基于ssr標(biāo)記技術(shù)的越橘親緣關(guān)系分析及品種鑒定

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1、碩士學(xué)位論文基于SSR標(biāo)記技術(shù)的越橘親緣關(guān)系分析及品種鑒定GeneticrelationshipanalysisandcultivaridentificationofblueberrybasedonSSRmarkers學(xué)號(hào)：21018016完成日期：星Q!壘生墨旦大連理工夫?qū)WDalianUniversityofTechnologylIRIIlllIlllIllUlltIIIIlY2590307大連理工大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明作者鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。盡我所知，除文中已經(jīng)注明引用內(nèi)容和致謝的地方

2、外，本論文不包含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，也不包含其他已申請(qǐng)學(xué)位或其他用途使用過的成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說明并表示了謝意。若有不實(shí)之處，本人愿意承擔(dān)相關(guān)法律責(zé)任。學(xué)位論文題目：基王苧墨旦疊運(yùn)堇本數(shù)越插塞綞差丕金塹丞昌盤鑒定作者簽名：一蘭壘t三2紅卜一日期：互2篳年—L月j1L日大連理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要本文建立了適用于越橘(Vacciniumspp．)品種鑒定及親緣關(guān)系分析的SSR-PCR技術(shù)體系，用SSR標(biāo)記技術(shù)對(duì)22種越橘栽培品種進(jìn)行了遺傳差異及親緣關(guān)系分析，建立了一套完善的越橘品種鑒定

3、體系，為越橘種質(zhì)資源的評(píng)價(jià)、鑒定、管理及越橘新品種的培育奠定了基礎(chǔ)。建立的SSR．PCR反應(yīng)程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性4min；94℃40s，55-64℃(根據(jù)引物而定)40s，72℃40s，35個(gè)循環(huán)；72。C延伸8min。優(yōu)化的SSR-PCR反應(yīng)體系為：20此體系，Taq酶1，5U，M92+2．Onmol／此，dNTP0．25nmol／IsL，上下游引物各0．25pmol／laL，DNA模板40rig。篩選出15對(duì)擴(kuò)增條帶清晰、多態(tài)性高、重復(fù)性好的引物。每對(duì)引物獲得多態(tài)性條帶3～13條，22個(gè)品種共獲得115條帶，其中113條為多態(tài)性條帶，多態(tài)

4、性比率為98．26％。22個(gè)品種的遺傳相似性系數(shù)居于0．486-4)．886之間，其中奴伊(Nui)和布魯瑞卡(Bluereka)遺傳相似性系數(shù)最大；澤西(Jersey)和美登(Blomidon)遺傳相似性系數(shù)最小。使用NTSYSpc(2．10e)根據(jù)非加權(quán)組平均法(UPGMA)繪制了22個(gè)越橘品種的遺傳關(guān)系聚類圖。聚類結(jié)果顯示，供試越橘品種被分為2個(gè)大類，美登(Blomidon)被單獨(dú)聚為一類，其余的21個(gè)品種被聚為一類，此21個(gè)品種又聚為2個(gè)亞類，其中晚熟品種迪克西(Dixi)和埃利奧特(Elliot)聚在一起，另外19個(gè)中早熟品種聚在一

5、起。說明SSR聚類結(jié)果與越橘品種遺傳關(guān)系及表型特征相符?？梢杂糜谥笇?dǎo)越橘雜交育種的親本選配。實(shí)驗(yàn)篩選出了可用于22個(gè)越橘品種鑒定的SSR核心引物NA961和NAl040，核心引物組合能夠完全區(qū)分22個(gè)越橘品種。用核心引物制作了參照分子量標(biāo)記，構(gòu)建了22個(gè)越橘品種的指紋圖譜，建立了一套完整的越橘品種鑒定體系。實(shí)踐驗(yàn)證SSR標(biāo)記用于藍(lán)莓品種鑒別的方法可行、結(jié)果可靠。關(guān)鍵詞：越橘；SSR；親緣關(guān)系分析；指紋圖譜；品種鑒定基于SSR標(biāo)記技術(shù)的越橘親緣關(guān)系分析及品種鑒定Geneticrelationshipanalysisandcultivariden

6、tificationofblueberrybasedonSSRmarkersAbstractInthisstudy，aSSR—PCRprotocolservingforblueberry(Vacciniumspp．)geneticrelationshipanalysisandcultivaridenfificationwasestablished．Geneticrelationshipof22blueberrycultivarsWasanalyzedusingSSR(SimpleSequenceRepeat)markers．Ablueberr

7、ycultivaridentificationprotocolwasestablished．T11iSapproachwouldbenefitforblueberrygermplasmevaluation,identificationandmanagementaswellasnovelvarietybreeding．nleestablishedSSR．PCRprotocolforblueberryWaSasfollows：initialdenaturationat94℃for4rain；(denaturationat94℃for40s，ann

8、ealingattheoptimumannealingtemperatureoftheprimerpairfor40s，elongationat72℃for40s)