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《腦腸肽對(duì)腎間質(zhì)纖維化療效及作用機(jī)制的研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類(lèi)號(hào)密級(jí)UDC編號(hào)碩壬學(xué)位論文廣巧膚對(duì)腎間巧奸維化巧效及作用機(jī)制的研究Thee化ctandmechanismofhrelinonrenalin化rstitialfibrosisg孫光巧導(dǎo)師獲名趙明巧巧?;瘋洌壡擅谀蛲饪疲墸崳娕囵B(yǎng)類(lèi)型學(xué)術(shù)型論文巧《日期2015年3月31日南方醫(yī)科大學(xué)2012級(jí)碩壬學(xué)位論文腦腸膚對(duì)督間質(zhì)纖維化療效及作用機(jī)制的研究Theeffectandmechanismofghrelin
2、onrenalinters村村alfibrosis8in〇696課題來(lái)源:國(guó)家自然科學(xué)基金()學(xué)位申請(qǐng)人孫光曠導(dǎo)師姑若趙明教授專業(yè)違稱泌尿外科(腎移植)培養(yǎng)類(lèi)型學(xué)術(shù)型培養(yǎng)層次碩去研究生所在學(xué)院第二臨床醫(yī)學(xué)院答辯委員會(huì)主席陳立中教授答辯委員會(huì)委員徐健教授{y{^林民專教授王平教授/李民教授2015年3月31曰廣州碩去學(xué)位論文腦腸化對(duì)督間廣纖維化療效及作用機(jī)制的研究碩±研究生;孫光犧指導(dǎo)教師:趙明教授摘
3、要第一章腦肪化對(duì)UUO大鼠腎間質(zhì)纖維化影響及機(jī)制;(RenalinterstitialfibrosisRIF)是由多研究背景腎間質(zhì)纖維化,種原因引起的細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellularmatrix,ECM)過(guò)渡沉積,并最終導(dǎo)致腎臟纖維形成和功能喪失,是多種慢性腎臟疾病(ChronickidnediseaseCKDy,)進(jìn)展至終末期腎病的最后共同通路,也是導(dǎo)致終末期腎功能衰竭的主要病理基礎(chǔ)。目、血前針對(duì)終末期腎衰竭只能實(shí)施腹膜透析液透析和腎臟移植等替代療法,而、患者的
4、生活質(zhì)量不高腎臟移植又存在供體短缺及腎移透析治療的并發(fā)癥多;植術(shù)后相關(guān)并發(fā)癥等問(wèn)題,因此及早干預(yù)甚至逆轉(zhuǎn)腎臟纖維化對(duì)于防治終末期腎衰竭具有重要意義。腦腸膚是由28?jìng)€(gè)氨基酸殘基組成的胃腸激素,主要由胃底黏膜的泌酸腺X/A樣細(xì)胞合成并分泌。腦腸化作為促生長(zhǎng)激素釋放激素內(nèi)源性配體,能明顯促進(jìn)生長(zhǎng)激素的分泌,并具有調(diào)控能量代謝及胃腸功能的作用。近年來(lái)大量的研究表明腦腸化還具有減輕炎癥反應(yīng)和抗纖維化的作用。腦腸膚在多種類(lèi)型的動(dòng)物纖維化模型和體外實(shí)驗(yàn)中均能發(fā)揮較強(qiáng)的抗纖維化作用。在腎臟缺血再灌
5、注模型中,腦腸膚能減輕炎癥反應(yīng),減少細(xì)胞調(diào)亡,改善腎臟功能,但腦腸膚在腎臟纖維化模型中的作用機(jī)制尚不明確。I摘要目的:觀察腦腸膚對(duì)單側(cè)輸尿管結(jié)扎(Unilateralureteralobstruction,UUO)大鼠腎間質(zhì)纖維化動(dòng)物模型RIF及相關(guān)纖維化因子表達(dá)的影響;進(jìn)而探討腦腸狀抗腎臟纖維化的作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)方法:1、實(shí)驗(yàn)分組及模型制作將雄性SD大鼠(40只)隨機(jī)分為4組:假手術(shù)組(Sham+Vehicle),假手術(shù)組+腦腸膚治療組(Sham+Gh
6、relin),模型組(UUO+Vehicle),腦腸膚治療組(UUO+Ghrelin)。模型組及腦腸膚治巧組行左側(cè)輸尿管結(jié)扎制成大鼠UUO。模型而假手術(shù)組大鼠僅分離左側(cè)輸尿管,不進(jìn)行結(jié)扎,麻醉及其余手術(shù)步驟與模型組相同。術(shù)后14天處死大鼠,收集腎臟標(biāo)本進(jìn)行相應(yīng)實(shí)驗(yàn)指標(biāo)檢測(cè)。2、Masson染色按常規(guī)方法行Masson染色。?。停幔螅螅铮钊旧衅?,每例切片高倍鏡下(。00)觀察10個(gè)互不重疊腎小管間質(zhì)視野,巧光思微鏡下觀察、拍照、分析。3、腎臟組織石蠟切片制作大鼠麻醉后,
7、分別用生理鹽水和4%多聚甲酸溶液經(jīng)也臟灌注。梗阻側(cè)腎臟組織,于4%多聚甲酸溶液中浸泡24小時(shí)后,按照常規(guī)石蠟包埋法制成石蠟1111、。標(biāo)本并切片,切片厚度為3[,攜片風(fēng)干后備用4、免疫組化組織切片經(jīng)脫蠟、水化,在驚樣酸緩沖液(0.01mol/L)中給予微波熱修復(fù)30m一in。適度冷卻后依次給予0.3%過(guò)氧化氨溶液、山羊血清、抗、生物素化二抗和辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液封閉和解育。DAB顯色液顯色,中性樹(shù)膠封片后在顯微鏡下觀察并拍照。5、免疫巧光II碩壬學(xué)位論文
8、ris-EDTAL(PH8.5)或恃樣酸緩沖液O.Olmol/)石蠟切片脫蠟至水,在T(‘一血清封閉后滴加4C12-24hPBS中給予微波熱修復(fù),抗,賠育,溶液洗涂后滴二抗‘化C解。焚光顯、、。加相應(yīng)巧光,巧育微鏡下觀察拍照分析6、WesternBlot方法檢測(cè)蛋白表達(dá)變化lOOm用。姐織標(biāo)大鼠麻醉后處死,取梗阻側(cè)腎臟組織約g,液氮中保存?zhèn)?、、OOOrm5Omin本?jīng)勻漿裂解