利用開孔明膠固定化啤酒酵母生產(chǎn)atp的研究

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1、廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文利用開孔明膠固定化啤酒酵母生產(chǎn)ATP的研究姓名：謝小瑜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：化學(xué)工藝指導(dǎo)教師：雷愛祖;童張法20060501廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文利用開孔明膠同定化啤酒酵母生產(chǎn)A'rP的研究利用開孔明膠固定化啤酒酵母生產(chǎn)ATP的研究摘要利用固定化酵母催化一磷酸腺苷(AMP)磷酸化生成三磷酸腺苷(ATP)是最有工業(yè)前景的ATP生產(chǎn)方法之一。該法的中心內(nèi)容包括：穩(wěn)定的細(xì)胞質(zhì)量、適宜的固定化形式、適宜的反應(yīng)操作條件等。本文對(duì)酵母的培養(yǎng)條件、開孔明膠固定化細(xì)胞的制備條件以及ATP生產(chǎn)的反應(yīng)條件進(jìn)行了較深入的探討和試驗(yàn)研究。此外還建立了ATP分離與提純的實(shí)驗(yàn)方法，并

2、通過實(shí)驗(yàn)考察了發(fā)酵液的ATP回收率、成品ATP的純度以及ATP的實(shí)際產(chǎn)率。首先選用了一株轉(zhuǎn)化率較好但穩(wěn)定性差的酵母菌株，對(duì)擴(kuò)培培養(yǎng)基中的蔗糖蜜、蛋白胨、呷4)2S04、KH2P04四種因素不同濃度水平進(jìn)行正交實(shí)驗(yàn)，研究其對(duì)培養(yǎng)酵母菌濃及ATP轉(zhuǎn)化活性的影響，確定了用于ATP生產(chǎn)的酵母細(xì)胞培養(yǎng)工藝的較佳配方，其結(jié)果為：m(蔗糖蜜產(chǎn)12％，歷(蛋白胨戶O．70％，m(KH2P04戶O．15％，m((NH4hS04)=O．25％。實(shí)驗(yàn)還確定了該啤酒酵母適宜的擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)間是14-20dx時(shí)。研究了開孔明膠固定化啤酒酵母細(xì)胞的制備條件，結(jié)果表明15％的明膠和2％的海藻酸鈉形成的復(fù)配膠包

3、埋10％的啤酒酵母細(xì)胞制備成的固定化顆粒經(jīng)2％戊二醛交聯(lián)ltJs時(shí)具有較高的磷酸化活性。利用該固定化顆粒研究了酵母酶系生產(chǎn)ATP的反應(yīng)機(jī)理，考察了多種因素對(duì)ATP轉(zhuǎn)化情況的影響，結(jié)果表明用開孔明膠包埋啤酒酵母制成的固定化細(xì)胞，在含有159／LAMP，葡萄糖150mmol／L，硫酸鎂16mmol／L，pn7．0的磷酸緩沖液250mmol／L中35℃振蕩反應(yīng)2小時(shí)，ATP轉(zhuǎn)化率可高達(dá)95％廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文利用開孔明膠周定化啤酒酵母生產(chǎn)A1．P的研究以上。底物溶液滅菌和添加煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)后，該固定化酵母細(xì)胞可反復(fù)使用10次，ATP的轉(zhuǎn)化率穩(wěn)定維持在90％以上。

4、通過ATP分離與提純的實(shí)驗(yàn)，得出發(fā)酵液的ATP平均回收率為72．3％，平均成品純度為92．3％，平均產(chǎn)品實(shí)物產(chǎn)率為102．3％。關(guān)鍵詞：5。．三磷酸腺苷固定化啤酒酵母細(xì)胞開孔明膠，。II廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文利用開孔明膠固定化啤酒酵母生產(chǎn)ATP的研究ATPPRODUCTIoNBYBEERYEASTCELLSIMMOBILIZEDINoPENPoREGELATINMATRIXABSTRACTUsingimmobilizedyeastcellstoyieldadenosinetripHospHate(ATP)fromadenosinemonopHospHate(AMP)isoneo

5、fthemostinterestingtechniquesinATPindustry．ThekeytechniquesintheATPproductionarethesteadyofthecellquality,theappropriatemethodofimmobilizationandoperationalconditions．Inthedissertation,thecultivationofyeast，thepreparationofimmobilizedcellsinopenporegelatinbatrixandtheoperationalconditionsof

6、ATPfermentationwereinvestigated．Besides，theseparationandpurificationtechniqueofATPproductionwasbuilt，theATPrecovery，thepurityofATPproductandvirtualproductivitywerealsodiscussedwiththeexperiment．Firstofall，astrainofbeeryeastwhichhashighconversionratebutlowstabilitywasselected．Accordingtoorth

7、ogonalexperimentaldesign，theeffectsoffourfactors(contentsofcanesugarhoney，peptone，(NH4)2S04andKH2P04)atthreelevels011thecellsconcentrationandtheATPconversionactivitywereinvestigatedandthentheoptimalratioofcomponentsintheexpandingculturemediumweredetermin