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1、一株馬拉硫磷高效降解菌的篩選及其特性研究TheStudyofaEfficientMalathion-DegradingBacteriumonScreeningandCharacteristicResearch研究生：王思博指導(dǎo)教師：牛明芬教授學(xué)科專業(yè)：環(huán)境科學(xué)與工程二〇一五年十二月分類號(hào)：學(xué)校代碼：10153UDC：密級(jí)：公開(kāi)碩士學(xué)位論文一株馬拉硫磷高效降解菌的篩選及其特性研究作者姓名：王思博入學(xué)年份：2013年9月指導(dǎo)教師：牛明芬教授學(xué)科專業(yè)：環(huán)境科學(xué)與工程申請(qǐng)學(xué)位：工學(xué)碩士所在單位：市政與環(huán)境工程學(xué)院論文提
2、交日期：2015年12月論文答辯日期：2015年12月學(xué)位授予日期：2016年1月答辯委員會(huì)主席：潘俊答辯委員會(huì)組成：潘俊陳欣魏煒李軍徐厚生論文評(píng)閱人：徐麗魯彩艷聲明本人聲明，所呈交的學(xué)位論文是在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立完成的。論文中取得的研究成果除加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包括本人為獲得其他學(xué)位而使用過(guò)的材料。與我共同工作過(guò)的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。作者簽名：日期：2015年12月學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者和指導(dǎo)教師完全了解沈
3、陽(yáng)建筑大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定：即學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)沈陽(yáng)建筑大學(xué)（或其授權(quán)機(jī)構(gòu)）可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)提供檢索、瀏覽。（如作者和導(dǎo)師同意論文交流，請(qǐng)?jiān)谙路胶灻?；否則視為不同意。）作者和導(dǎo)師同意網(wǎng)上交流的時(shí)間為作者獲得學(xué)位后：不限□半年□一年□一年半□兩年□作者簽名：導(dǎo)師簽名：日期：2016年1月日期：2016年1月碩士研究生學(xué)位論文摘要I摘要目前，我國(guó)食物中有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留情況相當(dāng)普遍和嚴(yán)重，尤其是一些
4、高毒性有機(jī)磷農(nóng)藥在食品中的殘留污染已不容忽視，篩選高效的農(nóng)藥降解菌刻不容緩。為此，本研究以有機(jī)磷農(nóng)藥馬拉硫磷為研究對(duì)象，以遼寧沈陽(yáng)農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)國(guó)家野外研究站的潮棕壤作為供試土壤，通過(guò)逐級(jí)馴化的方式，從長(zhǎng)期施噴馬拉硫磷農(nóng)藥的土壤中分離出六株對(duì)馬拉硫磷具有良好降解能力的菌株，經(jīng)過(guò)復(fù)篩得到一株性能較好的降解菌M5，該菌對(duì)馬拉硫磷的降解率為52.0%。通過(guò)研究馬拉硫磷降解菌M5的生長(zhǎng)曲線特征，以及在不同pH、溫度、外加碳源和氮源以及馬拉硫磷濃度因素下的生長(zhǎng)特征，試驗(yàn)表明降解菌M5生長(zhǎng)的延遲期約為6h，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期約為6h
5、~18h，從第30h開(kāi)始進(jìn)入衰亡期。由試驗(yàn)可知最佳的馬拉硫磷降解時(shí)間為4d時(shí)達(dá)到最大降解率，6d后的降解率為52%；降解菌M5生長(zhǎng)的最適培養(yǎng)溫度為30℃，適宜降解菌M5生長(zhǎng)的pH值為7.0；當(dāng)馬拉硫磷濃度為100mg/L，最適合降解菌的生長(zhǎng)；在有葡萄糖做碳源的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)最旺盛。研究紫外燈照射時(shí)間、鹽酸氫胺溶液質(zhì)量分?jǐn)?shù)不同和土壤浸出液體積分?jǐn)?shù)的不同對(duì)降解菌致死率和降解率的影響，確定了最佳誘變條件后將三種方法復(fù)合誘變還原，即將培養(yǎng)基置于20W紫外燈30cm處位置照射20s后，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.6%的鹽酸氫胺120r/
6、min恒溫振30min，最后用體積分?jǐn)?shù)60%的土壤浸出液30℃恒溫培養(yǎng)48h。篩選出對(duì)農(nóng)藥馬拉硫磷具有良好降解作用的高效菌株，復(fù)合誘變還原之后的降解菌誘變M5’對(duì)農(nóng)藥的降解率有明顯的提高，比未經(jīng)誘變的降解菌高出了19.26%，降解3天后達(dá)到最大降解率69.26%。經(jīng)過(guò)對(duì)馬拉硫磷降解菌M5’的形態(tài)學(xué)特征、生理生化特征及分子生物學(xué)鑒定，確定了菌株M5’為施氏假單胞菌。對(duì)其使用進(jìn)行環(huán)境影響分析，根據(jù)國(guó)家對(duì)微生物安全劃分標(biāo)準(zhǔn)的相關(guān)規(guī)定，明確了施氏假單胞菌為對(duì)生物安全程度最高的第四類，使用安全。采用單因素考察方式進(jìn)行室內(nèi)
7、模擬試驗(yàn)，測(cè)定不同的pH、有機(jī)肥施肥量、菌劑添加量以及不同的土壤最大持水量對(duì)該菌降解能力的影響，試驗(yàn)結(jié)果表明土壤對(duì)馬拉硫磷降解率最高的最佳環(huán)境因素為pH值為7.0，有機(jī)肥施肥量為5g/kg，菌劑接種量為10ml/kg，土壤最大持水量為70%。關(guān)鍵詞：馬拉硫磷；施氏假單胞菌；降解率；誘變菌；環(huán)境因子；土壤環(huán)境II摘要碩士研究生學(xué)位論文碩士研究生學(xué)位論文AbstractIIIAbstractNowadays,organophosphoruspesticideresiduesinfoodarecommonandser
8、iouspollutioninChina,especiallypollutionofsomehighlytoxicresidualorganophosphoruspesticidesinfoodcannotbeignored.Inthisdissertation,takingorganophosphoruspesticidemalathionasamodelpollutant,isol
