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《重組人源膠原蛋白ⅲ組織工程支架的制備及性能研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、碩士學(xué)位論文重組人源膠原蛋白Ⅲ組織工程支架的制備及性能研究作者：唐啟偉指導(dǎo)教師：樊燕蓉副教授楊樹林教授南京理工大學(xué)2014年3月MasterDissertationIIIIIIlllllllllllIIIllLIIIlllllllIllIIIY2521814PreparationandpropertiesstudyofrecombinanthumancollagenlIItissueengineeringscaffoldByTtQiweilangQiweiSupervisedbyPr吐FanYanrong場鱷Sh
2、ulinNanjingUniversityofScience&TechnologyMarch，2014聲明本學(xué)位論文是我在導(dǎo)師的指導(dǎo)下取得的研究成果，盡我所知，在本學(xué)位論文中，除-；jJn以標(biāo)注和致謝的部分外，不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或公布過的研究成果，也不包含我為獲得任何教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或?qū)W歷而使用過的材料。與我一同工作的同事對本學(xué)位論文做出的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。研究生簽名：，霪壺鮭洲年弓月婦學(xué)位論文使用授權(quán)聲明南京理工大學(xué)有權(quán)保存本學(xué)位論文的電子和紙質(zhì)文檔，可以借閱或上網(wǎng)公布本學(xué)位論文的部分或全部內(nèi)容，
3、可以向有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交并授權(quán)其保存、借閱或上網(wǎng)公布本學(xué)位論文的部分或全部內(nèi)容。對于保密論文，按保密的有關(guān)規(guī)定和程序處理。研究生簽名：重復(fù)!塹矽渺年鄉(xiāng)月哲日碩士論文重組人源膠原蛋III組織工程支架的制各及性能研究摘要膠原蛋白由于其良好的生物學(xué)特性已成為組織工程常用的載體材料。本研究所用重組人源膠原蛋白是通過基因工程法設(shè)計(jì)膠原蛋白基因序列，而后進(jìn)行翻譯所生產(chǎn)的具有人膠原蛋白特征的蛋白質(zhì)，與從動物體提取的膠原蛋白相比，具有親水性、無病毒隱患的優(yōu)點(diǎn)，且易于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，在組織工程支架材料的研究中有良好的應(yīng)用前景。但是單一
4、成分作為生物支架時都不能滿足支架的要求，本文利用重組人源膠原蛋EtIII與殼聚糖復(fù)合，采用戊二醛交聯(lián)的方法來制備重組人源膠原蛋t蘭tIII／殼聚糖三維海綿支架，并對支架理化性質(zhì)及細(xì)胞相容性進(jìn)行初步研究。其相關(guān)研究結(jié)果如下。1．本文首先利用構(gòu)建的畢赤酵母基因工程菌通過高密度發(fā)酵生產(chǎn)重組人源膠原蛋白(ImSC)，采用SDS．PAGE、質(zhì)譜、氨基酸組分分析及紅外光譜等方法對目的蛋白進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)RHSC是一種胞外分泌型產(chǎn)物，其單體分子量約56kD，二聚體分子量為單體的二倍，一級結(jié)構(gòu)與所設(shè)計(jì)目的基因相符合，并與Sigma
5、llI型膠原蛋白具有相似的結(jié)構(gòu)特征。2．探究重組人源膠原蛋EtIII／殼聚糖支架的制備工藝。將重組人源膠原蛋白III和殼聚糖按質(zhì)量比5：1，3：1，l：1，1：3，1：5混合，利用戊二醛進(jìn)行交聯(lián)，通過真空冷凍干燥法制備復(fù)合多孑L支架?？疾炝酥Ъ艿男蚊蔡卣?、孔徑大小、孔隙率、吸水率、降解率、熱穩(wěn)定性等理化性質(zhì)。結(jié)果顯示，制備的支架孔徑在20．50pm，孔隙率都在93％以上，殼聚糖的加入顯著改善了支架的降解性能。綜合各項(xiàng)理化性能結(jié)果，按照1：1配比制備的支架孔徑分布均勻，支架內(nèi)部孔隙交聯(lián)度高，吸水率和降解率較為合適，
6、熱分解溫度達(dá)到249．29℃，符合生物材料的基本要求。3．利用不同濃度戊二醛交聯(lián)制備支架，發(fā)現(xiàn)用0．05％的戊二醛進(jìn)行交聯(lián)制備的支架呈均勻分布的多孔結(jié)構(gòu)，孔隙豐富，且交聯(lián)度高，在生理鹽水中穩(wěn)定較好?？紤]選用終濃度為0．05％的戊二醛作為交聯(lián)劑，來制備殼聚糖／重組膠原復(fù)合支架。4．將重組人源膠原蛋白III和殼聚糖按1：1的配比，0．05％的戊二醛交聯(lián)并制備其支架浸提液，通過AO／EB染色，MTT實(shí)驗(yàn)，初步探討了其對人皮膚成纖維細(xì)胞的生物相容性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)其支架浸提液細(xì)胞毒性小，基本不影響細(xì)胞的生長活性，從側(cè)面反映了支
7、架具有良好的細(xì)胞相容性，有望應(yīng)用于皮膚組織工程。關(guān)鍵詞：重組人源膠原蛋白III殼聚糖高密度發(fā)酵真空冷凍干燥人皮膚成纖維細(xì)胞細(xì)胞相容性碩士論文重組人源膠原蛋白ⅡI組織工程支架的制備及性能研究AbstractCollagenhasbecomeconventionalcarriermaterialfortissueengineeringduetoitsgoodbiologicalproperties．TherecombinanthumancollagenusedinthisstudyWaspro—ducedbygene
8、ticengineeringmethodtodesignthecollagenproteingenesequences，andthenhasthecharacteristicsofhumancollagenproteinthroughtranslationprocess．Comparedwiththecollagenfromanimalbody,therecombinan
