吳茱萸堿對(duì)人前列腺癌du145細(xì)胞的體外作用及其機(jī)制的研究

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1、學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。．’／：。10f‘‘》≮．，o、研究生簽名：顰狗卑導(dǎo)師簽章：j級(jí)學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)蓋章：√、，譬。＼札彳’年月一．河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)

2、行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：厶矽，，l昶礦年煢乃幣少j吵2聊少目錄中文摘要??????????????????????????·l英文摘要????????????????????????????··3研究論文吳茱萸堿對(duì)人前列腺癌DUl45細(xì)胞的體外作用及其機(jī)制的研究前言?????????????????????????????????”5。剛吾??????????

3、???????????????????????”材料與方法????????????????????????”6結(jié)果?????????????????????????????????一13附圖·??????????????????????????15附表??????????????????????????·25討論??????????????????????????”27結(jié)論?????????????????????????????????”30參考文獻(xiàn)??????????????????????????”30

4、綜述ERK／MAPK信號(hào)通路各蛋白與相關(guān)腫瘤?????????··34致謝????????????????????????????43個(gè)人簡(jiǎn)歷?????????????????????????“44中文摘要吳茱萸堿對(duì)人前列腺癌DUl45細(xì)胞的體外作用及其機(jī)制的研究摘要目的：在體外研究吳茱萸堿(evodiamine，evo)對(duì)人前列腺癌DUl45細(xì)胞增殖、凋亡的影響，并探討其可能作用機(jī)制。方法：細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)體外培養(yǎng)人前列腺癌DUl45細(xì)胞，用不同濃度的吳茱萸堿進(jìn)行干預(yù)。MTT法檢測(cè)各濃度吳茱萸堿對(duì)人前列腺癌DU

5、l45細(xì)胞增殖的影響；流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定吳茱萸堿對(duì)細(xì)胞周期和凋亡的影響；倒置光學(xué)顯微鏡下觀察DUl45細(xì)胞形態(tài)變化；免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)前列腺癌DUl45細(xì)胞內(nèi)PCNA的表達(dá)情況；WesternBlot方法檢測(cè)t-ERK、P．ERK及CleavedCaspase．3的表達(dá)。用SPSSl3．0統(tǒng)計(jì)軟件處理所得結(jié)果，以P

6、細(xì)胞經(jīng)過吳茱萸堿處理后細(xì)胞內(nèi)增殖標(biāo)志物PCNA表達(dá)降低，細(xì)胞內(nèi)總的ERKl／2蛋白表達(dá)水平無明顯變化，而磷酸化ERKI／2蛋白與對(duì)照組相比水平下降。2吳茱萸堿對(duì)DUl45細(xì)胞周期的影響：流式細(xì)胞分析技術(shù)結(jié)果顯示，經(jīng)過吳茱萸堿作用24小時(shí)后各個(gè)濃度組(10～M、10～M、10弓M)所處理結(jié)果顯示各周期內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量發(fā)生明顯變化，其中G。、S期細(xì)胞明顯減少而G2／M期細(xì)胞積累增多，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即吳茱萸堿使DUl45細(xì)胞增殖阻滯于G2／M期。3吳茱萸堿可誘導(dǎo)DUl45細(xì)胞凋亡：流式細(xì)胞分析技術(shù)結(jié)果顯示，吳茱萸

7、堿各濃度組(10。7M、lO擊M、10。5M)作用于DUl45細(xì)胞72h后，凋亡細(xì)胞明顯增多，且凋亡率隨著藥物濃度的增加而增加，呈現(xiàn)藥物濃度依賴方式，經(jīng)過各濃度組吳茱萸堿處理后的DUl45細(xì)胞所測(cè)得的凋亡率結(jié)果差異使用單因素方差分析有顯著性差異(尸

8、，可能通過抑制ERK磷酸化水平從而實(shí)現(xiàn)抑制其增殖作用。2吳茱萸堿可誘導(dǎo)DUl45細(xì)胞凋亡，推測(cè)通過激活Caspase．3上調(diào)CleavedCaspase．3的表達(dá)量是吳茱萸堿誘導(dǎo)DUl45細(xì)胞凋亡的機(jī)制之一。關(guān)鍵詞：吳茱萸堿；前列腺癌DUl45細(xì)胞；增殖；凋亡；英文摘要一_—————————————————————————————————————————————_————————————一Study