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《知母皂苷BⅡ對于PC12細胞氧化應激損傷保護作用的代謝組學研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、學校代碼：10259學號：136061444密級：公開上海應用技術大學碩士學位論文題目：知母皂苷BII對于PC12細胞氧化應激損傷保護作用的代謝組學研究英文題目：MetabonomicStudyofTimosaponinBIIonTherapeuticalEffectsofOxidativeStressdamageinPC12cells專業(yè)：制藥工程學院：化學與環(huán)境工程學院研究方向：中藥代謝組學姓名：謝沁媚指導教師：洪戰(zhàn)英教授第二軍醫(yī)大學藥學院董昕講師第二軍醫(yī)大學藥學院二〇一六年五月二十七日知母皂苷BII對于PC12細胞氧化應激損傷保護作用的代謝組學研究摘要知母皂苷是常用中藥知
2、母的主要活性成分，其中知母皂苷BII(TimosaponinBII,TB-II)在知母皂苷中含量較高，具有抗抑郁，抗炎，改善認知功能和學習記憶能力作用，但其對于抑制氧化應激導致的PC12細胞損傷效果與機制目前尚不明確，為此，本文分別從分子生物學與代謝組學兩個策略進行研究。本文中，我們通過體外細胞實驗發(fā)現(xiàn)知母皂苷BII對H2O2誘導的PC12細胞的氧化應激損傷具有較為明顯的保護作用。生物學評估的結果表明，知母皂苷BII具有較強的抗氧化活性，經(jīng)過知母皂苷BII預處理過的細胞在H2O2損傷后細胞活力顯著增加，乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase,LDH)的釋放減少，細
3、胞的形態(tài)結構變化減少，同時，知母皂苷BII能夠抑制H2O2誘導的細胞凋亡，降低細胞內活性氧（reactiveoxygenspecies,ROS）的積累。為了進一步闡釋知母皂苷BII對PC12細胞氧化應激損傷的保護作用機制，我們使用UHPLC-Q/TOFMS方法，對其進行代謝組學輪廓分析，從對照組與模型組的細胞樣本中我們篩選出35種差異代謝物，在經(jīng)過H2O2氧化應激刺激后，模型組中有10種代謝物顯著下調，25種代謝物顯著上調。其中，甘油磷酸膽堿，6-羥基多巴胺，酪氨酸，皮質醇等在氧化應激損傷后顯著上調，在知母皂苷BII干預后，這些物質均有顯著回調。L-谷氨酸，谷胱甘肽，琥珀酸等在
4、經(jīng)過H2O2刺激后，顯著下降，在知母皂苷BII干預后顯著回調。本課題驗證闡釋了知母皂苷BII對于H2O2誘導的PC12細胞氧化應激損傷的保護作用，為由氧化應激引起的神經(jīng)退行性疾病的治療策略提供了新的思路。關鍵詞：UHPLC-Q/TOF-MS；代謝組學；知母皂苷BII；氧化應激損傷；PC12細胞MetabonomicStudyofTimosaponinBIIonTherapeuticalEffectsofOxi-dativeStressdamageinPC12cellsAbstractTimosaponinsarethemainactiveingredientofRhizomaA
5、nemarrhenacommonlyusedtraditionalChinesemedicine.AccordingtotherelevantChinesemedicinerecords,Ti-mosaponinB-IIhasbeenreportedtoinhibitplateletaggregation,scavengefreeradicals,reducebloodlipid,anti-tumorandimprovecognitivefunctionandtheabilityoflearningandmemoryfunction.Inthepresentstudy,Timo
6、saponinB-IIwasfoundthatitcanprotectagainsthydrogenperoxidecytotoxicityinvitro.Furthermore,thepossiblemechanismwasinvestigated,whichofactioninvolvedintheneuroprotectiveeffectofTB-IIagainstperoxide-inducedinjuryinPC12cells.TheresultsshowedthatTimosaponinB-IIpossessedpotentantioxidantactivity,s
7、othatpre-treatmentwithTB-IIpriortoH2O2exposuresignificantlyincreasedcellviabilityandre-ducedthereleaseofLDH.Moreover,TimosaponinBIIreducedintracellularaccumulationofROSandinhibitedapoptosis.Wethenemployedametabonomicmethodbasedonultraper-formanceli
