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《高通量ssr標(biāo)記技術(shù)在小麥品種檢測(cè)中的應(yīng)用研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、AGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI全日制碩士專業(yè)學(xué)位（畢業(yè)）論文高通量SSR標(biāo)記技術(shù)在小麥品種檢測(cè)中的應(yīng)用研究學(xué)位申請(qǐng)人：李宏博指導(dǎo)教師：陳景堂教授趙昌平研究員學(xué)位名稱：農(nóng)業(yè)推廣碩士研究領(lǐng)域：作物授予單位：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期：二〇一五年五月三十日獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得^或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明病的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者
2、簽名：簽字日期：城年〈月3日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解河北農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)河北農(nóng)業(yè)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書）學(xué)位論文作者簽名:靱4導(dǎo)師簽名:簽字日期：年<月J簽字曰期：年<月j曰0學(xué)位論文作者畢業(yè)后去向：工作單位：電話:itilU也址：郵編:分類號(hào)：S512.1單位代碼：10086密級(jí)：公開學(xué)號(hào)：20139100604高通量SSR標(biāo)記技術(shù)在小麥品種檢
3、測(cè)中的應(yīng)用研究ApplicatedResearchoftheHigh-throughputSSRMarkersinDetectionofWheatVarieties學(xué)位申請(qǐng)人：李宏博指導(dǎo)教師：陳景堂教授趙昌平研究員學(xué)位名稱：農(nóng)業(yè)推廣碩士研究領(lǐng)域：作物授予單位：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期：二〇一五年五月三十日摘要本研究通過對(duì)PCR熱循環(huán)條件、特征峰值識(shí)別、等位變異賦值以及多重電泳體系構(gòu)建等進(jìn)行探索，以檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定、快速為原則，建立基于SSR熒光標(biāo)記的小麥品種高通量檢測(cè)技術(shù)，并應(yīng)用于2014年區(qū)域試驗(yàn)品種的特異性、一致性、穩(wěn)定性和真實(shí)性鑒定，以及2009-2013年河北省區(qū)域試驗(yàn)品種的DNA指
4、紋圖譜構(gòu)建和遺傳差異分析。研究結(jié)果如下：1、對(duì)PCR反應(yīng)的熱循環(huán)參數(shù)進(jìn)行摸索，減少了PCR產(chǎn)物非特異性擴(kuò)增。分析毛細(xì)管電泳峰形的特征，對(duì)特征峰值和非特征峰值進(jìn)行識(shí)別，確保讀取數(shù)據(jù)的一致性和準(zhǔn)確性。利用參照樣品，將42對(duì)標(biāo)記各個(gè)等位變異的參照品種進(jìn)行賦值，同時(shí)確定了每對(duì)SSR熒光標(biāo)記的具體峰值片段范圍，為多重電泳構(gòu)建立奠定基礎(chǔ)。2、將不同熒光標(biāo)記或峰值片段范圍不同的相同熒光標(biāo)記進(jìn)行分組，根據(jù)品種鑒定需要，構(gòu)建6-8重電泳組合，同時(shí)對(duì)不同熒光的PCR產(chǎn)物的混合比例及電泳體系體系進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，毛細(xì)管電泳方法的檢測(cè)效率、準(zhǔn)確性、靈敏度均高于垂直板凝膠電泳方法，并將兩種電泳方法的檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行有
5、效轉(zhuǎn)換和分析，確保前期小麥DNA指紋數(shù)據(jù)庫的持續(xù)應(yīng)用。3、構(gòu)建了179個(gè)參試品種的DNA指紋圖譜，對(duì)不同組別品種進(jìn)行遺傳多樣性分析表明，北部麥區(qū)遺傳多樣性最豐富，黃淮南片和河南省區(qū)域試驗(yàn)品種最低。其中16個(gè)品種一致性較差，4個(gè)品種不具備真實(shí)性。4、采用42個(gè)SSR標(biāo)記構(gòu)建2009-2013年70份河北省區(qū)域試驗(yàn)小麥品種的DNA指紋圖譜，并進(jìn)行遺傳差異分析。結(jié)果表明，42個(gè)SSR引物在70份品種中共檢測(cè)到303個(gè)等位變異，平均等位變異7.21個(gè)，平均PIC值0.69；平均基因多樣性0.73，品種間的遺傳相似系數(shù)變化范圍為0.05~1.00，平均0.28；表明河北參試品種間存在較大的遺傳差異。
6、聚類分析把70份小麥品種可劃分為4大類、6個(gè)亞類，表明同一育種單位或地區(qū)的品種遺傳背景相近。關(guān)鍵詞：小麥；SSR熒光標(biāo)記；高通量；DNA指紋圖譜，品種檢測(cè)；遺傳多樣性ApplicatedResearchoftheHigh-throughputSSRMarkersinDetectionofWheatVarietiesGraduate:HongboLiMajor:CropSupervisor:Prof:JingtangChenProf:ChangpingZhaoAbstractInthisstudy,wefocusontheexplorationwhichincludesthePCRtherm
7、alcyclingconditions,characteristicpeakrecognition,assignmentofallelicvariation,theconstructionofmultipleelectrophoresissystemandsoon.Weestablishedthehigh-throughputdetectiontechnologyofwheatvarietiesfollowingthep
