油桐kar基因的克隆與功能研究

《油桐kar基因的克隆與功能研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、：分類號；密級學(xué)校代號：１０５３８學(xué)號；２２０１２００１６５ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕ化ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＦｏｒｅｓｔｒ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｙｙｇｙ碩±學(xué)術(shù)學(xué)位論文油桐似基因的克隆與功能研究作者姓違：劉美蘭導(dǎo)師姓；ｇ：譚曉風(fēng)教授培養(yǎng)學(xué)院：林學(xué)院學(xué)科違稱：經(jīng)濟林研究方向：經(jīng)濟林栽培與育種提交日期：２０１５年５月ＳｔｕｄｙｏｎＣｌｏｎｉｎａｎｄＦｕｎｃｔｉｏｎａｌＥｘｒｅｓｓｉｏｎｏｆＫＡＲＧｅｎｅｉｎ

2、ｇｐＶｅｒｎｉｃｉａｆｏｒｄｉｉｂｙＬＩＵＭｅｉｌａｎＡｔｈｅｓｉｓｓｕｂｍｉｔｔｅｄｉｎｐａｒｔｉａｌｓａｔｉｓｆａｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅＲｅｕｉｒｅｍｅｎｔｓｆｏｒｔｈｅｄｅｒｅｅｏｆｑｇＭａｓｔｅｒｏｆＡｇｒｏｎｏｍｙＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒＰｒｏｆｅｓｓｏｒＴＡＮＸｉａｏｆｅｎｇＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｏｆＦｏｒｅｓｔｒａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｙｙｇｙ４９８ＳｈａｏｓｈａｎＳｏｕｔｈＲｏａｄＴｉａｎｘｉｎ

3、Ｄｉｓｔｒｉｃｔ，ＣｈａｎｓｈａＨｕｎａｎ４１０００４Ｐ．Ｒ．ＣＨＩＮＡｇ，Ｍａ２０１５ｙ，中表＃Ａ種我乂營學(xué)位論文原卸性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨立進巧研究所取得的研究成果。除了文中特別加標注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的成果作品，也不包含為獲得中南林業(yè)科技大學(xué)或其他教育機構(gòu)的學(xué)位或證書所使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均己在文中Ｗ明確方式表明。本人完全意識到本聲明的法律后果由本

4、人承擔(dān)。作者簽名：年５月又乏日中杰掙Ａ種栽夫令學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留，、使用學(xué)位論文的規(guī)定同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部ｎ或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件或電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)中南林業(yè)科技大學(xué)可將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可Ｗ采用影印、縮?。崳娀驋呙璧葟?fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于：１、保密□＾年解密后適用本授權(quán)書。２、不保密ｓ／ｏＷ（請您在上相應(yīng)方框打）作者簽名：冷導(dǎo)師簽名；

5、＂弓年Ｓ月於曰年（月乂曰摘要油桐是中國所特有的經(jīng)濟林木，還被，同時也是世界上著名的工業(yè)用油樹種一稱為我國四大木本油料樹種之。桐油的脂肪酸主要由桐酸、、棟擱酸、硬脂酸油酸一、亞油酸等組成，其中桐酸的含量最高，達７０％Ｗ上，是種優(yōu)質(zhì)的工業(yè)使一。用油在油桐種子脂肪酸生物合成代謝的過程中，包括系列調(diào)控生理生化代謝過程的酶和基因，其中包含最主要的ＦＡＳ和ＦＡＥ兩個復(fù)合酶系統(tǒng)。本研究是Ｗ油桐１’品種不同發(fā)育時期種子為材料葡萄桐，在已構(gòu)建的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫的基礎(chǔ)上，對ＦＡＳ中袖桐底基因

6、進行全長ｃＤＮＡ克隆和功能研究，從而對油桐脂肪酸生物合成途徑和油桐及油料樹種的遺傳改良提供科學(xué)依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：‘’１、油桐億４乂基因的克隆及生物信息學(xué)分析。油桐葡萄桐品種成熟種子－ＰＣ民－ＡＣＰ還原似ｉ？基因為材料，采用普通擴增技術(shù)克隆獲得油桐Ｐ麗脂酷酶ｆＫＡＲｌ和巧Ｋ１ＡＲ２ｅｎＢａｎｋ：家族的兩個成員，并將其分別命名為ｆ（Ｇ登錄號＿ＪＫＦ０２５６４６，ＫＦ０２５６４７）。巧ＪＣＡＲ１和皆ＪＣＡＲ２的ＯＲＦ長度分別為９９３ｂｐ和９０３ｂｐ，３５成３２證

7、）所編碼的蛋白質(zhì)分子量分別為和，等電點分別為９．２８和９．１１，綜合＾＿ＫＡＲ１和巧１ＫＡＲ２的脂肪系數(shù)與總平均親水性來分析可推測兩基因編碼的蛋白都為疏水性蛋白。ＫＡＲＭ基酸巧ＪＣＡＲ１存在１個跨膜域和１個疑似跨膜域，ＰｙＫＡＲ存在２個疑似跨膜域。Ｆ／ＫＡＲ１和ＣＡＲ２都含有葉綠體轉(zhuǎn)運肢和多＿＿皆Ｊ個活性位點？、ＮＡＤＣＡ民１０ａａ２５６ａａ和ＣＡＲ２（巧結(jié)合位點，巧Ｊ蛋白序列的９巧Ｊ？５９ａａ２２５ａａ蛋白序的都是短鏈脫氨還原酶蛋白的保守區(qū)域，屬于短鏈脫氨酶還原酶（ＳＤ民）家庭成員

8、。巧ＪＣＡＲ１和巧ＪＣＡＲ２蛋白的二、三級構(gòu)分析發(fā)現(xiàn)它們主要Ｗ、ａｍｏａ螺旋和Ｐ折疊為主，它們的結(jié)構(gòu)中也由兩個右手螺旋的ｐｐａｐｔｉｆ組ＡＲ？成Ｃ１ＣＡＲ２氨基酸序列與其他物種的同源性在的８２％之間，。巧Ｊ和巧Ｊ巧ＪＣＡＲ１和皆ＪＣＡＲ２相似性僅有７４％。綜合Ｗ上生物信息學(xué)分析可推斷巧１ＫＡＲ１和＾＿ＫＡＲ２確為油桐億４乂基因家族的兩個成員。２、油桐足４乂基因在油桐不同組織和不同發(fā)育時期的表