松果菊苷誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化及作用機(jī)制研究

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1、學(xué)校代號１０１６２學(xué)號２０１２１０１０００１２戀遂《中Ｉ似若Ｌｉａｕ凸ｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌ仁ｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉ面ｅｇｙ＇＇ｉ－ｆｌ博±學(xué)位論文松果菊魯誘導(dǎo)骨聽間充質(zhì)干細(xì)胞向成胥細(xì)胞分化及作巧機(jī)制研究■？■－？．？．，．＇．．？Ｉ．？－．－＇＇．－：：，．學(xué)位申請人田原指導(dǎo)教師姓名秦書伶專處名說中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)申請學(xué)位類型學(xué)術(shù)學(xué)位論義提交日期二〇—五年千一月江寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性與真實(shí)性聲明

2、本人鄭重聲明一：在我呈交的學(xué)位論文中，本人經(jīng)研究所得的數(shù)據(jù)、原理、結(jié)論等切內(nèi)容均真實(shí)，且經(jīng)本人認(rèn)真核對無誤；我呈交的與學(xué)位論文巧關(guān)的資料（原始記錄、照片、錄像片、檢查化驗(yàn)報(bào)告單等）確為完整的學(xué)位論文研究中的原始資料，本人沒作任柯修改：我呈交的學(xué)位論文是我本人在指導(dǎo)教師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的硏究成果。除文中特別加標(biāo)注和致謝的地方外．論文中沒有其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，其他人對我完成此論文的幫助Ｗ及對本硏究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確說明并表示謝意。我呈義的學(xué)位論文及與該論文相關(guān)的

3、資料若有不實(shí)之處一，本人承擔(dān)切相關(guān)責(zé)任。學(xué)位論文作者篇名巧私Ｒ期：如化年月円關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解３１寧中醫(yī)藥大學(xué)有關(guān)保留使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國家荷關(guān)部口機(jī)構(gòu)送義論文的印刷版和電子版，化許被查閱和借閱。本人授權(quán)寧中醫(yī)藥乂學(xué)Ｉ可Ｗ將本學(xué)化論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)掘庫進(jìn)巧檢索＾，可心采用影印、縮印或巧化復(fù)印手段保存和匯編本學(xué)位論文。（保密論文在解密后應(yīng)遵巧此規(guī)定）、馬廣學(xué)位論文作者巧名、學(xué)位論文導(dǎo)師簽名円徹／２？：Ｗ過年月＾円目錄一、摘要中文

4、論著摘要１英文論著摘要７二、英文縮略語１９Ｈ、正文論文一松果菊巧促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖的研究前胃２１材料與方法２２實(shí)驗(yàn)結(jié)果２７３０Ｗ論齡３３論文二松果菊昔誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的研究前胃３４材料與方法３５實(shí)驗(yàn)Ｓ果３９４７討論１Ｓ５論論文Ｈ松果菊巧誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化機(jī)制的研究前胃５２材料與方法５３實(shí)驗(yàn)結(jié)果５８討論７４Ｓ７９論８０四、本研究創(chuàng)新性的自我評價五８１、參考

5、文獻(xiàn)六、附錄綜述８８在學(xué)期間科研成績１０５敢射１０６個人簡介１０７遼寧中醫(yī)藥欠學(xué)２０１５屆博去學(xué)位論文摘要中文論著摘要＂＂腎主骨為依據(jù)Ｐ－Ｓｍａｄ－Ｒｕｎｘ２目的：本研究Ｗ中醫(yī)理論，從成骨分化的ＢＭ２信號途徑出發(fā)，采用細(xì)胞培養(yǎng)、Ｅｌｉｓａ檢測、免疫巧光細(xì)胞染色法、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ－和ＲＴＰＣＲ等多種技術(shù)方法，觀察補(bǔ)腎中藥肉巧蓉（傳統(tǒng)補(bǔ)腎中藥）中的活性成分松果菊昔含藥血清誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Ｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｓｔｅｍｃｅｌｌｓ，

6、ＢＭＳＣｓ）向成骨細(xì)胞分化的作用，并從細(xì)胞及分子水平揭示松果菊巧含藥血清發(fā)揮誘導(dǎo)作用的機(jī)制一種新的誘導(dǎo)，為骨組織工程的種子細(xì)胞的來源提供劑，為ＢＭＳＣｓ在組織工程及骨折愈合及骨缺損修復(fù)方面的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)及相一一個新的思路關(guān)依據(jù)，也為松果菊巧的進(jìn)步開發(fā)利用提供。材料與方法：一ＢＭＳＣｓ增殖的研究。１．第部分：松果菊昔促進(jìn)制備松果菊昔含藥血清。取Ｓ昨ＳＤ（Ｅｃｈｉｎａｃｏｓｉｄｅ，６０只級大鼠，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為正常組和松果菊昔ＥＣＨ）組（松果菊巧的濃度為４ｍｇ／ｍｌ，每只大。松果菊昔組給予

7、松果菊巧水溶液鼠每次灌胃１ｍｌ）灌胃，正常對照組給予等體積的生理鹽水，兩組每日均灌胃２１次，連續(xù)４ｄ。末次灌胃后用０％水合氯醒進(jìn)行腹腔麻醉，用負(fù)壓采血管從腹主動°脈采血，室溫下使血液自然凝固，離也后分離出血清，經(jīng)５６Ｃ水浴滅活３０ｍｉｎ，°－過濾除菌后分裝到無菌的離也管中，８〇Ｃ冰箱保存。２．ＢＭＳＣｓ的分離培養(yǎng)。采‘用全骨髓貼壁篩選方法進(jìn)行原代ＢＭＳＣｓ的分離，在３７Ｃ，含５％Ｃ化的飽和濕度３ｄ在倒置顯微鏡下觀察，培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。接種后第，見細(xì)胞貼壁后半量換液Ｗ后每２ｄ換液１次。原代培養(yǎng)１４ｄ時細(xì)胞

8、融合達(dá)８０％，進(jìn)行傳代培養(yǎng)。３．ＢＭＳＣｓ的鑒定Ｐ３代ＢＭＳＣｓ，接種在置有蓋玻片的２４孔培養(yǎng)板內(nèi)，培。取對數(shù)生長期的４ｄＤ。，。ｚ、ＣＤ、ＣＤ？的表達(dá)養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每天更換培養(yǎng)基培養(yǎng)免疫巧光檢測ＣｇｍＰ３ＢＭＳＣｓ４，．松果菊昔對ＢＭＳＣｓ增殖的影響代調(diào)整細(xì)胞濃