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《hjb-1對lps誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞活化及小鼠急性肺損傷的抗炎保護(hù)機(jī)制研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、HJB-1對LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞活化及小鼠急性肺損傷的抗炎保護(hù)機(jī)制研究InvestigationoftheprotectiveeffctofHJB-1onLPSinducedmacrophagesactivationandacutelunginjuryofmice作者姓名：潘壘昌專業(yè)名稱：預(yù)防獸醫(yī)指導(dǎo)教師：孫萬春副教授學(xué)位類別：農(nóng)學(xué)碩士論文答辯日期：2015年6月2日中文摘要HJB-1對LPS誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞活化及小鼠急性肺損傷的抗炎保護(hù)機(jī)制研究炎癥是機(jī)體抵抗有害刺激而作出的保護(hù)性應(yīng)答和修復(fù)損傷組織的過程。適當(dāng)?shù)难装Y應(yīng)答對于機(jī)體抵御病原微生物的入侵和修復(fù)損傷是
2、有利的，但是當(dāng)炎癥應(yīng)答過于強(qiáng)烈時(shí)則會導(dǎo)致組織損傷和疾病。巨噬細(xì)胞釋放促炎或具有細(xì)胞毒性的細(xì)胞因子、生物活性脂類、生長因子、水解酶等來調(diào)節(jié)細(xì)胞做出相關(guān)應(yīng)答。脂多糖（LPS）是革蘭氏陰性菌外壁的重要的組成部分，在與細(xì)胞表面的CD-14分子和Toll樣受體4以及MD-2等分子相互作用下，活化單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞。進(jìn)而導(dǎo)致第二信使和相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路啟動。其中包括NF-κB信號通路和絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）信號通路。狼毒，在中醫(yī)中被用于治療癌癥、水腫、腹水病已有相當(dāng)長的歷史。植物化學(xué)的研究已經(jīng)證明，狼毒包含二萜類化合物、三萜類化合物等。其中包括三種二萜類化合物JA
3、、JB和17-OH-JB（HJB）。近期研究顯示，JA、JB和HJB具有良好的抗腫瘤活性，對多種腫瘤細(xì)胞系都有良好的抗腫瘤活性，比如惡性間葉腫瘤180（Sarcoma180）、小鼠艾麗西腹水癌（Ehrlichascitescarcinomainmice）。一些體外研究進(jìn)一步的顯示JB和HJB誘導(dǎo)人類白細(xì)胞系HL-60（Humanpromyelocyticleukemiacellline）、K562（Humanbreastcarcinomacellline）、MCF-7（MichiganCancerFoundation-7）凋亡。Uto等人發(fā)現(xiàn)JB、HJB及H
4、JA具有一定抗炎作用，HJB抗炎活性較另外兩者強(qiáng)，通過化學(xué)結(jié)構(gòu)差異分析，發(fā)現(xiàn)JB類化合物中17位碳原子的羥基基團(tuán)能顯著增強(qiáng)抗炎作用，說明對化合物進(jìn)行化學(xué)修飾有可以增強(qiáng)其抗炎作用。本研究旨在探究HJB的衍生物HJB-1在LPS刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞和LPS誘發(fā)的ALI的抗炎作用。在本研究中，通過化學(xué)修飾HJB17位碳原子中的羥基得到HJB的兩個衍生物HJB-1和HJB-2。在LPS誘導(dǎo)的小鼠腹腔巨噬細(xì)胞炎癥模型中，HJB-1能更有效的抑制LPS誘導(dǎo)的TNF-α的釋放。同樣HJB-1能以濃度依賴的方式減少LPSI誘導(dǎo)的TNF-α、IL-1β、IL-6、COX-2及
5、iNOS的mRNA表達(dá)，但不改變具有抗炎作用的IL-10的mRNA的水平。此外還能抑制LPS誘導(dǎo)的NF-κB和MAPK激酶的活化。急性肺損傷（ALI）是一種具有很高致死率的烈性炎癥性肺部疾病。ALI的典型特征為肺組織強(qiáng)烈的炎癥應(yīng)答，包括彌漫性肺泡損傷、上皮屏障破壞、肺泡壁組織損傷、肺水腫以及中性粒細(xì)胞浸潤，進(jìn)而導(dǎo)致大量促炎細(xì)胞因子的釋放，包括腫瘤壞死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）。目前對ALI的治療策略主要是包括防護(hù)肺部換氣和保守療法。盡管針對ALI的發(fā)病機(jī)制及治療手段已經(jīng)進(jìn)行了大量研究，但ALI的死亡率仍居高不下。因此
6、迫切需要探索創(chuàng)新療法和有效藥物。用LPS鼻腔滴注的方法建立雄性C57BL小鼠ALI模型。在滴注LPS前1小時(shí)給予劑量為10mg/kg和2mg/kg體重的HJB-1，之后采集肺泡灌洗液和肺組織樣本。HJB-1預(yù)處理組肺濕干重比下降，顯示HJB-1能減輕LPS誘發(fā)的肺水腫。同時(shí)HJB-1顯著減少ALI小鼠肺泡灌洗液中的白細(xì)胞總量和總蛋白量，并且HJB-1還明顯抑制LPS引起的ALI小鼠肺組織樣本髓過氧化物酶（MPO）活性增加。HJB-1能抑制LPS誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞等天然免疫細(xì)胞分泌大量細(xì)胞因子，包括TNF-α、IL-1β和IL-6。肺組織切片結(jié)果顯示，HJB-1抑制
7、LPS誘導(dǎo)的肺泡壁變薄、肺出血和白細(xì)胞浸潤。此外，肺組織研磨液的Westernblot結(jié)果顯示HJB-1能有效地阻斷肺組織中由LPS誘導(dǎo)的MAPKs和NF-κB信號通路的活化。以上結(jié)果表明HJB-1能通過抑制NF-κB活化和MAPK的磷酸化起到抗炎效果，同時(shí)提示修改HJB的17碳原子上的羥基可以增強(qiáng)HJB系列化合物的抗炎作用。此外HJB-1能抑制LPS誘導(dǎo)的小鼠ALI中的MAPK和NF-κB信號通路，從而減少組織損傷和控制炎癥發(fā)展，有望從傳統(tǒng)中草藥中開發(fā)一種新的治療ALI的藥物。關(guān)鍵詞：HJB-1、LPS、巨噬細(xì)胞、細(xì)胞因子、信號通路、炎癥、急性肺損傷IIA
8、bstractInvestigationofthep
