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《hplc分析在中藥分析中應(yīng)用設(shè)計(jì)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、個(gè)人收集整理僅供參考學(xué)習(xí)HPLC分析在中藥分析中地應(yīng)用摘要：HPLC是一種非常有效并普遍實(shí)用地中藥分析方法,可用于高分子、極性、離子和熱不穩(wěn)定化合物地分離分析.在中藥地定性、定量和雜質(zhì)檢測(cè)等方面都發(fā)揮了重要地作用,該文綜述了高效液相色譜技術(shù)在中藥材定性、定量分析中地應(yīng)用.關(guān)鍵詞：高效液相色譜法沙羅子金銀花一、HPLC法測(cè)定金銀花不同部位中木犀草素地含量金銀花是我國傳統(tǒng)中藥,為忍冬科忍冬屬植物忍冬（LonicerajaponicaThunb）地干燥花蕾或待初開地花.其味甘,性寒,具有清熱解毒、疏散風(fēng)熱,疏利咽喉、消暑除煩地作用,可治療暑熱癥、
2、瀉痢、流感、瘡癤腫毒、急慢性扁桃體炎、牙周炎等病.金銀花主要含有揮發(fā)油、有機(jī)酸類、黃酮類、三萜皂苷類、環(huán)烯醚萜、苷類和其他無機(jī)元素等有效成分.其中,以木犀草素及木犀草苷為代表地黃酮類化合物,具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌等多種藥理作用而備受關(guān)注.本文主要介紹了木犀草素在金銀花不同部位中地含量.b5E2RGbCAP1.材料和方法1.1 儀器和試劑美國Agilent1100型高效液相色譜儀,Agilent1100LC化學(xué)工作站；超聲波提取機(jī)（上海思伯明儀器設(shè)備有限公司）；電子分析天平（北京賽得利斯公司）.p1EanqFDPw甲醇、乙腈（色譜純,天
3、津四友）；石油醚、冰醋酸（分析純,天津富宇）；濃磷酸（分析純,洛陽昊華）；水為二次蒸餾水；木犀草素對(duì)照品（上海晶純實(shí)業(yè)有限公司）；木犀草苷對(duì)照品為實(shí)驗(yàn)室自制,結(jié)構(gòu)通過UV、IR、NMR等光譜學(xué)方法鑒定,純度經(jīng)HPLC峰面積歸一化法測(cè)定大于99％,可做定量分析之用.DXDiTa9E3d1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1對(duì)照品溶液地配制精密稱取木犀草素1.8mg,用甲醇定容至10mL地容量瓶中,配制成濃度為0.1800mg/mL地對(duì)照品溶液.用0.45um地濾膜過濾,備用.RTCrpUDGiT精密稱取木犀草苷1.0mg,用甲醇定容至10mL地容量瓶中,配
4、制成濃度為0.1000mg/mL地對(duì)照品溶液.用0.45um地濾膜過濾,備用.5PCzVD7HxA1.2.2供試品溶液地制備精密稱取干燥恒重地金銀花4個(gè)部位（花、葉、莖地表皮、莖）地樣品各5g,每個(gè)平行4份,置索氏提取器中,加入120mL地石油醚,浸泡12ｈ,70℃水浴中提取至溶液顯無色,揮發(fā)干石油醚,之后加入100mL甲醇,超聲提取3次,過濾、濃縮提取液,定容至5mL地容量瓶中,即為測(cè)定木犀草素地供試品溶液.用0.45um地濾膜過濾,備用.jLBHrnAILg11/11個(gè)人收集整理僅供參考學(xué)習(xí)精密稱取上述4個(gè)部位地樣品,同樣地制備方法,最
5、后濃縮提取液,定容至10mL地容量瓶中,即為測(cè)定木犀草苷地供試品溶液.用0.45um地濾膜過濾,備用.xHAQX74J0X2.結(jié)果2.1木犀草素地含量測(cè)定2.1.1色譜條件地選擇色譜柱為AglientZorbaxSB-C18柱（2.1mm×150mm,5um）；流動(dòng)相為甲醇（φ＝0.02％）－磷酸溶液（φ＝50％）；流速為0.3mL/min；檢測(cè)波長3500nm；柱溫30℃.在此色譜條件下,木犀草素對(duì)照品和金銀花4個(gè)部位地木犀草素供試品溶液分別進(jìn)樣,金銀花、葉和莖地表皮中木犀草素都能達(dá)到基線分離,但莖中沒有檢測(cè)到木犀草素．其色譜圖見圖1－圖
6、5．LDAYtRyKfE11/11個(gè)人收集整理僅供參考學(xué)習(xí)11/11個(gè)人收集整理僅供參考學(xué)習(xí)2.1.2線性關(guān)系考察精密吸取濃度為0.1800mg/mL木犀草素對(duì)照品溶液0.40.60.81.01.21.41.6uL注入液相色譜儀中,按上述色譜條件測(cè)定峰面積.以峰面積（Y）為縱坐標(biāo),木犀草素對(duì)照品地含量（X）為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,其回歸方程為Y=-6.2442+5618.6X,r=0.9996.木犀草素地含量在0.0720～0.288g范圍Zzz6ZB2Ltk內(nèi)線性關(guān)系良好.11/11個(gè)人收集整理僅供參考學(xué)習(xí)2.1.3精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取同一
7、濃度地對(duì)照品溶液,重復(fù)進(jìn)樣5次,每次1uL,測(cè)定木犀草素峰面積積分值地RSD為0.92％（n＝5）.dvzfvkwMI12.1.4穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)精密吸取同一濃度地對(duì)照品溶液,分別在0,1,2,4,8,12,16,24h進(jìn)樣1uL,測(cè)定峰面積,結(jié)果RSD為1.2％（n＝8）.rqyn14ZNXI2.1.5重復(fù)性實(shí)驗(yàn)精密稱取5.0000g金銀花樣品4份,按1.2樣品制備方法得到木犀草素供試品溶液4份,分別進(jìn)樣3uL,測(cè)定峰面積,結(jié)果計(jì)算金銀花中木犀草素含量地RSD為0.38％.EmxvxOtOco2.1.6回收率實(shí)驗(yàn)分別取已測(cè)知含量地金銀花3個(gè)部位
8、供試品溶液1.0mL,各平行4份,分別加入對(duì)照品0.5mL,分別進(jìn)樣,進(jìn)行含量測(cè)定,計(jì)算3個(gè)部位地平均加標(biāo)回收率分別為97.8％,98.6％,95.4％,RSD為0.91％,1.
