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《預(yù)知子提取物對大鼠腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、南方醫(yī)科大學(xué)2010級碩士學(xué)位論文預(yù)知子提取物對大鼠腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響EffectsofFructusAkebiaeextractsonthelevelofmonoamineneurotransmitterinratbrain課題來源：國家自然科學(xué)基金項目：預(yù)知子抗抑郁活性的物質(zhì)基礎(chǔ)與作用機(jī)制研究(No．30772713)學(xué)位申請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院答辯委員會主席答辯委員會委員薛天楊雪梅藥物化學(xué)學(xué)術(shù)型碩士研究生藥學(xué)院雷林生袁牧鄢明佘志剛陳文華2013年4月3目廣州IIIIIII
2、IIllUlIIIIIIIIIIIIlY2406511碩士學(xué)位論文預(yù)知子提取物對大鼠腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響碩士研究生：薛天指導(dǎo)教師：楊雪梅副教授摘要目的建立準(zhǔn)確、靈敏、操作簡便的高效液相色譜一電化學(xué)檢測法(HPLC．ECD)，測定大鼠腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量；考察預(yù)知子提取物(FAE)對大鼠前額皮層、海馬、紋狀體中去甲腎上腺素(NA)、多巴胺(DA)、五羥色胺(5．HT)含量的影響，探索FAE可能的抗抑郁機(jī)制。建立檢測馬兜鈴酸A的高效液相色譜法(HPLC-DAD)，檢測FAE與常春藤皂苷元(Heder
3、agenin)中，是否含有腎毒性殘留成分馬兜鈴酸A，進(jìn)一步完善質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，以確保FAE和常春藤皂苷元的用藥安全性。方法1、大鼠腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)測定方法的建立：采用HPLC．ECD法測定大鼠腦組織中NA、DA、5．HT的遞質(zhì)含量，以3，4．二羥基芐胺(DHBA)為內(nèi)標(biāo)。采用的色譜條件為，色譜柱：DikmaDiamonsil．C18(5lam，4．6x250mm)；流動相：A．B(90：10)，A為磷酸二氫鈉水溶液(含25．0mmol／LNail2P04，1．7mmol／L辛烷磺酸鈉，O．7mmol／L三乙胺
4、，0．025mmol／LEDTA．2Na，pH=3．0)，B為乙腈；流速：1．0mL／min；柱溫：32℃；檢測電勢：E1=．150V，E2=220V，進(jìn)樣量20“L。中文摘要2、FAE對大鼠腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響：(1)急性給藥實驗：將體重范圍在200．220g的雄性SD大鼠，隨機(jī)分為4組，即溶劑對照(0．5％羧甲基纖維素鈉)組、草酸．S．西酞普蘭(ESC)10mg／kg陽性對照組、FAE50mg／kg給藥組和FAE25mg／kg給藥組。各組動物均灌胃一次，灌胃體積為10mL／kg；大鼠單次給藥后分別
5、于1h、2h、3h、5h四個時間點取出腦組織，冰上操作分離不同腦區(qū)，收集樣品待測。(2)亞急性給藥實驗：將體重范圍在200．220g的雄性SD大鼠，隨機(jī)分為4組(同急性給藥實驗)，除溶劑對照組灌胃給予O．5％羧甲基纖維素鈉外，其余各組灌胃給予相應(yīng)藥物處理；各組動物每日灌胃1次，每次灌胃體積為10mL／kg，連續(xù)給藥21d，并于末次給藥2h后收集樣品。(3)樣品處理：大鼠斷頭處死，迅速取出全腦，于冰上快速分離出前額皮層、海馬、紋狀體部位，置凍存管存于液氮。取凍存的腦組織，稱重后置于玻璃勻漿器，按10mL／kg的比例
6、加入預(yù)冷含內(nèi)標(biāo)DHBA的高氯酸工作液，于冰浴下快速勻漿2min。將研磨好的勻漿液移入棕色離，tl,管，于4℃條件下14000xg離一Ii,20min后取上清液，上清液再用0．22gm濾器過濾后上機(jī)檢測。(4)數(shù)據(jù)處理：各部位的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)含量，均換算成濕組織濃度(ng／g)，并用SPSSl3．0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析(ONE．WAYANOVA)，結(jié)果用GraphPadPrism5作圖。3、馬兜鈴酸A檢測方法的建立：采用HPLC．DAD法，樣品用DikmaDiamonsil．C18柱(5gm，4．6x250mm)進(jìn)行分離
7、；以乙腈一水一冰醋酸(80：20：0．04)作為流動相；流速1．0mL／min，柱溫為32℃，進(jìn)樣量為20¨L；檢測波長分別為210nm與250nm。結(jié)果1、測定大鼠腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的HPLC．ECD法：樣品中的內(nèi)源性物質(zhì)不干擾檢測，各色譜峰均有效分離。NA、DA、5．HT的定量下限依次為12．0ng／mL、9．8ng／mL、20．8ng／mL，分別在0．0240-0．2400，0．0196-0．1960，0．0226-0．2260J，tg／mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(R2之O．9996)；平均回收率分別為NA
8、：84．41‰102．77％，DA：87．52％～104．61％，5-HT：lT碩士學(xué)位論文83．74％101．66％，RSD均小于15％；日內(nèi)精密度均在3．05％5．81％范圍內(nèi)，日間精密度在4．98％～7．59％之間。2、急性給藥處理后，大鼠腦組織各部位的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)變化結(jié)果：(1)在前額皮層與海馬部位，與溶劑對照組比較，NA在急性給予25mg／kg和50mg／kg
