鼠骨骼肌細(xì)胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)的變化。研究結(jié)果1.營(yíng)養(yǎng)性肥胖大鼠模型:經(jīng)過(guò)8周的高脂喂養(yǎng),高脂組大鼠體重、Lee’s指數(shù)、BG、TC、TG、LDL-c濃度均顯著升高(P<0.05)。2.大鼠形態(tài)學(xué)及血脂指標(biāo)變化:與A組相比,AE組大鼠體重、BG、TC、TG、LDL-c濃度均顯著降低(P<0.05),HDL-c濃度顯著上升(P<0.05);D組的LDL-c,B組、C組、D組的TG、BD濃度顯著降低(P<0.05),C組、D組的HDL-c濃度顯著上升(P<0.05);與AE組相比,DE組的LDL-c、TG濃度顯著降低(P<0

7、.05),CE組、DE組的BG濃度顯著降低(P<0.05),DE組的HDL-c濃度顯著上升(P<0.05)。3.WesternBlot結(jié)果顯示:與A組相比,AE組大鼠骨骼肌細(xì)胞Sestrin2、AMPKɑ2、Beclin1的蛋白表達(dá)以及LC3II/LC3I的比值顯著升高(P<0.05);C組、D組Sestrin2、AMPKɑ2的蛋白表達(dá)以及LC3II/LC3I的比值顯著升高(P<0.05),B組、C組、D組Beclin1的蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.05);與AEI組相比,CE組、DE組Sestrin2、AMPKɑ2的蛋白表達(dá)以及LC3II/LC3I的

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