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《維吾爾族iga腎病尿液糖基化蛋白質(zhì)組學(xué)的觀察研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號：密級：學(xué)號：2012409034單位代碼：10759石河子大學(xué)磧士f像鉿弍維吾爾族IgA腎病尿液糖基化蛋白質(zhì)組學(xué)的觀察研究學(xué)位申請人石紅霞指導(dǎo)教師陸晨教授中請學(xué)位類別臨床醫(yī)學(xué)碩士專業(yè)名稱臨床醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域內(nèi)科學(xué)所在學(xué)院醫(yī)學(xué)院中囯?新疆?石河子2015年6月分類號：密級：學(xué)號：2012409034單位代碼：10759石河子大學(xué)碩士學(xué)位論文維吾爾族IgA腎病尿液糖基化蛋白質(zhì)組學(xué)的觀察研究學(xué)位申請人石紅霞指導(dǎo)教師陸晨教授申請學(xué)位類別臨床醫(yī)學(xué)碩士專業(yè)名稱臨床醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域內(nèi)科學(xué)所在學(xué)院醫(yī)學(xué)院中國·新疆·石河子2015年6月Observationalstudyonuri
2、neglycosylatedproteomicsinimmunoglobulinAnephropathywithUyghurnationalityADissertationSubmittedtoShiheziUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMedicineMasterByHong-xiaShi(InternalMedicine)DissertationSupervisor:Prof.LuChenJune,2015石河子大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)聲明學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人
3、所呈交的學(xué)位論文是在我導(dǎo)師的指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含其他個人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中作了明確的說明并表示謝意。研究生簽名:時間:年6月”使用授權(quán)聲明本人完全了解石河子大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并向國家主管部門或指定機(jī)構(gòu)送交論文的電子版和紙質(zhì)版。有權(quán)將學(xué)位論文在學(xué)校圖書館保存并允許被查閱。有權(quán)自行或許可他人將學(xué)位論文編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫提供檢索服務(wù)。有權(quán)將學(xué)位論文的標(biāo)題和摘要匯編出版。保密的學(xué)位論文在解密后適用本規(guī)定。研究生簽名:
4、月，曰導(dǎo)師簽名：月；曰摘要目的：研究初次診斷為維吾爾族IgA腎病的尿液糖基化蛋白質(zhì)質(zhì)譜特點(diǎn)，并與維吾爾族健康人尿液糖基化蛋白質(zhì)譜進(jìn)行對比，觀察維吾爾族IgA腎病中差異表達(dá)的蛋白質(zhì)，探討液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)對該疾病的臨床診斷價值。方法：選擇2013年12月至2014年8月期間經(jīng)腎活檢診斷為原發(fā)性IgA腎病的維吾爾族患者20例及同期體檢的健康人10例，留取清晨空腹清潔中段尿標(biāo)本，并立即加入鹽酸防腐。為避免細(xì)菌污染和蛋白酶解于2小時內(nèi)在4℃下以4000g×10min離心去除細(xì)胞碎片及相關(guān)成分，留取上清液，置于-80℃冰箱保存?zhèn)溆?。隨后取出30份尿標(biāo)本，待常溫下完全溶解后，按照標(biāo)
5、本體積：丙酮體積為3：1的比例迅速加入-20℃預(yù)冷丙酮進(jìn)行蛋白沉淀，將樣品再次以4℃14000g×30min離心沉淀，丟棄上清液，將含尿液蛋白質(zhì)的沉淀物真空干燥濃縮并存于-80℃中待用。將真空干燥后的尿蛋白沉淀物用PBS溶液充分溶解后，用Bradford法測定每份樣品中尿蛋白濃度。應(yīng)用肼化學(xué)富集糖蛋白后PNGaseF去糖鏈酶切，真空離心干燥后進(jìn)行二維液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)對樣品進(jìn)行系統(tǒng)分析。所獲得的蛋白質(zhì)多肽序列結(jié)果應(yīng)用Mascot軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)檢索，將獲得的尿蛋白序列號在Uniprot數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行檢索，查詢所表達(dá)的蛋白質(zhì)名稱、分子質(zhì)量、細(xì)胞學(xué)定位、等電點(diǎn)等相關(guān)信息。
6、結(jié)果：1．10份維吾爾族健康人的尿液標(biāo)本中共鑒定出121種糖蛋白，經(jīng)驗證后，所有健康人的尿液標(biāo)本共同表達(dá)23種蛋白質(zhì)。2.20份維吾爾族IgA腎病患者的尿液標(biāo)本中共鑒定出218種糖蛋白，所有標(biāo)本共同表達(dá)17種蛋白質(zhì)，與健康人尿液表達(dá)的蛋白質(zhì)進(jìn)行分析比較，在IgA腎病中特異性表達(dá)6種蛋白，它們分別是：α-1抗胰蛋白酶、銅藍(lán)蛋白、血清轉(zhuǎn)鐵蛋白、維生素D結(jié)合蛋白、α1-微球蛋白、α淀粉酶1。結(jié)論：本實驗利用二維液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)研究了維吾爾族IgA腎病患者的尿液糖基化蛋白質(zhì)譜特點(diǎn)，成功獲得了該疾病的多肽序列質(zhì)譜圖，共得到218種糖蛋白。其中α-1抗胰蛋白酶、銅藍(lán)蛋白、
7、血清轉(zhuǎn)鐵蛋白、維生素D結(jié)合蛋白、α1-微球蛋白、α淀粉酶1，這6種蛋白可能成為維吾爾族lgA腎病的診斷標(biāo)志物。關(guān)鍵詞：維吾爾族，IgA腎病，糖蛋白質(zhì)組學(xué)，液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)IAbstractObjective:ToresearchurineglycosylatedproteomicsspectrumcharacteristicsininitialdiagnosispatientsofprimaryimmunoglobulinAnephropathywithUyghurnationality,andcomparewiththehealthypeople.Inorderto
8、obser
