日本結(jié)縷草zjdreb2.2基因克隆及功能研究

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1、學(xué)校代碼：１００５２Ｓ１２０９５ＩＢ？ｒＩｊｔ＾ｔ學(xué)號(hào)：ｌ化＇？個(gè)顛《１＾ＭＩＮＺＵＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＣＨＩＮＡ碩±學(xué)位論文巧木結(jié)鍵？草巧Ｄ義Ｅ公２２基因克隆義功能研完姓名；可祥指導(dǎo)教師；韋善君’＇學(xué)院；生命與環(huán)境科學(xué)學(xué)院專業(yè)：生物化學(xué)與分子生物學(xué)完成日期：２０巧年１２月學(xué)位論文使用授權(quán)書《》根據(jù)中央民族大學(xué)關(guān)于研巧生學(xué)位論文收藏和利用管理辦法，我校的博±、碩±學(xué)位獲得者均須向中央民族大學(xué)提交本人的學(xué)位論文紙質(zhì)本及相應(yīng)電子版。本人完全了解中央民族大學(xué)有關(guān)研究

2、生學(xué)位論文收藏和利用的管理規(guī)定。中央民族大學(xué)擁有在《著作權(quán)法》規(guī)定范圍內(nèi)的學(xué)位論文使用權(quán)，即：（１）學(xué)位獲得者必須按規(guī)定提交學(xué)位論文（包括紙質(zhì)印刷本及電子版）；２為教學(xué)和科研目的，（）學(xué)?？桑讓⒐_的學(xué)位論文作為資料在圖書館等場所提供校內(nèi)師生閱讀等服務(wù)；３（根據(jù)教育部有關(guān)規(guī)定，中央民族大學(xué)向教育部指定單位提交公開的學(xué)位論文；）４學(xué)位論文作者授權(quán)學(xué)校向中國科技信息研究所及其萬方數(shù)據(jù)電子出版社和中（）國學(xué)術(shù)期刊（光盤電子出版化提交規(guī)定范圍的學(xué)位論文及其電子版并收入相應(yīng)）。學(xué)位論文數(shù)據(jù)庫，通過其相關(guān)網(wǎng)站對(duì)外進(jìn)行信息服務(wù)同時(shí)本人保

3、留在其他媒體發(fā)表論文的權(quán)利。本人承諾；本人的學(xué)位論文是在中央民族大學(xué)學(xué)習(xí)期間創(chuàng)作完成的作品，并一致已通過論文答辯提交的學(xué)位論文電子版與紙質(zhì)本論文的內(nèi)容，如因不同造；成不良后果由本人自負(fù)。本人同意遵守上述規(guī)定。（□保密保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書，本論文；□不保密，期限至年月止）作者暨授權(quán)人簽字：＾２０作年／去月／Ｉ日學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研巧工作所取。得的研究成果除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本學(xué)位論文的研究成果不包含任何他人創(chuàng)作的、已公開發(fā)表

4、或者沒有公開發(fā)表的作品的內(nèi)容。對(duì)本論文所涉及的。研巧工作做出貢獻(xiàn)的其他個(gè)人和集體，均已在文中明確方式標(biāo)明本學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽字：２０Ｉ女年月）＞日Ｉ摘要如ａＷ一結(jié)縷草（Ｚ巧ｉｎｄ．）是類多年生禾本科植物，具有發(fā)達(dá)的甸旬莖和根狀莖，因具有抗干旱、耐踐踏、抗鹽堿、抗病蟲害能為強(qiáng)等特點(diǎn)一，所成為我國主要的建坪草種之。目前關(guān)于結(jié)縷草結(jié)縷草抗逆分子機(jī)制研究尚不深入。研究結(jié)縷草對(duì)逆境脅迫的分子響應(yīng)特征，對(duì)結(jié)縷草的種植管理和育種研究有指導(dǎo)作用。己有研究表明ＤＲＥＢ家族轉(zhuǎn)錄因子參與

5、植物抗逆基因表達(dá)的調(diào)控，在植物逆境響應(yīng)中起關(guān)鍵＇＇作用。本研究Ｗ日本結(jié)縷草Ｍｅｙｅｒ?yàn)椴牧?，獲得了ＺｙＤ胃２．２的－２家族成員基因，是ＤＲＥＢ類Ａ，對(duì)其表達(dá)模式和基因功能進(jìn)行了初步研究，結(jié)果如下：■１ｉ化公２－．２有兩，分別命名為句。／化公２２Ｓ．勾Ｄ個(gè)轉(zhuǎn)錄本和一度２－－．２王：Ｄ施公２２王基個(gè)５０ｂ的插入序列勾。施。句因含有ｐ，導(dǎo)致了２２－Ｓ有完整的閱讀框閱讀框提前終止。勾。胃，推測編碼３３８個(gè)氨基酸．６，ｉ，編碼的蛋白質(zhì)分子量（ＭＷ）３７２９７等電點(diǎn)ｐ為４．８６，第ｎ■一８９－１４５－位氨基酸構(gòu)成個(gè)典型的Ａ

6、Ｐ２結(jié)構(gòu)域。句ｍｅ公２．２Ｓ編碼的蛋白屬于ＤＲＥＢ２組，與禾本科Ｃ４植物中的高梁、谷子的同源基因遺傳距離較近。２．在正常生長條件下，結(jié)縷草葉中句；餅祀公２．么Ｓ、勾Ｄｉ祀公２又五°均有表達(dá)，受１２Ｃｌ＾下低溫誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá)，而對(duì)干旱和高鹽脅迫響應(yīng)°不顯著。在４Ｃ低溫下脅迫７２ｈ期間－，根和甸旬莖中的勾；Ｄｉ祀公２．２Ｓ－均上調(diào)表達(dá)。葉和甸甸莖中句；Ｄｉ姐貨２．２Ｚ的表達(dá)也受低溫誘導(dǎo)，但在根中的表達(dá)受低溫抑制。３ＧＡＬ４ＢＤ－ＤＲＥ．在酵母細(xì)胞中，句Ｄ胃２．２苗融合基因可與元件特異結(jié)合并調(diào)節(jié)報(bào)告基因Ｈ３－ＩＳ和Ｌａ

7、ｃＺ基因的表達(dá)；ＧＡＬ４ＢＤ－－：Ｄ化公２２Ｓ句／．融合基因表現(xiàn)出很強(qiáng)的轉(zhuǎn)錄激活活性。句；度２．２王沒有這些活性。；Ｄ胃２４．構(gòu)建了３巧啟動(dòng)子調(diào)控的勾．２基因表達(dá)載體，通過農(nóng)－桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化擬南芥。通過ＰＣＲ篩選得到１７株轉(zhuǎn)化了句；Ｄｉ祀說．２５－－和１株轉(zhuǎn)化了勾；Ｄ胃２２Ｚ的植株。轉(zhuǎn)化勾Ｄｉ祀度２．２Ｓ的植株具有矮？公胃２－化、生長緩慢和花期推遲的表型．２Ｌ，而轉(zhuǎn)化句植株生長表型與對(duì)照植株無明顯差異。關(guān)縫詞：結(jié)縷草；ＤＲＥＢ；逆境響應(yīng)模式；酵母單雜交；轉(zhuǎn)基因陽ＡＢＳＴＲＡＣＴＺｏ＊ｓｉａｒａｓｓＺ６別幻Ｗｉｌ

8、ｌｄ．過ｔｅｏｆｅｉｅｍｉｉａｌｒａｍｉｎｅｏｕｓｒａｓｓｙｇ（｜ｙ），ｙｐｐｇｇｄｅｖｅｌ