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《藻毒素降解菌、溶藻細(xì)菌分離鑒定及其原生質(zhì)體制備》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、Isolation,IdentificationofMicrocystinDegradingBacteriaandAlgae-lysingBacteriaandProtoplastPreparationofT1strainADissertationSubmittedtoChangzhouUniversityByLiQiuyanEnvironmentalEngineeringDissertationSupervisor：Prof.ZhangWenyiJune，2012常州大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。除文中已
2、經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在論文中以明確方式標(biāo)明。本人已完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。作者簽名：簽字日期：年月日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)的說明本學(xué)位論文作者完全了解常州大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬常州大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學(xué)?？梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編本學(xué)位論文。保密論文注釋：本學(xué)位論文屬于保密范圍，在年解密后適用本授
3、權(quán)書。非保密論文注釋：本學(xué)位論文不屬于保密范圍，適用本授權(quán)書。學(xué)位論文作者簽名：簽字日期：年月日導(dǎo)師簽名：簽字日期：年月日中文摘要隨著工農(nóng)業(yè)的快速發(fā)展，水體富營養(yǎng)化程度逐年加劇，藍(lán)藻水華污染已成為全球性問題。某些藻類在一定環(huán)境下釋放微囊藻毒素（MC），人們飲用或直接接觸微囊藻毒素污染的水源，會嚴(yán)重危害人類健康。而常用的物理、化學(xué)法難以將其有效地去除，目前微生物法在處理藍(lán)藻水華污染方面逐漸表現(xiàn)出一定的優(yōu)越性。因此，利用溶藻細(xì)菌和MC降解菌聯(lián)合處理藍(lán)藻，在溶藻細(xì)菌控藻的同時，MC降解菌去除MC是一個新的研究方向。鑒于某些特殊菌種在溶藻、降解MC方面具有高效性，本研究分別以藍(lán)藻脫水壓濾液
4、、太湖流域食藻性白鰱魚腸組織液、黃化銅綠微囊藻液為菌種分離源，篩選得到3株微囊藻毒素-LR（MC-LR）降解菌和13株溶藻細(xì)菌，分別命名為R1-R3、F1-F12、TL，并通過形態(tài)學(xué)觀察、生理生化試驗、16SrDNA序列分析技術(shù)及同源性分析對降解效果較好的R3、F8、TL進(jìn)行菌種鑒定，以深入揭示其作用機(jī)理，為構(gòu)建工程菌提供理論依據(jù)，同時利用本實驗室已分離的MC-LR高效降解菌T1進(jìn)行原生質(zhì)體制備條件優(yōu)化，主要研究結(jié)果如下：（1）從藍(lán)藻脫水壓濾液分離的MC-LR降解菌R3對MC-LR具有較高去除率，經(jīng)鑒定為Lysinibacillusfusiformis，于美國國立生物技術(shù)信息中心（
5、NCBI）GenBank注冊序列號JQ991002，中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏號CGMCCNO.6107。研究生態(tài)因子對MC-LR降解效果的影響，得出其在30℃、130r/min轉(zhuǎn)速條件下最適宜參數(shù)為：pH值7.0，接種量4-6%，初始MC-LR濃度為49.07μg/L；在此運(yùn)行條件下，第7d時MC-LR的去除率可達(dá)到46.47%；外加碳源甲醇、乙醇、葡萄糖均能不同程度的促進(jìn)MC-LR的降解作用，該菌對MC-LR的利用具有專一性；在初始MC-LR濃度均為39.26μg/L，pH為7，接種5%對數(shù)期菌液，搖床溫度30℃，轉(zhuǎn)速130r/min條件下，以MC-LR為唯
6、一碳源的對照組和添加以上3種外加碳源的試驗組，MC-LR的去除率分別達(dá)到28.66%、30.26%、36.90%、59.26%。（2）以太湖流域素有藍(lán)藻天敵之稱的白鰱魚為分離源，從其富含藍(lán)藻的腸道組織液中分離得到的菌株F8具有較高溶解銅綠微囊藻能力，經(jīng)鑒定為Lysinibacillusfusiformis，GenBank注冊序列號JQ991003，保藏號CGMCCNO.6106。研究生態(tài)因子對其溶藻特性的影響，得出在溫度28℃、3光照強(qiáng)度2500lux、pH值為7、初始葉綠素a（Chla）含量為61.2mg/m6的條件下最適宜菌液濃度≥2.75×10/mL（菌藻比≥1：10），光周
7、期影響不顯著。通過對對數(shù)期菌液作不同處理，得出F8菌株的作用方式屬于間接溶藻，即通過分泌產(chǎn)生的胞外非蛋白質(zhì)物質(zhì)和少量蛋白質(zhì)物質(zhì)殺死銅綠微囊藻細(xì)胞，從而達(dá)到控藻的目的。（3）鑒于實驗室條件下培養(yǎng)銅綠微囊藻過程中其中2個藻液發(fā)生黃化且藻體全部死亡下沉，培養(yǎng)液中并無其他添加物，排除了外源性物質(zhì)對藻液黃化的干擾，因此，推斷藻液的黃化可能與細(xì)菌感染有關(guān)。以其為分離源，得到1株對銅綠微囊藻具有較高溶藻性能的細(xì)菌，命名為TL，經(jīng)初步鑒定為Lysinibacillusfusiform
