大葉補(bǔ)血草活性成分的研究

大葉補(bǔ)血草活性成分的研究

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1、分類(lèi)號(hào)密級(jí)UDC編號(hào)碩士學(xué)位論文大葉補(bǔ)血草活性成分的研究池曉會(huì)(1218003)指導(dǎo)教師姓名譚成玉專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)環(huán)境科學(xué)論文答辯日期2015年6月1日學(xué)位授予日期2015年6月ThesisfortheDegreeofMasterStudiesonBioactiveComponentsfromLimoniumgmeliniiSupervisor:ChengyuTanMasterCandidate:XiaohuiChiEnvironmentalScienceDalianOceanUniversityDalian,LiaoningProvince,PR

2、.ChinaJUNE2015摘要摘要本論文以新疆特色鹽生植物——大葉補(bǔ)血草(Limoniumgmelinii)為研究對(duì)象,通過(guò)多種色譜分離純化方法相結(jié)合,對(duì)其石油醚、乙酸乙酯和正丁醇浸膏進(jìn)行了系統(tǒng)分離純化,共分離得到10種化合物,通過(guò)理化性質(zhì)分析、光譜數(shù)據(jù)分析等,鑒定了其中8種化合物,分別為楊梅素(C-1)、β-谷甾醇(C-2)、二氫楊梅素(C-3)、沒(méi)食子酸(C-4)、楊梅素-3-O-α-L-鼠李糖苷(C-5)、槲皮素(C-6)、胡蘿卜苷(C-7)和蘆?。–-8),其中化合物C-3、C-6、C-7和C-8為首次從該植物中分離得到??疾炝碎W

3、式輔助萃取-熱回流法提取制備大葉補(bǔ)血草總黃酮的工藝條件。熱回流提取中以50%乙醇作為溶劑,料液比為1:70,閃式輔助萃取時(shí)間15min,熱回流溫度為90?C。利用大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)一步純化總黃酮,篩選到AB-8型大孔吸附樹(shù)脂對(duì)補(bǔ)血草總黃酮具有較好的吸附率和解吸率,其吸附率為62.6%,解析率為79.3%??疾炝薃B-8大孔吸附樹(shù)脂對(duì)總黃酮的靜態(tài)吸附曲線,并對(duì)溶劑濃度和溶劑用量進(jìn)行了優(yōu)化。建立了RP-HPLC同時(shí)測(cè)定大葉補(bǔ)血草中的四種黃酮醇類(lèi)化合物——楊梅素-3-O-α-L-鼠李糖苷、楊梅素、蘆丁和槲皮素的方法。采用色譜柱KromasilC18柱

4、,甲醇-水-磷酸(40:60:0.4)作為流動(dòng)相,265nm下進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明,該方法在檢測(cè)條件下對(duì)四種化合物的分離具有精密度好、重現(xiàn)性高、穩(wěn)定性好、平均加樣回收率高等優(yōu)點(diǎn),可用于大葉補(bǔ)血草中四種黃酮醇的含量分析。對(duì)大葉補(bǔ)血草的提取物及總黃酮進(jìn)行了體外清除自由基、抑制ACE活性以及對(duì)急性酒精性肝損傷活性肝臟保護(hù)作用實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,大葉補(bǔ)血草總黃酮在濃度分別為50,100,200μg/mL時(shí)對(duì)DPPH?具有一定的清除活性,其活性大小與濃度成劑量依賴(lài)關(guān)系,對(duì)OH?的清除活性不強(qiáng)。乙醇提取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物和水層萃取物在濃度為10

5、0mg/mL時(shí)具有相對(duì)較高的抑制ACE活性。對(duì)制備的總黃酮進(jìn)行了急性酒精性肝損傷模型小鼠的肝臟影響實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明,總黃酮具有降低肝臟指數(shù),降低肝組織中ALT、AST活力,提升SOD活力,減少M(fèi)DA、LDH、TC和TG的含量,從而起到肝臟保護(hù)作用。其作用機(jī)制可能與總黃酮的抗氧化活性有關(guān)。關(guān)鍵詞:大葉補(bǔ)血草;化學(xué)成分;含量分析;總黃酮工藝;活性研究IAbstractAbstractInthispaper,tenchemicalconstituteswereisolatedbyvariouschromatographicandrecrystall

6、izedmethodsfromLimoniumgmeliniiinXinjiang.OnthebasicofanalysisofNMRdataandmeasurementofphysico-chemicalcharacters,thestructuresof8compoundswereidentifiedasMyricetin(C-1),β-sitosterol(C-2),dihydromyricetin(C-3),gallicacid(C-4),myricetin-3-O-α-L-rhamnoside(C-5),quercetin(C-6

7、),daucosterol(C-7)andrutin(C-8).Amongthem,compundsC-3、C-6、C-7andC-8wereisolatedfromthisplantforthefirsttime.TogetthetotalflavonoidsfromLimoniumgmelinii,itwasextractedwith50%ethanolbyusingheatrefluxextractioncombinedwithflashextraction.Thebestconditionswereasfollows:materia

8、ltoliquidwas1:70g/mL,flashextractiontimewas15minutesandthetemperatureofheatrefluxextracti

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