荷花nnγgcs基因克隆、表達及功能驗證

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1、＼＇．‘．？■，分類號阻．？學＾２０１２１０４１１５為請農(nóng)違義餐碩壬學位論文荷花Ｍ２ｒＧＣＳ基因克隆、表達及功能驗證張阿慧．Ｉ＊ｖ；＞．春－＇■■■一＾；．＇‘？ｒ？：‘－；／／．；，＇Ｙ、一：‘—．’＾－■．■＇．二Ｗ＾熱，１．：－‘式；ｆ指導教師劉兆磊副教授＇專業(yè)名稱園林植物與觀賞園藝／爹＇古研究方向觀賞植物分子生物學答辯日期二〇—五年五月ＴＨＥＣＬＯＩＮＱＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮＡＮＤＦＵＮ

2、ＣＴＩＯＮＡＬＩＤＥＮＴＩＦＩＣＡＴＩＯＮＯＦＮｎＧＣＳＦＲＯＭＮＥＬＵＭＢＯｙＮＵＣＩＦＥＲＡＢｙＺｈａｎＡｈｕｉｇＳｕｐｅｒｖｉｓｅｄｂｙＡｓｓｏｃｉａｔｅＰｒｏｆ．ＬｉｕＺｈａｏｌｅｉＴｈｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙ虹ＰａｒｔｉａｌＦｕ腳Ｉｍ畑ｔｏｆ化ｅＲｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓＦｏｒＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅｇ化ＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅＳｃｉｅｎｃｅｓｇＣｏｍｌｅｔｅｄｉｎＭａ２０１５ｐｙ，原創(chuàng)性聲

3、明本人鄭重聲明：所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進巧研巧工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中Ｊ。＾＾ｌ明確方式標明本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔。學位論文作者（需親筆）簽名：（ｆ氣Ｗ５＾＾月到ｆ年１日學位論文版權(quán)使用授權(quán)書、本學位論文作者完全了解學校有關保留使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留并向國家有關部口或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被査閱和借閱。本人授權(quán)南京農(nóng)業(yè)大學可Ｗ將本學位論文的全部或部分

4、內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可采用影印、縮印或掃描等復制手段保存和匯編學位論文。＂保密□。。，在年解密后適用本授權(quán)書本學位論文屬于不保密掃上方框＂＂（請在內(nèi)打Ｖ）１學位論文作者（需親筆）簽名：部巧義。／支年＾月日７／導師（需親筆）簽名：乙月曰ｌｌ義么＾／Ｉ目錄目錄摘要１ＡＢＳＴＲＡＣＴｍ縮咯詞Ｖ弓Ｉ言ｖｎ第一章文１１重金屬及其危害１２水體重金屬污染現(xiàn)狀２３重金屬修復方法２３．１物理化學修復方法２３．２農(nóng)業(yè)生態(tài)修復技術(shù)３３．３生物修ｇ技術(shù)４４植

5、物的重金屬抗性機制．６４．１莖合作Ｓ６４．２區(qū)室化作用７４．３細胞修復７５基因工程在植物修復中應用７６植物修復應用前景９第二章荷花ＷｉｙＧＣＳ基因克隆及序列分析１１１材料騎法１２１．１植物材料１２１．２試劑與儀器１２１．２．１試劑１２１．２．２儀器設備１２１．２．３菌株境體１２１．２．４引物序列１３１．３３實驗方法１１．３．１基因簡并引物設計１３１．３．２ＲＮＡ１４提?。墸睿洌保常常墸桑螅簦螅簦颍幔牐悖模危良皺z測１４合成１．３．４ＰＣＲ１５擴増

6、荷花ＷｗｙＧＣｙ基因克隆、表達巧功能驗證１．３．５片段純化與連接轉(zhuǎn)化１５１．３．６重組子篩選及測序１５’－１．３．７３ＲＡＣＥＰＣＲ１６擴増’１．３．８５ＲＡＣＥ１６１．３．９ｃＤＮＡ全長序列的獲得１７１．３．１０序列比對與進化樹構(gòu)建１８２結(jié)果與分析１８２．１ＲＮＡ提取質(zhì)量與反轉(zhuǎn)錄效果檢測１８２．２目的中間片段序列測定１９－２．３ＲＡＣＥＰＣＲ結(jié)果巧２．４荷花ＪＶｈｙＧＣＳ基因全長序列的獲得１９２．５氨基酸序列同源性比對２０２．６荷花ｉＶｗＧＣＳ基因氨基酸序列系統(tǒng)進化樹構(gòu)建２２

7、３觀２３第蘭章ｉＶｎｙＧＣＳ基因表達寫亞細胞定位…２５一杞ＣＳ第節(jié)領脅迫后Ｗ巧在荷花中表達分析２５１機與方法２５１．１植物材料２５１．２試劑城器２６１：．２．１試劑２６１．２．２實驗儀器２６１．３實驗方＾＆２６１．３．１荷花ＲＮＡ提取及ｃＤＮＡ合成說１２Ｒｅａｌ－．３．ＴｉｍｅＰＣＲ分析２６１．３．３荷花各器官領含量的測定：２７２結(jié)果與分析２７２．１荷花基因組織定量分祈２７２．２