水稻閉花授粉突變體fod的突變基因克隆與功能分析

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4、磚巧分類號(hào)Ｑ９４碩±學(xué)位論文７ｋ瑤巧花描扮變變化化ｄ的奕變基因巧隆與巧能分折指導(dǎo)獅巧名、巧蘇易可可研巧員串請(qǐng)學(xué)位級(jí)別＿Ｍ±學(xué)科專業(yè)植物挙培鱗位浙江Ｗ大學(xué)與浙江?。粚W(xué)院齡培養(yǎng)論文提交的巧間２０巧年３月論義笞雜時(shí)間２０巧年Ｓ月１９日學(xué)位妍單位與曰期辦委員會(huì)主巧周波論文評(píng)巧人２０１５年５月１９日ＤｉｓｓｅｒｔａｉｏｎｆｏｒＭａｓｔｅｒｃｏｕｒｓｅＣｌｏｎｉｎｇａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆａｃｌｅｉｓｔｏｇａｍｙｍｕｔａｎｔｉｎｒｉｃｅＯｒｚａ

5、ｓａｔｉｖａ｛ｙ）Ｃａｎ化ｄａ化：ＸｙｕａｎＷｅｉＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：ＫｅｋｅＹｉＤｉｓｄｐｌｉｎｅ：ＢｏｔａｎｙＣｏｌｌｅｅｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒ＆ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｇｙ，ＺｈｅｉａｎＮｏｒｍａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔＪｉｎｈｕａ３２１００４，Ｚｈｅｉａｎｊｇｙ，ｊｇ水稻閉花授獄突變體／０ｄ的突變基因克隆與功能分析摘要水稻閉花授粉突變體的挖掘有利于水稻穎花開放和閉合的研究，對(duì)培育閉花授粉且不影響農(nóng)藝性狀，有效抑制轉(zhuǎn)基因引起的基因漂流的水稻新品種具有重要意義。本研究利用ＥＭ

6、Ｓ誘變處理賴箱品種秀水０９（ＸＳ０９）獲得性狀穩(wěn)定遺傳的閉花授粉突變體／ｏＡ對(duì)突變體／ｏｄ表型觀察發(fā)現(xiàn)，其農(nóng)藝學(xué)性狀相對(duì)于野生型植株ＸＳ０９發(fā)生了較大變化，植株更加矮小，成熟種子更加短粗。突變體／〇＾／花器官均發(fā)育良好，且漿片在開花時(shí)能正常膨大。通過(guò)漿片的顯微觀察，發(fā)現(xiàn)／ｏｄ漿片與外釋間的間隙比ＸＳ０９大，推測(cè)這可能是造成／〇＾／閉穎的原因。利用圖位克隆將／ｏｔ／突變位點(diǎn)定位于第７號(hào)染色體的２９６ｋｂ區(qū)間內(nèi)。測(cè)序結(jié)果發(fā)現(xiàn)突變基因Ｑｓ／ｏｄ為ＬＯＣＯｓ０７ｇ４２４１０，該基因開放閱讀框（ＯＲＦ）上第１９９０＿６９處發(fā)

7、生點(diǎn)突變，提前終止翻譯。轉(zhuǎn)基因回復(fù)實(shí)驗(yàn)證明突變表型是由０分〇（／突變?cè)斐傻?。通過(guò)ＧＵＳ染色發(fā)現(xiàn)化／ｏｄ基因主要在根系的分生區(qū)，側(cè)根原基和幼葉中表達(dá)，在穎花將要開放前，開花過(guò)程中和剛揚(yáng)粉后的漿片和花絲中均有表達(dá)。利用煙草和原生質(zhì)體瞬時(shí)表達(dá)體系發(fā)現(xiàn)Ｏｓｆｏｄ蛋白的定位于細(xì)胞質(zhì)膜、細(xì)胞核和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。研究發(fā)現(xiàn)閉花授粉突變體／ｏｒｆ對(duì)外源油菜素內(nèi)酷敏感性降低，表現(xiàn)為突變體葉夾角在油菜素內(nèi)醋處理后明顯小于野生型；不同濃度油菜素內(nèi)醋對(duì)突變體的根。長(zhǎng)抑制程度顯著低于野生型，而突變體沒(méi)有；在黑暗培養(yǎng)下野生型的中胚軸伸長(zhǎng)對(duì)Ｂ民相關(guān)基因的

8、定量分析顯示０如《／是ＢＲ生物合成和信號(hào)通路反饋抑制所必需的，該基因在ＢＲ信號(hào)通路中起正調(diào)控作用。關(guān)鍵詞；水稻；閑花授粉；油菜素