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《馬腺疫鏈球菌的分離鑒定及fn結(jié)合蛋白免疫原性的研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育單位的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名：白7君吟I固時(shí)間：弘，昨朔鑼日關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說(shuō)明本人完全了解新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子文檔，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編
2、學(xué)位論文，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)新疆農(nóng)業(yè)．大學(xué)’●將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以公布。(包括刊登)論文的全部或部分內(nèi)容。(保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)研究生簽導(dǎo)師簽名時(shí)間：弦·牛年‘月，；日時(shí)間：矽，牛年‘月，多日萬(wàn)方數(shù)據(jù)本文是國(guó)家星火計(jì)劃項(xiàng)目“孕馬標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖技術(shù)集成與示范推廣”(項(xiàng)目編號(hào)：2011GA890008)和自治區(qū)重大專項(xiàng)“建立孕馬疾病綜合防控模式、乳用馬疫病防控技術(shù)研究與示范、速步馬疾病防控技術(shù)研究與示范刀(項(xiàng)目編號(hào)：201130101．4．6、201130101-3．2、201130101-1．6)的部分研究成
3、果‘課題主持人：冉多良教授萬(wàn)方數(shù)據(jù)馬腺疫鏈球菌的分離鑒定及剛結(jié)合蛋白免疫原性的研究摘要本實(shí)驗(yàn)通過(guò)分離鑒定馬腺疫鏈球菌新疆株并對(duì)馬腺疫鏈球菌新疆株的FNE和FNEB基因的克隆及原核表達(dá)，獲得FNE和FNEB截短基因編碼的蛋白，并免疫小鼠分析表達(dá)產(chǎn)物的免疫原性。本研究從馬腺疫病馬的膿汁中分離純化得到革蘭氏陽(yáng)性球菌，經(jīng)生化和PCR鑒定出該菌為馬腺疫鏈球菌，其對(duì)小鼠具有致病性。采用特異性引物PCR擴(kuò)增馬腺疫鏈球菌新疆株FNE基因片段和FNEB基因部分片段，克隆至pMDl9-T載體。利用分子生物學(xué)軟件分析測(cè)序結(jié)果，將FNE和FNEB部分基因亞克隆至原核表達(dá)載體．pET-30
4、a中，轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞，．以IPTG誘?’，’導(dǎo)FNE和FNEB重組蛋白的表達(dá)，經(jīng)SDS．PAGE分析在46ld)和58kD處出現(xiàn)明顯條帶，Westernblot分析顯示具有反應(yīng)原性。純化表達(dá)的融合蛋白免疫小鼠，以馬腺疫鏈球菌新疆分離株攻毒免疫的小鼠后，F(xiàn)NE免疫組小鼠無(wú)保護(hù)力而FNEB免疫組小鼠的保護(hù)率約為600,4，表明FNEB蛋白具有較好的免疫保護(hù)性。本研究成功的從新疆伊犁地區(qū)分離出一株馬腺疫鏈球菌新疆株，成功克隆和表達(dá)了馬腺疫鏈球菌的FNE和FNEB截短基因，免疫小鼠獲得較好的保護(hù)效果，為重組馬腺疫鏈球菌FNE和FNEB蛋白亞單位疫
5、苗的研制奠定基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞：馬腺疫鏈球菌：分離鑒定；FNE基因：FNEB基因：原核表達(dá)；免疫保護(hù)萬(wàn)方數(shù)據(jù)IsolationandidentificationofStreptococcushorsestranglesandFNbindingproteinimmunogenicitystudyAbstractInthisstudy,Byseparatingandtheidentificationofstreplococc憾horsestranglesfromXinjiang．CloningandprokaryoticexpressionofStreptococcusho
6、rsestranglesfromXinjiangFNEandFNEBgenes．GettingtheFNEandFNEBtruncatedproteintoimmunizedmice．Analyzingtheimmunogenicityoftheexpressedproduct．SeparatingandgettingGram-positiveCoccifromthepusintheincidenceofhorsesbytheclinicalmanifestationsofStreptococcus’horsestrangles．WhichoneisStrepto
7、coccusequibybiochemicalidentificationandPCRidentification．Itcouldpathogenicinmice．AfragmentofFNEgeneandFNEBgeneareamplifiedfromStreptococcusequisubsp．equiisolatedfromXinjiangbyPCRandclonedintopMDl9-Tvector．Afterseq礬nceanalysisbymolecularbiologysoft'wares，thetruncatedFNEgeneandFNEBgene
8、aresu
