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1、湖南大學(xué)碩士學(xué)位論文1,4-二氯萘、2,6-二氯萘的微生物降解實(shí)驗(yàn)研究姓名:吳小莉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):市政工程指導(dǎo)教師:余健20080602l,4.二氯萘,2,6.二氯萘微生物降解實(shí)驗(yàn)研究摘要本文在綜述國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上,首次以搖瓶實(shí)驗(yàn)的形式對(duì)l,4.二氯萘和2,6一二氯萘的微生物降解進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。實(shí)驗(yàn)以垃圾滲濾液處理池的活性污泥為菌源,篩選出了一株細(xì)菌HY,16SrRNA同源性分析該菌為假單胞菌屬(Pseudomonassp)。在25℃、180r/min、pH=7、OD600=0.25、初始濃度10mg/L、20、50mg/L條件下,10、20mg/L濃
2、度的1,4.二氯萘在2天和5天內(nèi)可完全降解,但初始濃度為50mg/Ll,4.二氯萘的生物降解在80h后幾乎停滯,降解率只有40%;且實(shí)驗(yàn)過程中光密度均逐漸下降,細(xì)菌無(wú)生長(zhǎng)現(xiàn)象。而投加萘(50mg/L)時(shí),50mg/L的1,4.二氯萘可在300h完全降解,但是在降解的兩i.f8h存在萘的競(jìng)爭(zhēng)抑制作用。進(jìn)行了以肉湯培養(yǎng)基富集菌液對(duì)1,4.二氯萘的降解對(duì)比實(shí)驗(yàn),確定1,4.二氯萘不支持微生物生長(zhǎng),HY菌對(duì)1,4.二氯萘的降解屬共代謝范疇,HY菌對(duì)1,4.二氯萘的降解是以萘的誘導(dǎo)為前提的。HY菌不能共代謝2,6.二氯萘,靜息細(xì)胞實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了該菌不能產(chǎn)生降解2,6.二氯萘的
3、酶系。結(jié)合l,4.二氯萘、1.氯萘、2.氯萘的生物降解的實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析,認(rèn)為位于不同苯環(huán)上的氯取代不利于微生物降解。對(duì)不存在初級(jí)基質(zhì)條件下,1,4.二氯萘的降解實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行了動(dòng)力學(xué)研究,10、20mg/L的生物降解符合一級(jí)反應(yīng)動(dòng)力學(xué),一級(jí)反應(yīng)速率常數(shù)分別為O.0626、O.0265一,半衰期分別為15.97h、37.74h,50mg/L的生物降解介于零級(jí)反應(yīng)和一級(jí)反應(yīng)之間:采用不存在初級(jí)基質(zhì)條件下的三種共代謝模型對(duì)l,4.二氯萘的微生物降解進(jìn)行非線性擬合,結(jié)果顯示模型3對(duì)三種濃度下l,4.二氯萘的生物降解擬合較好,其對(duì)應(yīng)的表觀生物量轉(zhuǎn)化濃度砰分別為0.1932、0。
4、2869、0.2789。利用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC.MS)對(duì)1,4.二氯萘降解的中間產(chǎn)物進(jìn)行了定性分析,檢測(cè)到了二氯代水楊酸、環(huán)氧化氯萘、二氯代水楊醛,二氯代萘酚,硅烷衍生化樣品的GC—MS分析顯示,產(chǎn)物中可能還還存在二羥基二氯代萘,并據(jù)此推測(cè)l,4-二氯萘生物降解的途徑為5,6位或7,8位加單氧后羥基化,苯環(huán)開裂后再生成氯代水楊酸。關(guān)鍵詞:1,4一二氯萘;2。6一二氯萘;微生物降解;假單胞菌屬;共代謝動(dòng)力學(xué);降解途徑碩十學(xué)位論文AbstractOnthebasisofsummarizingtherelatedreferenceshomeandabroad.a(chǎn)s
5、eriesofshakeflaskexperimentshadbeenconductedtostudythebiodegradationofl,4-dichloronaphthalene(1,4-DCN)and2,6.dichloronaphthalene(2.6.DCN).WeisolatedastrainnamedHYfromtheactivedsludgeatalandfillleachatetreatmentplant,thestrainhadbeenidentifiedasPseudomonassp.bytheanalysisof16SrRNA.unde
6、rtheconditionof25℃、180r/min、pH=7、OD600=0.25、initialconcentration10、20、50mg/L,Thestrainwereabletobiodegraded10mg/L1,4.DCNin48hand20mg/L1,4-DCNin120h,butthebiodegradationwhichintialconcentrationwas50mg/Lalmostceasedafter80h,anddegradationratewasonly40%:intheseexperimentsphotodensityOD60
7、0alldecreasedgradually,butwhennaphthaleneexisted,50mg/L1,4·DCNcouldbetotallydegradedin300h.howeverthereWasaacclimatizationphaseof8hbecauseofcompetitioninhibitionefIfectfromnaphthalene.bycomparingwithdegradationexperimentbystrainwhichgrownonbrothmedium,weconcludedthatHYstrainshouldcome
8、tabol