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《絲素蛋白復(fù)合膠原蛋白支架的制備及性能研究.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、中國修復(fù)重建外科雜志2014年7月第28卷第7期·903·絲素蛋白復(fù)合膠原蛋白支架的制備及性能研究孫凱年爭好徐成李瑞欣李暉【摘要】目的制備不同質(zhì)量比的絲素蛋白復(fù)合膠原蛋白支架，分析其綜合性能，優(yōu)選軟骨組織工程支架材料。方法按絲素蛋白：膠原蛋白不同質(zhì)量比，采用真空冷凍干燥法制備3種復(fù)合支架，分別為4：2(A組)、4：4(B組)和4：8(C組)；檢測每組復(fù)合支架的孔隙率、吸水膨脹率、力學(xué)性能及孔徑。采用密度梯度離心法分離培養(yǎng)4周齡雄性Wistar大鼠BMSCs，取第3代BMSCs接種于各組復(fù)合支架，
2、培養(yǎng)1、3、5、7、9、11、13d，MTT檢測支架內(nèi)細胞增殖情況；培養(yǎng)14d采用HE染色和掃描電鏡觀察細胞在支架內(nèi)部增殖、分布情況。結(jié)果A、B、C組支架孔隙率分別為94．6％4-1．6％、80．6％4-1．1％、60．6％4-1．0％，A組顯著高于B、c組，B組高于C組(
3、P<0．05)。吸水膨脹率分別為1523．7％4-186．6％、1091．0％4-151．6％、659．6％士161．4％，A組顯著高于B、C組，但組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(，-_6．67，P=-0．08)；各組支架均具有較
4、好的黏彈性，A、B、C組彈性模量分別為(23．14-2．5)、(25．14-2-3)、(29．8土2．6)kPa，組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(2．00，P-0．28)，符合關(guān)節(jié)軟骨彈性模量值(4～35kPa)；A、B、C組支架孔徑分別為(1034-12)、(804-15)、(604-16)1，3組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(=2．22，P=0．26)。MTT檢測示，7、9、l1、13d時A組細胞增殖高于B、C組(P<0．05)。培養(yǎng)14d，掃描電鏡觀察示A組支架孔徑大小較一致，相通性好，細胞在支架內(nèi)部
5、生長良好，伸展充分，基質(zhì)分泌多：B、C組支架孔徑較小，孔隙間相通性差，細胞在內(nèi)部生長較差；HE染色和掃描電鏡示支架內(nèi)部A組細胞數(shù)量明顯多于B、C組。結(jié)論以絲素蛋白：膠原蛋白質(zhì)量比為4：2制備復(fù)合支架具有合適的孔隙率、吸水膨脹率、彈性模量和孔徑，細胞在支架內(nèi)部增殖更好，是軟骨組織工程的理想支架材料?！娟P(guān)鍵詞】軟骨組織工程絲素蛋白膠原蛋白復(fù)合支架BMSCs大鼠PREPARATl0NANDPERFORMANCERESEARCHOFSILKFIBR0lNC0LLAGENBLENDSCAFFOLD／SUN
6、Kaill2一。NIANZhenghaol2一．XUChenge,LIRuixin2LIHui3,．1GraduateSchoolofTianjinMedicalUniversity,Tianjin．300070．P．R．China；2InstituteofMedicalEquipment,AcademyofMilitaryandMedicalSciences；3DepartmentofOrthopedics,TianjinMedicalUniversityGeneralHospita1．Cor
7、respondingauthors：LIHui,E-mail：ortholivea@126．com；LIRuixin，E—mail：limxinxin@163．corn[Abstract]0bj}ectiveTopreparecompositescafoldofdifferentqualityratioofsilkfibrointocollagen，analyzethescafoldperformance，andoptimizethequalityratioforchondrocytetissu
8、eengineering．MethodsThesilkfibroin／collagencompositescafoldwasmadeusingafreeze·dryingtechniqueindiferentqualityratiosofsilkfibrointocollagen：4：2(groupA)，4：4(groupB)，and4：8(groupC)．Theporosity，waterabsorptionexpansionrate，mechanicalproperties，andpores
9、izeofcompositescaffoldweredetected．Thebonemarrowmesenchymalstemcells(BMSCs)wereisolatedfrom4-week-oldmaleWistarratsbydensitygradientcentrifugation，andthethirdgenerationBMSCswereseededontothescaffoldsat2×10cells／mLdensity，andwereculturedfor14days．Thec
