mir-148a抑制肝癌細胞7721侵襲遷移的作用研究

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1、張子蘭:miR.148a抑制肝癌細胞7721侵襲遷移的作用研究三miR.148a抑制肝癌細胞7721侵襲遷移的作用研究中文摘要中文于兩要原發(fā)性肝癌是肝細胞或肝內(nèi)膽管上皮發(fā)生的惡性腫瘤。盡管其治療方法有了很大進步,但其復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移仍十分常見。因此,探索肝癌侵襲轉(zhuǎn)移機制,尋找新的臨床治療靶點,在肝癌的治療中具有重要作用。microRNA是一些細胞程序的調(diào)節(jié)因子,研究發(fā)現(xiàn)人類肝癌/肝癌伴轉(zhuǎn)移組織中miRNAs存在差異表達,因而,探索miRNAs與肝癌侵襲轉(zhuǎn)移等生物學特性的影響很有必要。目的:檢測肝癌/肝癌伴轉(zhuǎn)移組織中差異表達的miRNAs,觀察

2、miR.148a與肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系,為肝癌的基因治療提供新的實驗依據(jù)。方法:應(yīng)用miRNA芯片技術(shù)檢測肝癌/肝癌伴轉(zhuǎn)移組織中差異表達的miRNAs,篩選差異表達的miRNAs;利用Transwell小室法和細胞劃痕實驗檢測肝癌細胞侵襲與遷移能力;采用明膠酶譜法及蛋白免疫印記法(Westemblot)檢測基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP.2)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP.9)的表達情況,進而,分析其與肝癌侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)系。結(jié)果:miRNA芯片技術(shù)結(jié)果顯示miR.148a在肝癌伴轉(zhuǎn)移組織中顯著下調(diào),半定量RT-PCR結(jié)果顯示,和對照組相比,LV-m

3、iR.148a感染組肝癌細胞表達miR.148a明顯增高(P<0.01),Transwelld,室法及細胞劃痕實驗結(jié)果顯示過表達miR.148a明顯抑制肝癌細胞7721侵襲遷移能力(P<0.05),明膠酶譜法與Westernblot結(jié)果顯示過表達miR.148a降低肝癌細胞7721中MMP.2和MMP.9蛋白的表達。揚州大學碩士學位論文結(jié)論:miR.148a在體外能抑制肝癌細胞7721的侵襲與遷移,其機制可能與下調(diào)MMP-2和MMP.9的表達水平有關(guān)。關(guān)鍵詞:miR.148a;肝癌;侵襲遷移;MMP.2;MMP.9張子蘭:miR.148

4、a抑制肝癌細胞7721侵襲遷移的作用研究ResearchonFunctionofmiR-148aintheInvasionandMetastasisofSMMC.7721Abstract3一Primarylivercanceristhemalignanttumoroflivercellsorintrahepaficbileductepithelium.Hepatocellularcarcinoma(HCC)isanaggressivecancerwithadismaloutcomelargelyduetometastasisandpos

5、tsurgicalrecurrence.Exploringthemechanismofthedevelopmentoflivercancerandlookingfornewclinicaltherapeutictargetsplaysanimportantroleinthetreatmentofhepatocellularcarcinoma.Recentstudiesindicatethatexpressionprofilingwithsmall,noncodingRNAgeneproductsknownasmicroRNAs(miRN

6、As)isasuperiormethodforcancersubtypeclassificationandprognostication.ItisimportanttoinvestigatetherelationshipbetweenmiRNAsandlivercancerinvasionandmetastasis.Purposes:UsingmiRNAmicroarraytodetectthedifferentexpressionofmicroRNAsinhepatocellularcarcinoma/hepatocellularca

7、rcinomawithmetastasis.BystudyingthecorrelationbetweenmiR-148aandmetastasis,itCanprovidenewideasandexperimentmethods.Methods:MiRNAmicroarraywasusedtoinvestigatethedifferentexpressionofmicroRNAsinhepatocellularcarcinoma/hepatocellularcarcinomawithmetastasis.Weusedtranswell

8、chamberassayandcellscratchtesttodetectthelivercancercelllinemetastaticpotential.Theproteinexpressionofm

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