溫度刺激和鰻弧菌感染對牙鲆hsp90基因表達的影響

《溫度刺激和鰻弧菌感染對牙鲆hsp90基因表達的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。

1、分類號學(xué)號ＭＺ１２４８８ＵＤＣ密級轅叫大孽＂ＹＡＮＧＺＨＯＵＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ碩擊學(xué)隹冷文（專業(yè)型）溫度刺激和？弧菌感染對牙鮮Ｈｓｐ９０基因表達的影響生安志指導(dǎo)教師姓名：鞠輝明副教授，揚州大學(xué)，江蘇揚州，２２５００９莫．照蘭研究員，中國水產(chǎn)科學(xué)研究院黃海水產(chǎn)研究所，山東青為，２６６０７１申請學(xué)位級別：碩壬學(xué)科專業(yè)名稱：獸醫(yī)碩壬論文提交日期：２０１５年４月論文答辯日期：２０１５年５月學(xué)位授予單位：揚州大學(xué)學(xué)位授予日期：２０１５年６月答辯委員

2、會主席；２０１５年５月溫度刺激和鎮(zhèn)弧菌感染對牙鮮Ｈｓｐ９０基因表達的影晌ＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｓｏｆＨｓｐ９０ｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔａｎｄＶｉｂｎｏａｎｇｕｉｎａｒｕｍｉｎｆｅｃｔｉｏｎｉｎＰａｒａｌｉｃｈｔｈｙｓｏｌｉｖａｃｅｕｓ研究生：生安志學(xué)科：獸醫(yī)碩±導(dǎo)師；鞠輝明副教授莫照蘭硏究員揚州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院２０１５年５月生安志Ｉ：溫度刺激和饋弧菌感染對牙輯Ｈｓｐ９０基因表達的影響中文摘要’牙輯（化ｍ艙ｏ＆ｗｃｅｗ）

3、是我國的重要海水養(yǎng)殖魚類，病害頻繁發(fā)生影響該養(yǎng)殖品種的可持續(xù)發(fā)展一。熱激蛋白（ｈｅａｔｓｈｏ化ｒｏｔｅｉｎｓＨＳＰｓ是ｐ，）類在有機體受到高溫等逆境刺激后大量表達的伴侶蛋白，在環(huán)境脅迫和免疫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用，了解牙解熱激蛋白的作用機制對疾病防治有重要的意義。本研究開展了牙奸Ｈｓｐ９０ａ和Ｈｓｐ９０ｐ基因在溫度刺激和病原菌感染下表達變化，旨在為牙砰疾病控制提供理論指導(dǎo)。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下：１．Ｈｓ９０基因在不同發(fā)育期牙解的表達分布：利用實時癸光定量ＰＣＲ９０ａｐ，檢測Ｈｓｐ和Ｈｓ９？ｐ〇ｐ基因ｍＲ

4、ＮＡ在不同發(fā)育期牙輯（２０ｇＩＫｇ）的表達分布，結(jié)果顯示，Ｈｓｐ９０ａ和Ｈｓｐ９０３在檢測的不同發(fā)育期牙鮮的１３種組織（肝臟、脾臟、頭腎、后腎、也、肌肉、皮｜膚、胃、腸、鮑、腹錯、腦和血液）中均有表達。在檢測的不同發(fā)育期牙解中Ｈｓ９０３的ｐ｜表法水平整體高于Ｈｓｐ９０ａ；檢測還發(fā)現(xiàn)在８月齡（２００ｇ±５０ｇ）牙解在肝、鮑、背皮、背肌、腹ＩＩ的Ｈｓｐ９０ａ表達量要顯著高于其他發(fā)育期同組織的表達量（戶＜〇．〇５），而Ｈｓｐ９０３在各｜不同大小牙鮮的表達量也具有明顯的差異。‘－２．ｓ９０基因表達的影響溫度和媛弧

5、菌感染對牙輯Ｈｐ；選?。冈慢g牙解在５３２Ｃ刺激°－比后、（，牙鮮肝臟脾臟Ｈｓ９０ａ在高溫２２３２Ｃ）的表達量急驟升高Ｈｓ９０ｐ，而ｐｐ在不同溫度刺激期間表達量變化較小°°；在１０Ｃ、２８Ｃ連續(xù)刺激化，Ｈｓｐ９０ａ和Ｈｓｐ９０的ｍＲＮＡｐ的表現(xiàn)為先升后降的趨勢，Ｈｓｐ９０ａ在高溫時的表達量變化幅度明顯高于Ｈｓ９０。ｐｐ用媛弧菌感染８月齡牙鮮，在感染７２ｈ內(nèi)，牙解脾臟Ｈｓｐ９０ａ和Ｈｓｐ９〇ｐ的表達量先降后升，Ｈｓｐ９〇Ｐ上升的幅度明顯（於０．０５）。結(jié)果表明，Ｈｓｐ９０ａ對高溫?zé)釕?yīng)激的反應(yīng)明顯，Ｈｓｐ９〇在

6、對病原菌感染的反應(yīng)明顯。ｐ３．牙鮮Ｈｓ９０ａ的原核表達：將Ｈｓ９０ａ基因ＢＡＤ／ｌｌｌＡ質(zhì)粒中ｐｐ克隆到ｐｇ，構(gòu)建重組載體ｐＢＡＤ－ｓ／ＩＩＩＡＨ９０，并轉(zhuǎn)入到大腸桿菌ＴｏｌＯ以阿拉伯ｇｐｐ感受態(tài)細胞中，經(jīng)過糖誘導(dǎo)表ｅｒｎＢ達，對目的蛋白進行Ｗｅｓｔｌｏｔ檢測Ｗ及做質(zhì)譜表達分析驗證，結(jié)果表明重組蛋白得到正確表達，為后續(xù)對Ｈｓｐ９０ａ蛋白的研究提供基礎(chǔ)條件。關(guān)鍵詞：Ｈｓｐ９０；組織分化溫度刺激；病原感染；原核表達ｎ揚州火學(xué)碩十學(xué)依論文ＡＢＳＴＲＡＣＴ戶ａ尸幻／／［知妙ｏ／／ｖ口ｃ￡Ｕ５ｉｓ

7、ｏｎｅｏｆａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｍａｒｉｎｅｃｕｌｔｕｒｅｄｆｉｓｈａｎｄｔｈｅｓｕｓｔａｉｎａｂｌｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｉｔｓｃｕｌｔｕｒｅｅａｓｉｌｙａｆｆｅｃｔｅｄｂｙｆｒｅｑｕｅｎｔｌｏｃｃｕｒｒｅｄｄｉｓｅａｓｅｓ．ＴｈｅｈｅａｔｓｈｏｃｋｙｒｏｔｅｉｎＨＳＰｓｓａｋｉｎｄｏｒｏｎｉ打ｓｗｃｈｈａｓａｎｎｃｒｅａｓｅｄｅｘｒｅｓｓｏｎａｆｔｅｒａｆｆｅｃｔｏｎｗｉｔｈｐｉｆｃｈａｐｅｈｉｉｐｉｉ（）ｈ，ｈｉｇｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ

8、ａｎｄｏｔｈｅｒａｄｖｅｒｓｉｔｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ．Ｕｎｄｅｒｓ１：ａｎｄｉｎ化ｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＰｏ／／ｖａｃ￡ｗｓｓｇＨＳＰ，ｓａｃｔｉｏｎｉｓｃｒｕｃｉａｌｔｏｉｔｓｄｉｓｅａｓｅｒｅｖｅｎｔｉｏｎ．Ｉｎｔｈ