油茶皂苷b抗腫瘤作用及其機制研究

油茶皂苷b抗腫瘤作用及其機制研究

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1、ItMKSOOCHOWUNIVERSITY碩士學位論文論文題目油茶皂苷B抗腫瘤作用及其機制研兗研究生姓名楊萍指導教師姓名許瓊明、劉艷麗、楊世林專業(yè)名稱藥物化學研究方向天然藥物的活性研究論文提交日期2015年5月蘇州大學學位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所提交的學位論文是本人在導師的指導下,獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經注明引用的內容外,本論文不含其他個人或集體己經發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不含為獲得蘇州大學或其它教育機構的學位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體,均已在文中以明確方式標明。本人

2、承擔本聲明的法律責任。論文作者簽名:曰期:H蘇州大學學位論文使用授權聲明本人完全了解蘇州大學關于收集、保存和使用學位論文的規(guī)定,即:學位論文著作權歸屬蘇州大學。本學位論文電子文檔的內容和紙質論文的內容相一致。蘇州大學有權向國家圖書館、中國社科院文獻信息情報中心、中國科學技術信息研究所(含萬方數(shù)據(jù)電子出版社)、中國學術期刊(光盤版)電子雜志社送交本學位論文的復印件和電子文檔,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或其他復制手段保存和匯編學位論文,可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索。涉密論文口本學位論文屬

3、在_____年_月解密后適用本規(guī)定。非涉密論文H論文作者簽名:和哼日期:Z油茶皂苷B抗腫瘤作用及其機制研究中文摘要油茶皂苷B抗腫瘤作用及其機制研究中文摘要目的:油茶皂苷B是從油茶根中提取、分離的三萜皂苷單體,前期研究發(fā)現(xiàn)有抗腫瘤作用,但其抗腫瘤作用機制還不清楚。因此,本研究采用體內外抗腫瘤實驗方法來探討油茶皂苷B的抗腫瘤作用和機制。方法:在體外,采用MTT法檢測油茶皂苷B對腫瘤細胞增殖的影響;采用吉姆薩染色法觀察細胞形態(tài)變化;Hoechst33342染色法觀察細胞凋亡形態(tài);AnnexinV-FITC/PI雙染分析法檢測腫

4、瘤細胞的凋亡率;采用細胞周期法檢測油茶皂苷B對腫瘤細胞周期的影響;同時還采用了MDC染色、MDC熒光強度、透射電鏡以及ROS活性氧測試等實驗方法來探討油茶皂苷B誘導腫瘤細胞自噬;用Westernblot方法分析油茶皂苷B對caspase3、Bcl-2、LC3、P53蛋白表達的影響;體內,采用小鼠H22實體瘤模型探討油茶皂苷B在體內的抗腫瘤作用。結果:MTT法結果顯示,油茶皂苷B可呈時間和劑量依賴關系抑制SMMC-7721人肝癌細胞和MCF-7人乳腺癌細胞的增殖;吉姆薩染色結果提示油茶皂苷B給藥組細胞形態(tài)皺縮,變圓,染色加

5、深,細胞核濃縮;Hoechst33342染色觀察到隨著油茶皂苷B劑量的升高,細胞凋亡的數(shù)目變多;同時,AnnexinV-FITC/PI雙染結果提示油茶皂苷B可誘導人肝癌細胞SMMC-7721和人乳腺癌細胞MCF-7發(fā)生凋亡,油茶皂苷B給藥組誘導SMMC-7721和MCF-7細胞早期凋亡率和晚期凋亡率明顯增加;通過對細胞周期的分析,油茶皂苷B誘導SMMC-7721細胞周期阻滯在G2/M期,呈劑量依賴性增加。MDC熒光染色和透射電鏡結果分析可知,油茶皂苷B可誘導腫瘤細胞自噬,胞漿內自噬泡明顯增加;ROS實驗結果分析可知,油茶

6、皂苷B可誘導腫瘤細胞內ROS的釋放;為了驗證油茶皂苷B誘導的自噬與誘導的凋亡之間的關系,通過AnnexinV-FITC/PI分析結果可知,自噬抑制劑氯喹可抑制油茶皂苷B誘導的SMMC-7721和MCF-7腫瘤細胞凋亡,主要是影響早期凋亡的細胞數(shù);Westernblotting結果表明,油茶皂苷B下調Bcl-2和上調Caspase3、p53與LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,均I中文摘要油茶皂苷B抗腫瘤作用及其機制研究呈現(xiàn)出劑量依賴關系;油茶皂苷B能抑制或顯著性抑制H22移植瘤生長(P<0.05),且抑制率與劑量呈正相關,0.5

7、mg/kg抑制率為37.255%;1.0mg/kg抑制率為46.249%,但高劑量表現(xiàn)出一定的毒性。結論:油茶皂苷B可誘導SMMC-7721細胞和MCF-7細胞凋亡與自噬,其機制通過調節(jié)p53蛋白表達和活性氧的釋放。關鍵詞:油茶皂苷B;抗腫瘤;自噬;凋亡作者:楊萍指導老師:許瓊明教授劉艷麗副教授IIThestudyonanti-tumoreffectsandmechamismsofsasanquasaponinBAbstractThestudyonanti-tumoreffectsandmechamismsofsasan

8、quasaponinBAbstractObject:SasanquasaponinBisatriterpenesapaoninsextractedfromtherootsofCamelliaoleiferaAbel.StudieshaveindicatedthatsasanquasaponinBhadtheanti-

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