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《運(yùn)用計(jì)算機(jī)輔助精子分析系統(tǒng)（casa）對(duì)超低溫冷凍保存前后褐牙鲆精子的質(zhì)量評(píng)判》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文運(yùn)用計(jì)算機(jī)輔助精子分析系統(tǒng)（CASA）對(duì)超低溫冷凍保存前后褐牙鲆精子的質(zhì)量評(píng)判姓名：閆文罡申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：水生生物學(xué)指導(dǎo)教師：章龍珍;莊平20080610上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文運(yùn)用計(jì)算機(jī)輔助精子分析系統(tǒng)(CASA)對(duì)超低溫冷凍保存前后褐牙鲆精子的質(zhì)量評(píng)判摘要褐牙鲆(砌刪f幽螄o，f陽(yáng)cP凇)屬鰈形目，牙鲆科、牙鲆屬，俗稱(chēng)比目魚(yú)、片口。常棲息泥沙、砂石或巖礁地質(zhì)、水深20～50m和潮流較為通暢的沿岸水域，具潛伏習(xí)性，白天常潛伏在泥沙中不大活動(dòng)，夜間出來(lái)覓食。其自然分布區(qū)主要是中國(guó)沿海、朝鮮半島、日本和俄羅斯的亞洲海區(qū)，且生長(zhǎng)快、個(gè)體
2、大、肉質(zhì)細(xì)嫩鮮美，是名貴的重要海水養(yǎng)殖品種之一。褐牙鲆為冷溫性底棲魚(yú)類(lèi)，比較適宜溫度較低的水環(huán)境，我國(guó)關(guān)于褐牙鲆人工繁殖、養(yǎng)殖及生理方面的研究主要集中在北方地區(qū)。近幾年來(lái)，為加快海水養(yǎng)殖結(jié)構(gòu)調(diào)整，對(duì)舟山本地褐牙鲆生殖生理方面的研究逐漸增多，并己初步建立適于舟山褐牙鲆的育苗生產(chǎn)工藝。本試驗(yàn)即通過(guò)建立一種快速而高效的超低溫冷凍保存模式，一方面為舟山褐牙鲆大規(guī)模工廠化苗種繁育提供可靠的參考依據(jù)；另一方面也為其種質(zhì)資源保存提供理論基礎(chǔ)。1褐牙鲆精子的生理學(xué)特性及超低溫冷凍保存褐牙鲆精漿pH值為(7．90±0．26)，精子密度為(1．03×1010)／ml，精漿滲透壓為(3
3、08．50±7．85)mOSⅡ派g，K，、Na●在精漿中的濃度分別為(27±3)mmo兒、(71±5)刪m兒，精子壽命(23±2)IIlin。在鹽度為35，pH為8時(shí)，精子的活力最高，分別達(dá)到(93．33±5．67)％和(89±3．33)％。精子在室溫(25℃)條件下，可存活4d；在低溫(4℃)條件下可以存活7d。以S3液作為稀釋液，16％的DMSO作為抗凍劑，利用快速降溫法對(duì)精子進(jìn)行超低溫冷凍保存，38℃水浴快速解凍，解凍后的精子獲得最高的活力為(84±3．67)％。此外，通過(guò)應(yīng)用計(jì)算機(jī)輔助精子分析系統(tǒng)(CASA)對(duì)超低溫冷凍前后褐牙鲆精子的運(yùn)動(dòng)參數(shù)進(jìn)行了分析，
4、結(jié)果表明：鮮精與凍精的運(yùn)動(dòng)精子占總精子數(shù)的百分率(MOT)，平均曲線運(yùn)動(dòng)速度(vCL)，平均直線運(yùn)動(dòng)速度(VSL)，平均上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文路徑運(yùn)動(dòng)速度(Ⅵ心)和精子運(yùn)動(dòng)路線的曲折程度(LIN)相比，都有顯著性差異(p<0．05)，而激活0．5min時(shí)，鮮精和凍精的MOT值差異不顯著(1)>0．05)。同時(shí)超低溫冷凍前后，直線運(yùn)動(dòng)、曲線運(yùn)動(dòng)、左右擺動(dòng)和不運(yùn)動(dòng)的精子數(shù)目占總精子數(shù)的百分值分別為(24．49士3．87)％、(48．53士4．55)％、(24．72士2．86)％和(2．27±1．22)％，而且隨著激活時(shí)間的延長(zhǎng)，褐牙鲆精子的運(yùn)動(dòng)狀態(tài)發(fā)生改變，直線運(yùn)動(dòng)
5、和曲線運(yùn)動(dòng)的精子數(shù)目逐漸減少，而不運(yùn)動(dòng)和左右擺動(dòng)的精子數(shù)目逐漸增多。2褐牙鲆精子超微結(jié)構(gòu)對(duì)自然成熟的褐牙鲆精子的超微結(jié)構(gòu)進(jìn)行了觀察，電鏡顯示，褐牙鲆精子的頭部近似球形，直徑(1．49士0．17)pm，尾部鞭毛較長(zhǎng)，達(dá)(40．17士0．65)肛l。褐牙鲆精子由頭部和尾部(鞭毛)構(gòu)成。頭部的頂端無(wú)頂體，頭部的細(xì)胞核為圓形，染色質(zhì)致密。精子細(xì)胞質(zhì)膜與核膜間有較大間隙，兩者之間分布有許多細(xì)胞質(zhì)和少量囊泡。植入窩位于細(xì)胞核后端的凹陷處，中心粒復(fù)合體位于植入窩內(nèi)?；w長(zhǎng)軸與精子的長(zhǎng)軸平行，近端中心粒與基體呈鈍角排列?；w的頭端由電子致密物質(zhì)構(gòu)成，基體的尾端與鞭毛軸絲起始端的的
6、9組外周二聯(lián)微管相連。袖套中分布著線粒體，近袖套內(nèi)膜的細(xì)胞質(zhì)中存在著一層與袖套內(nèi)膜平行并且比它薄的膜。尾部從袖套腔中伸出，分為主段和末段，主段中心結(jié)構(gòu)是軸絲。軸絲外有少許細(xì)胞質(zhì)，并在一定部位形成側(cè)鰭。軸絲起始端無(wú)中央微管對(duì)。在尾部的末段，軸絲逐漸降解、變細(xì)，形成鞭毛末端。關(guān)鍵詞：褐牙鲆，精子，活力，計(jì)算機(jī)輔助精子分析，超微結(jié)構(gòu)，植入窩，中心粒復(fù)合體II上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文QualityEValuationofCryopreserVationofSpermatozoainj’鈕，口鼬刀LJ愿D厲V口cP刀sbyUsingComputer-aidedSpermAn
7、alysisSystemABSTRACTBrownJ印a11esenoullder(PamlichthysoliVacens)、ⅣaSco衄oldyknown嬲h礎(chǔ)ibut，州cho毹nhabitatsi11sediment，s觚dofgraVel，b娟№en20聰d50meterSunderco嘲1waters．BrownJap觚esenoulldermailllydistributesiIltlleAsianseaSofC陸Ila，K0r％Jap觚鋤dRuSsia．neygrow￡弱t，l粥l(xiāng)a娼eindividu越，whichmeatis舶sh跚ldsaVo
8、r)r．B
