骨髓間充質干細胞移植治療去勢大鼠骨質疏松的研究

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1、廣州醫(yī)學院碩士學位論文骨髓間充質干細胞移植治療去勢大鼠骨質疏松的研究廣州醫(yī)學院碩士學位論文骨髓間充質干細胞移植治療去勢大鼠骨質疏松的研究TheStudyofBoneMarrowMesenchymalStemCellsRemedytheOsteoporosisoftheOvariectomizedRats碩士研究生：余博臣導師：高梁斌教授專業(yè)：脊柱外科廣州醫(yī)學院2012年5月2廣州醫(yī)學院碩士學位論文骨髓間充質干細胞移植治療去勢大鼠骨質疏松的研究目錄中文摘要…………………………………………………………

2、……………………1英文摘要………………………………………………………………………………3前言……………………………………………………………………………………5第一部分大鼠骨髓間充質干細胞的培養(yǎng)與誘導成骨分化及鑒定………………..8材料與方法…………………………………………………………………………9結果………………………………………………………………………………..12討論………………………………………………………………………………..14結論…………………………………………………………………………

3、……..18第二部分骨髓間充質干細胞治療去勢大鼠骨質疏松的研究……………………19材料與方法………………………………………………………………………..20結果………………………………………………………………………………..24討論………………………………………………………………………………..29結論………………………………………………………………………………..34參考文獻……………………………………………………………………………..36文獻綜述…………………………………………………………………

4、…………..39攻讀學位期間主要研究成果………………………………………………………..52致謝…………………………………………………………………………………..53學位論文原創(chuàng)性聲明………………………………………………………………..54學位論文知識產權權屬聲明………………………………………………………..54關于學位論文使用授權的說明……………………………………………………..543廣州醫(yī)學院碩士學位論文骨髓間充質干細胞移植治療去勢大鼠骨質疏松的研究縮略語簡表BMSCsBonemarrowmes

5、enchymalstemcells骨髓間充質干細胞BMDBonemineraldensity骨密度OPOsteoporosis骨質疏松癥POPPrimaryosteoporosis原發(fā)性骨質疏松SOPSecondaryosteoporosis繼發(fā)性骨質疏松MMAMethylmethacrylate甲基丙烯酸甲酯DBPDibutylphthalate鄰苯二甲酸二丁酯BPOBenzoylperoxide無水過氧化苯甲酰4廣州醫(yī)學院碩士學位論文骨髓間充質干細胞移植治療去勢大鼠骨質疏松的研究骨髓間充質干細

6、胞移植治療去勢大鼠骨質疏松的研究碩士研究生：余博臣導師：高梁斌教授專業(yè)：脊柱外科中文摘要第一部分大鼠骨髓間充質干細胞的培養(yǎng)與誘導成骨分化及鑒定摘要背景：骨髓間充質干細胞具有多向分化潛能，但在骨髓中含量極低，收集足夠數(shù)量的骨髓間充質干細胞，對組織工程及細胞的體內、外實驗至關重要。目的：通過體外獲取和培養(yǎng)純度高、生物特性均一的骨髓間充質干細胞，并向成骨誘導分化，為后續(xù)實驗做準備。方法：通過全骨髓貼壁法分離、培養(yǎng)、純化大鼠骨髓間充質干細胞，進行形態(tài)學觀察，流式細胞儀檢測細胞表面標記物，鑒定后將所有骨髓間

7、充質干細胞向成骨誘導分化。結果：大鼠骨髓間充質干細胞生長以梭形細胞為主，呈放射狀排列的細胞集落，可連續(xù)穩(wěn)定傳代6代以上。第3代骨髓間充質干細胞CD44呈陽性表達，而CD45呈陰性。成骨誘導后，經茜素紅染色8結果為陽性。所得細胞總數(shù)為2.0×10個，純度達99.27%。結論：全骨髓貼壁培養(yǎng)法操作簡單，可大量分離、純化、擴增骨髓間充質干細胞，所獲細胞具有間充質干細胞的一般生物學特性，經誘導培養(yǎng)后向成骨誘導分化，可為后續(xù)實驗提供基礎。關鍵詞：骨髓間充質干細胞；培養(yǎng)；形態(tài)學；成骨分化5廣州醫(yī)學院碩士學位論

8、文骨髓間充質干細胞移植治療去勢大鼠骨質疏松的研究第二部分骨髓間充質干細胞治療去勢大鼠骨質疏松的研究摘要目的：探討去勢骨質疏松大鼠股骨骨髓腔注入骨髓間充質干細胞對股骨骨密度、生物力學及骨微結構的影響。方法：將32只六月齡雌性SD大鼠隨機分為：假切（Sham）對照組12只和骨質疏松組20只，雙側卵巢切除術后3個月兩組各隨機取4只大鼠處死后測股骨骨密度，再將骨質疏松組隨機分成單純去勢（OVX）組及去勢+骨髓間充質干細胞組（OVX+MSC）組各8只，OVX+MSC組大鼠雙側股骨骨髓腔注入誘