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《宮頸癌原代細(xì)胞的分離及腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物的檢測(cè)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、摘要宮頸癌原代細(xì)胞的分離及腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物的檢測(cè)碩士研究生白晶導(dǎo)師李愛軍鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科中國(guó)鄭州450052背景與目的：宮頸癌是危害婦女健康的主要惡性腫瘤之一，盡管人類從未停止過(guò)對(duì)宮頸癌的研究，并取得了很大突破，但是宮頸癌仍是嚴(yán)重威脅廣大婦女身心健康的危險(xiǎn)因素之一。隨著腫瘤干細(xì)胞學(xué)說(shuō)的興起，宮頸癌干細(xì)胞的研究也逐漸起步，研究人員試圖通過(guò)尋找宮頸癌干細(xì)胞為宮頸癌的診治開辟新路。標(biāo)記物的研究是宮頸癌干細(xì)胞研究的前提，目前已發(fā)現(xiàn)了一些可能成為腫瘤干細(xì)胞的標(biāo)記物，如CD44、CD24、CDl33、ABCG2等，但這些標(biāo)記物是否可以成為宮頸癌干細(xì)胞的標(biāo)記物，仍需要更多的研
2、究來(lái)證實(shí)。本研究結(jié)合目前腫瘤干細(xì)胞的研究成果，對(duì)宮頸癌原代細(xì)胞進(jìn)行分離和培養(yǎng)，并采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物CD44和CD24在宮頸癌原代細(xì)胞中是否有表達(dá)，同時(shí)檢測(cè)其在外周血中的表達(dá)：此外，本實(shí)驗(yàn)采用免疫組化和免疫熒光雙染法定位檢測(cè)兩種標(biāo)記物在宮頸癌中的表達(dá)，以豐富實(shí)體瘤的研究。，：三方法：收集2011年lO月1日至2012年10月1日在河南省鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院行婦科手術(shù)的宮頸癌患者標(biāo)本(包括癌組織和外周血)，臨床分期(IA～I(xiàn)IB期)16例，按國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(Int鋤ationalFed訓(xùn)ionofGyllecologya11dobstetrics，F(xiàn)IGO)分
3、期標(biāo)準(zhǔn)：IA期4例、IB期5例、IIA期4例和lIB期3例。癌組織病理類型為浸潤(rùn)性鱗狀上皮癌，患者中位年齡56歲(32～71歲)；同期河南省鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科行子宮全切術(shù)的正常宮頸組織lO例作為對(duì)照；摘要患者中位年齡43歲但6～63歲)。首先應(yīng)用蛋白酶消化法分離宮頸癌組織，然后用腫瘤干細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)分離出的懸浮細(xì)胞，培養(yǎng)一段時(shí)間后，因原代細(xì)胞雜質(zhì)較多，再用淋巴細(xì)胞分離液分離可得到較為純凈的細(xì)胞球。外周血的分離采用淋巴細(xì)胞分離液分離以獲得單個(gè)核細(xì)胞；然后應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物CD44和CD24在宮頸癌原代細(xì)胞及外周血中的表達(dá)情況，最后應(yīng)用免疫組化和免疫熒光
4、雙染的方法檢測(cè)CD44和CD24在宮頸癌組織的表達(dá)情況。結(jié)果：1．宮頸癌原代培養(yǎng)過(guò)程顯示：采用蛋白酶消化法和腫瘤干細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)能得到宮頸癌懸浮細(xì)胞球；但在正常宮頸組織無(wú)法得到懸浮細(xì)胞球。2．流式細(xì)胞儀檢測(cè)腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物CD44和CD24，結(jié)果顯示在宮頸癌懸浮細(xì)胞球表面表和外周血中均有CD44和CD24表達(dá)，而且有CD44+單陽(yáng)，CD24+單陽(yáng)，cD44+cD24+雙陽(yáng)的細(xì)胞群；但在正常宮頸組織和健康對(duì)照者外周血中無(wú)CD44和CD24的表達(dá)。≥。免疫組化顯示：CD44和CD24表達(dá)于宮頸癌組織，但在正常組織中無(wú)表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。免疫熒光雙染顯示：CD44和CD24
5、可同時(shí)表達(dá)于宮頸癌細(xì)胞表面。結(jié)論：1．采用蛋白酶消化法和腫瘤干細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng)可得到宮頸癌懸浮細(xì)胞球。2．腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD44和CD24在宮頸癌組織和外周血中有表達(dá)，但在正常對(duì)照組無(wú)表達(dá)。關(guān)鍵詞】宮頸癌；腫瘤干細(xì)胞；CD44，CD24；腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物；IIIsolationoftheprimitivecellsfromcerucalcancerandidentificationofcancerstemceUmarkersandldennnCanon0ICanCerStemCeUmarKerSobject～eA．bstractCervicalcancerisoncofm
6、emainmali印anttIlmofshamtowomenhealm，A1t110u曲humaIlhasnevefstoppedaboutcerVicalc觚cerres鋤．Ch，andmadeagreatbre啦：tllrou擘虬mecervicalcancerisalsooneofnles耐ousnlreatriskf礎(chǔ)orst0wom∞’sphys?"x剛舌宮頸癌原代細(xì)胞的分離及腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物的檢測(cè)碩士研究生白晶導(dǎo)師李愛軍鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科中國(guó)鄭州450052前言干細(xì)胞以其強(qiáng)大的增殖能力及多向分化的特性成為生命科學(xué)研究的熱點(diǎn)，腫瘤起源于組織干細(xì)胞或祖細(xì)胞
7、，該細(xì)胞的突變或表觀遺傳等變化產(chǎn)生腫瘤干細(xì)胞，它只占腫瘤細(xì)胞的很少部分，但卻有著強(qiáng)大的致瘤性，轉(zhuǎn)移性和放療抵抗性。近年來(lái)在白血病【l】，乳腺癌【2捌，腦膠質(zhì)瘤【4，5】中發(fā)現(xiàn)了腫瘤干細(xì)胞的表面標(biāo)志物，但并非只有在這3種腫瘤中存在腫瘤干細(xì)胞，比如宮頸癌；目前宮頸癌的治療主要是以手術(shù)、放療為主，化療為輔的綜合治療，可仍舊無(wú)法擺脫復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移的結(jié)局。隨著腫瘤干細(xì)胞學(xué)說(shuō)的興起，婦科腫瘤專家們便將目光投向了在復(fù)發(fā)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移中起至關(guān)重要作用的宮頸癌干細(xì)胞，試圖通過(guò)尋找宮頸癌干細(xì)胞為宮頸癌的診治開辟新路。標(biāo)記物的研究是宮頸癌干細(xì)胞研究的前提
