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《流感病毒致心臟發(fā)育異常的表觀遺傳分子機(jī)制研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、學(xué)校代碼10542密級(jí)學(xué)號(hào)2Q!!Q21壘122壘流感病毒致心臟發(fā)育異常的表觀遺傳分子機(jī)制研究EpigeneticMolecularMechanismofAbnormalHeartDevelopmentCausedbyInfleuzaVirus研究生姓名指導(dǎo)教師姓名、職稱學(xué)科專業(yè)研究方向湖南師范大學(xué)學(xué)位評(píng)定委員會(huì)辦公室二零一四年三月摘要先天性心臟病(先心病)是一類嚴(yán)重危害人類健康的疾病，在新生兒中的發(fā)生率為4．05～12．3％o。環(huán)境因素與遺傳因素是先天性心臟病發(fā)生的主要原因。其中，孕早期宮內(nèi)病毒感染是最為重要的環(huán)境因素之一。臨床流行病學(xué)調(diào)查表明，有15
2、種病毒的早期宮內(nèi)感染可能會(huì)引起心臟發(fā)育異常，進(jìn)而導(dǎo)致先心病的發(fā)生。近年來關(guān)于先天性心臟病的發(fā)生的遺傳機(jī)制取得了許多進(jìn)展，但是目前對(duì)病毒引起先天性心臟病的分子發(fā)生機(jī)制還不清楚。本研究以BALB／c小鼠作為模式動(dòng)物，在小鼠胚胎發(fā)育E7．5天通過鼻腔滴加的方法對(duì)孕母鼠進(jìn)行H1N1流感病毒感染，構(gòu)建HINl流感病毒小鼠模型。通過數(shù)字基因表達(dá)譜技術(shù)篩選，發(fā)現(xiàn)在感染流感病毒后胚胎心臟的表觀遺傳相關(guān)基因表達(dá)出現(xiàn)差異。選取BAF染色質(zhì)重塑復(fù)合物及其信號(hào)途徑為研究對(duì)象，從RNA以及蛋白水平驗(yàn)證分析BAF染色質(zhì)重塑相關(guān)基因及其下游Wnt信號(hào)和部分心臟發(fā)育關(guān)鍵基因的表達(dá)變化。
3、本文得到了以下研究結(jié)果：1、利用數(shù)字化表達(dá)譜技術(shù)分析病毒組和正常組中表觀遺傳相關(guān)基因的表達(dá)情況，并進(jìn)行篩選，經(jīng)RT．PCR半定量分析發(fā)現(xiàn)25個(gè)表觀遺傳相關(guān)基因的結(jié)果與表達(dá)譜的結(jié)果一致，其中11個(gè)基因表達(dá)上調(diào)，14個(gè)基因表達(dá)下調(diào)。2、表觀遺傳相關(guān)基因中BAF染色質(zhì)重塑復(fù)合物出現(xiàn)顯著性差異表達(dá)，并篩選出BAF染色質(zhì)重塑基因及其下游Wnt信號(hào)和部分一tl,臟發(fā)育關(guān)鍵基因進(jìn)行進(jìn)一步研究。3、對(duì)BAF染色質(zhì)重塑相關(guān)基因進(jìn)行RT．PCR半定量分析，以E11．5天的胚胎心臟為材料，得到一致的RT．PCR結(jié)果：11組基因結(jié)果與表達(dá)譜的結(jié)果一致，并且都是下調(diào)的。4、對(duì)Wn
4、t信號(hào)下游基因進(jìn)行蛋白表達(dá)水平分析，發(fā)現(xiàn)在病毒組中Sfrp2和Gata4的表達(dá)與數(shù)字表達(dá)譜的結(jié)果一致，均出現(xiàn)了下調(diào)。本論文利用數(shù)字化表達(dá)譜技術(shù)篩選到在H1N1流感病毒感染孕鼠的胚胎心臟中表觀遺傳相關(guān)基因出現(xiàn)了顯著差異表達(dá)。并且BAF染色質(zhì)重塑復(fù)合物及其下游Wnt信號(hào)和部分心臟發(fā)育關(guān)鍵基因的表達(dá)也出現(xiàn)下調(diào)。提示表觀遺傳染色質(zhì)重塑基因及其信號(hào)途徑可能是流感病毒感染導(dǎo)致先天性心臟病發(fā)生的一個(gè)重要分子調(diào)控途徑，本論文為進(jìn)一步深入研究環(huán)境因素致先心病發(fā)生的分子機(jī)制研究提供了一定的前期理論基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞：H1N1流感病毒；表觀遺傳；先心病；小鼠模型；數(shù)字基因表達(dá)譜AB
5、STRACTCongenitalheartdisease(CHD)isakindofdiseasethatcauseseriousdamagetohumanhealth，theincidenceinthenewbornsis4．05～12．3％o．Environmentalfactorsandgeneticfactorsarethemainreasonsforcongenitalheartdisease．Amongthem，intrauterinevirusinfectionisoneofthemajorenvironmentalfactors．Clin
6、icalepidemiologystudiesshowsthatthereareatleast15virusthatmaycauseabnormalheartdevelopmentinmiceandleadingtotheoccurrenceofcongenitalheartdisease．Recently，thestudyongeneticmechanismofcongenitalheartdiseasegotalotofprogress．However，themolecularmechanismsofcongenitalheartdiseasecau
7、sedbyvirusinfectionremainsunclear．Inthisstudy，BALB／cmicewereusedasexperimentalanimals．InordertoobtaineH1N1influenzavirusinfectionmice，E7．5dpregnantmicewereinfectedwithH1N1influenzavirusbynasaldroppingaccordingtothedevelopmentofheartinembryonic．Epigeneticrelatedgenesdifferentially
8、expressedinH1N1influenzavirusinfectionmi
