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1、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2010級(jí)碩士學(xué)位論文上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文鋅指蛋白265在大鼠睪丸Sertoli細(xì)胞局部感染中的作用研究姓名：潘斌專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：李偉毅席曄斌201304251萬(wàn)方數(shù)據(jù)上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2010級(jí)碩士學(xué)位論文鋅指蛋白265在大鼠睪丸Sertoli細(xì)胞局部感染中的作用研究姓名：潘斌專業(yè)：免疫學(xué)指導(dǎo)教師：李偉毅席曄斌研究方向：免疫調(diào)節(jié)及生殖免疫申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士培養(yǎng)單位：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院基金資助項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（81070479）；上海市教委重點(diǎn)項(xiàng)目(09ZZ117)201304252萬(wàn)方數(shù)據(jù)上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2010級(jí)碩士學(xué)位論文T
2、heResearchoftheFunctionofZNF265inRatSertoliCellsDuringInfectionName:BinPanMajor:ImmunologyGuideteacthers:WeiyiLi,YebinXiResearchdirection:ImmunoregulatoryReproductiveimmunologyApplication:MasterdegreeInstitute:BasicMedicineFacultyFundedprojects:NationalNaturalScienceFoundationofChina
3、(81070479)ShanghaiEducationalCommittee(09ZZ117)201304253萬(wàn)方數(shù)據(jù)萬(wàn)方數(shù)據(jù)萬(wàn)方數(shù)據(jù)上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2010級(jí)碩士學(xué)位論文鋅指蛋白265在大鼠睪丸Sertoli細(xì)胞局部感染中的作用研究摘要Sertoli細(xì)胞(支持細(xì)胞)是睪丸主要的基質(zhì)細(xì)胞，參與血-睪屏障的組成，維持[1,2]調(diào)控睪丸局部的免疫豁免。鋅指蛋白265(Zincfingerprotein265,ZNF265)[3]是含兩個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)及具有絲氨酸/精氨酸富集區(qū)的鋅指蛋白，目前研究主要認(rèn)為[4,5]它具有RNA結(jié)合功能，和轉(zhuǎn)錄、前體mRNA剪切相關(guān)。我們
4、在前期的研究中發(fā)現(xiàn)，ZNF265在大鼠Sertoli細(xì)胞中特異性高表達(dá)，且表達(dá)量和感染密切相[6]關(guān)；而Sertoli細(xì)胞可以通過(guò)改變IL-1、IL-6及TGF-β等的表達(dá)，發(fā)揮免疫調(diào)[7,8]節(jié)作用，增強(qiáng)睪丸局部抗感染的免疫應(yīng)答。本論文通過(guò)慢病毒介導(dǎo)的RNAi技術(shù)，沉默Sertoli細(xì)胞中ZNF265的表達(dá)，觀察Sertoli細(xì)胞在溶脲脲原體(UreaplasmaUrealyticum，UU)感染后，對(duì)IL-1α、IL-6、MCP-1、Toll樣受體（TLR2、TLR6）、TGF-β、FasL表達(dá)變化及對(duì)NF-κB信號(hào)通路激活的影響；另外通過(guò)染色質(zhì)免疫共沉淀（
5、ChIP）技術(shù)進(jìn)一步從蛋白質(zhì)-DNA作用的角度探討ZNF265在Sertoli細(xì)胞中抗感染和免疫調(diào)節(jié)作用及可能的作用機(jī)制。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：慢病毒介導(dǎo)的RNAi技術(shù)有效的干擾了ZNF265在大鼠Sertoli細(xì)胞中的表達(dá)。在RNAi后，UU感染的早期，IL-1α、IL-6、MCP-1、TLR2和TLR6表達(dá)升高，NF-κB激活增加，TGF-β及FasL表達(dá)也升高；而在感染后期，IL-1α、IL-6、MCP-1、TLR2和TLR6表達(dá)下調(diào)，NF-κB激活減弱，TGF-β及FasL表達(dá)仍持續(xù)升高且達(dá)最高水平。另外通過(guò)ChIP分析發(fā)現(xiàn)，ZNF265蛋白與TGF-β及Fas
6、L的啟動(dòng)子區(qū)域結(jié)合，并且TGF-β及FasL在RNAi組的表達(dá)水平，較無(wú)RNAi組明顯升高。上述結(jié)果表明：ZNF265在Sertoli細(xì)胞中發(fā)揮了重要的抗感染功能，可能通過(guò)和TGF-β及FasL相互作用，在Sertoli細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)中共同發(fā)揮重要作用。關(guān)鍵詞：ZNF265,Sertoli細(xì)胞,RNAi,TGF-β,FasL,ChIP6萬(wàn)方數(shù)據(jù)上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院2010級(jí)碩士學(xué)位論文TheResearchoftheFunctionofZNF265inRatSertoliCellsDuringInfectionAbstractSertolicellisthemain
7、matrixcellintestis,consistingofblood-testisbarrier,[1,2]maintainingandregulatingtheimmuneprivilegeoftestis.ZNF265isa[3]newlyidentifiedarginine/serine-rich(SR)protein,studieshaveshownthatZNF265proteinsareco-immunoprecipitatedwithmRNAsandcolocalizewiththesplicefactors,SMN,U1-70K,U2AF35
8、andSC35,indi
