天祝白牦牛kap家族基因克隆、原核表達(dá)及其在皮膚中的表達(dá)分析

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1、分類號(hào)：Ｓ８密級(jí)：公開(kāi)馨＊《茄Ａ藏＃碩±學(xué)位論文題目：天祝白倦半胤Ｐ家族基因巧隆、原核寨達(dá)及其在皮膚中的表達(dá)分析燭名：化良斌學(xué)號(hào)：￥。２１４０４６７學(xué)曉－：生命科學(xué)與工超學(xué)院專業(yè)：動(dòng)物遺傳育種與巧殖硏巧方向：現(xiàn)代生物技術(shù)與動(dòng)物有＃辱師：巧和平敵巧聞萍研巧員二〇—五年五月Ｃｌｏｎｉｎｇ，ｐｒｏｋａｒｙｏｔｉｃｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｓｋｉｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆｔｈｅＫＡＰｅｎｅｆａｍｉｌｉｎＴｉａｎｚｈｕｗｈｉｔｅｇｙａｋｙＡＴｈｅｓｉｓＳｕ

2、ｂｍｉｔｔｅｄｆｏｒｔｈｅＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒＣａｎｄｉｄａｔｅ：ＬｉａｎｇｂｉｎＺｈａｎｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒ；Ｐｒｏｆ．ＨｅｉｎＰａｎｐｐｇＰｒｏｆ．ＰｉｎＹａｎｇＮｏｒｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｆｏｒＮａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓｙＬａｎｚｈｏｕ，Ｃｈｉｎａ關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)Ｆ所完成的論義義相關(guān)的作品，知識(shí)產(chǎn)權(quán)１ＨＭ腳北民族大學(xué)。本人完全了解閒北民族大學(xué)有關(guān)保存、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保存或向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的紙質(zhì)版和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)西北民族大學(xué)可Ｗ

3、毎本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可采用任何復(fù)制手段保存和＇匯編本學(xué)位論文。本人離校后發(fā)表、使用學(xué)位論文或與該一論文葺接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時(shí)，第署名單位仍然為西北廣族大學(xué)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。論文作者簽名；導(dǎo)師豁名曰期：貨文口？■西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院２０１２級(jí)動(dòng)物遺傳育種與繁殖學(xué)碩±研究生畢業(yè)論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：本人所呈交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。學(xué)位論文中凡引用化人己經(jīng)發(fā)表或未發(fā)表的。成果、數(shù)據(jù)、觀點(diǎn)等，均已明確注明出處陳文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)。容外，不包含任何其他

4、個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的科研成果對(duì)本文的研究成果做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均己在文中Ｗ明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。？論文作者簽名．２０：日期：Ｗ王．［ＩＩ西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院２０１２級(jí)動(dòng)物遺傳育種與繁殖學(xué)碩±研究生畢業(yè)論文摘要一巧牛Ｗ全身密生長(zhǎng)毛及絨毛而得名，是唯產(chǎn)絨的牛種，天祝白輪牛是特有的產(chǎn)白色絨毛的品種，，由于白色絨毛有利于染色因此降低了紡織業(yè)中染色的難度。角蛋白關(guān)聯(lián)蛋白（ＫＡＰ）作為主要的絨毛蛋白，在絨毛的生長(zhǎng)中起著重要作用ＡＰ家族蛋白一。本試驗(yàn)旨在通過(guò)研究Ｋ為篩選控制絨毛生長(zhǎng)的主效基因奠定定的基礎(chǔ)。該研

5、究選取了ＩＣＡＰ家族的四個(gè)基因必４戶＆４戶１厶反ＡＰｙ／．ｉ和化４尸７義７作為研究對(duì)象。根據(jù)相應(yīng)的四個(gè)基因在Ｇｅｎｂａｎｋ中尋找報(bào)道的黃牛的序列設(shè)計(jì)它們的引物，通過(guò)ＰＣＲ擴(kuò)增的手段得到這四個(gè)基因的目的片段，運(yùn)用ＴＡ克隆技術(shù)獲得其完整編碼區(qū)（ＣＤＳ）序列并使用生物信息學(xué)軟件對(duì)基因進(jìn)行分析。將克隆得到的目的片段轉(zhuǎn)入表達(dá)載體并用大腸桿菌（Ｅｃｗ７）表達(dá)蛋白質(zhì)。運(yùn)用ｅａ－ＰＣＲ技術(shù)＆４Ｐ家族基因在絨毛生長(zhǎng)期和休止Ｒｌｔｉｍｅ檢測(cè)天祝白巧牛期皮膚組織中這四個(gè)基因之間的表達(dá)差異。研究結(jié)果如下：（１）通過(guò)ＴＡ克隆得到了化４戶人／，必４戶３．７，／＾４戶化７和必４戶化／基

6、因的完整ＣＤＳ區(qū)序列?；蛲暾木幋a區(qū)長(zhǎng)度為５（Ｍｂｐ，所編碼的蛋白質(zhì)含有白含有Ｈ－１６６個(gè)氨基酸，ｉｈｓｕｌｈｕｒｋｅｒａｔｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｒｏｔｅｉｎ；該蛋白屬于親水性蛋ｇｐｐ家族蛋白的完整結(jié)構(gòu)域，共含有６個(gè)磯酸化位點(diǎn)，該蛋白在線粒體上發(fā)揮生物學(xué)，，作用，二級(jí)結(jié)構(gòu)含有ａ螺旋，延伸鏈Ｐ轉(zhuǎn)角無(wú)規(guī)卷曲四種結(jié)構(gòu)；Ｋ４Ｐ義Ｊ基２９７ｂ，因完整的編碼區(qū)長(zhǎng)度為ｐ，所編碼的蛋白質(zhì)含有９８?jìng)€(gè)氨基酸該蛋白屬于親水性蛋白，含有Ｋｅｒａｔｉｎ，ｈｉｇｈｓｕｌｐｈｕｒｍａｔｒｉｘｐｒｏｔｅｉｎ家族蛋白的結(jié)構(gòu)域，共含５，二有個(gè)磯酸化位點(diǎn)，該蛋白在細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中發(fā)揮生

7、物學(xué)作用級(jí)結(jié)構(gòu)含有，轉(zhuǎn)角８０ｂ，延伸鏈Ｐ，無(wú)規(guī)卷曲Ｈ種結(jié)構(gòu)；基因完整的編碼區(qū)長(zhǎng)度為４ｐ所編碼的蛋白質(zhì)含有１５９個(gè)氨基酸，該蛋白屬于親水蛋白，含有完整的ｅｒａ－Ｋｔｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ家族蛋白的結(jié)構(gòu)域，共含有１８?jìng)€(gè)磯酸化位點(diǎn)，該蛋白，二級(jí)結(jié)構(gòu)含有延伸鏈必１尸７義７，無(wú)規(guī)卷曲兩種結(jié)構(gòu)在線粒體上發(fā)揮生物學(xué)作用；基因完整的編碼區(qū)長(zhǎng)度為４９５ｂｐ，所編碼的蛋白質(zhì)含有１