小麥抗赤霉病近等基因系的轉(zhuǎn)錄組分析及抗病相關(guān)基因的克隆

小麥抗赤霉病近等基因系的轉(zhuǎn)錄組分析及抗病相關(guān)基因的克隆

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3、?..51.1.1小麥赤霉病病原菌及病癥???????????????????????一51.1.2小麥赤霉病抗病機(jī)制研究進(jìn)展?????????????????????。61.2轉(zhuǎn)錄組學(xué)的原理及其主要技術(shù)方法????????????????????.61.2.1DNA微陣列(DNA面c∞町a(chǎn)y)技術(shù)????????????????????71.2.2抑制性差減雜交(SuppressionslJbn佻垃veh姍dization,SS均技術(shù)???????81.2.3基因表達(dá)序列分析技術(shù)(SAGE)與大規(guī)模平行測

4、序技術(shù)(MPSS)技術(shù)???.91.2.3.1基因表達(dá)序列分析技術(shù)(SAGE)???????????????????91.2.3.2大規(guī)模平行測序技術(shù)(MPSS)技術(shù)??????????????????101.2.4c研叮A文庫或表達(dá)序列標(biāo)簽(Expfessedsequencetags,EST)文庫測序技術(shù)??111.2.5RNA測序技術(shù)(對(duì)叮A.seq)??????????????????????111.3轉(zhuǎn)錄組學(xué)在小麥抗病遺傳育種研究中的應(yīng)用????????????????121.4植物與病原菌的互作及

5、植物抗病機(jī)制???????????????????141.5NPRl在植物抗病性中的重要作用????????????????????.151.6本研究的目的與意義??????????????????????????152材料和方法?...?????????????????????????????172.1材料???????????????????????????????????????????。172.1.1供試材料??????????????????????????????.172.1.2菌株與質(zhì)粒???

6、??????????????????????????.172.1.3酶及生化試劑????????????????????????????172.1.4主要儀器??????????????????????????????172.1.5引物設(shè)計(jì)與合成???????????????????????????182.2方法???????????????????????????????????????????..182.2.1植物材料的培養(yǎng)及處理????????????????????????182.2.2掃描電鏡樣品

7、制備及觀察???????????????????????192.2.3RNA的提取??????????????????????????????????????.192.2.4表達(dá)譜的構(gòu)建及測序?????????????????????????202.2.5生物信息學(xué)分析???????????????????????????212.2.6cDNA的合成????????????????????????????一212.2.7基因表達(dá)分析????????????????????????????212.2.8目的基

8、因的克隆???????????????????????????2l2.2.9序列分析和同源性比對(duì)????????????????????????233結(jié)果與分析??????????????????????????????。233.1小麥近等基因系響應(yīng)赤霉病菌侵染的表達(dá)譜分析??????????????233.1.1掃描電鏡觀察????????????????????????????.233.1.2文庫的構(gòu)建及測序

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