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《綠色裸小鼠中綠色熒光蛋白熒光示蹤作用研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、SOOCHOWUNIVERSITY碩士專業(yè)學位論文論文題目綠色裸小鼠中綠色熒光蛋白熒光示蹤作用研究研究生姓名芮琴指導教師姓名王愛東黃強專業(yè)名稱臨床檢驗診斷學研究方向分子生物學檢驗論文提交日期2015年5月蘇州大學學位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學位論文是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經注明引用的內容外，本論文不含其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫過的研究成果9也不含為獲得蘇州大學或其它教育機構的學位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以
2、明確方式標明。本人承擔本聲明的法律責任。蘇州大學學位論文使用授權聲明本人完全了解蘇州大學關于收集、保存和使用學位論文的規(guī)定，即：學位論文著作權歸屬蘇州大學。本學位論文電子文檔的內容和紙質論文的內容相一致。蘇州大學有權向國家圖書館、中國社科院文獻信息情報中心、中國科學技術信息研究所（含萬方數(shù)據(jù)電子出版社)、中國學術期刊（光盤版）電子雜志社送交本學位論文的復印件和電子文檔，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存和匯編學位論文，可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索。涉
3、密論文口本學位論文屬在_____年_月解密后適用本規(guī)定。非涉密論文爐論文作者簽名;導師簽名S綠色裸小鼠中綠色熒光蛋白熒光示蹤作用研究中文摘要綠色裸小鼠中綠色熒光蛋白熒光示蹤作用研究中文摘要第一部分“綠色裸小鼠”腦組織中綠色熒光蛋白表達分析【目的】分析綠色熒光裸小鼠腦組織中綠色熒光蛋白(EGFP)的表達情況，為綠色裸小鼠的腦內移植應用提供依據(jù)?！痉椒ā坎捎冒攵縍T-PCR分析綠色裸小鼠不同臟器組織/細胞和腦不同部位組織中EGFPmRNA表達水平；通過熒光顯微鏡觀察全身主要器官組織和全腦不同層面組織
4、中綠色熒光強度；用熒光定量PCR和熒光分光光度計定量分析、免疫組化定性觀察鼠腦不同部位組織中EGFP的表達；在綠色裸小鼠顱內接種表達紅色熒光蛋白（RFP）的人膠質瘤干祖細胞SU3-RFP，動物活體成像及熒光顯微鏡觀察小鼠活體腦和腦組織中腫瘤形成情況。【結果】RT-PCR結果顯示，綠色裸小鼠各臟器組織和腦組織不同部位都不同程度表達EGFP；熒光顯微鏡下觀察到腦組織不同層面都能顯示綠色熒光，且呈現(xiàn)部位差異；qPCR和熒光分光光度計定量分析表明，與大腦皮質相比，小腦皮層、海馬和嗅球等組織EGFP表達較高
5、，差異具有顯著性（p<0.05）；免疫組化結果顯示，小腦皮層、海馬等部位存在強陽性表達EGFP的細胞；腫瘤細胞接種至綠色裸小鼠顱內后，小動物活體成像儀和熒光顯微鏡下可見綠色腦組織背景下紅色熒光的腫瘤形成，表明成功建立了腦內紅綠雙色熒光示蹤移植瘤模型。【結論】綠色熒光裸小鼠腦組織中不同程度表達EGFP，而非陰性表達，其中小腦皮層、海馬和嗅球等部位表達較高。同其它高表達EGFP的臟器一樣，腦也適合做人癌移植熒光示蹤實驗研究?！娟P鍵詞】綠色裸小鼠；綠色熒光蛋白；基因表達I中文摘要綠色裸小鼠中綠色熒光蛋白
6、熒光示蹤作用研究第二部分雙色熒光示蹤移植瘤模型中骨髓來源宿主細胞惡性轉化初步研究【目的】利用紅綠雙色熒光示蹤移植瘤模型，探討腫瘤微環(huán)境中來源于宿主骨髓的間質細胞的惡性轉化問題。【方法】在綠色熒光示蹤骨髓重建模型基礎上，顱內接種表達RFP膠質瘤干祖細胞SU-RFP，建立紅綠雙色熒光示蹤移植瘤模型。分離移植瘤組織進行體外培養(yǎng)，對可連續(xù)傳代的發(fā)綠色熒光細胞進行單克隆培養(yǎng)（命名為ihBTCBM），并對細胞生物學特征進行分析：CCK-8法繪制細胞增殖曲線，常規(guī)方法進行染色體核型分析；將細胞接種至裸小鼠皮下觀
7、察細胞致瘤性；采用免疫熒光方法檢測細胞中骨髓間充質干細胞標準物Sca-1、CD29、CD44表達情況?！窘Y果】ihBTCBM細胞體外培養(yǎng)呈現(xiàn)出惡性細胞表型，細胞增殖旺盛，染色體為異倍體，皮下接種裸小鼠致瘤率為100%（6/6）；免疫熒光檢測結果顯示細胞表達骨髓間充質干細胞標準物Sca-1、CD29和CD44?！窘Y論】在EGFP熒光示蹤下，從雙色熒光示蹤移植瘤組織中分離出宿主骨髓來源、可連續(xù)傳代的細胞，該細胞可能是骨髓間充質干細胞的惡性轉化的細胞?！娟P鍵詞】間質細胞；惡性轉化；熒光示蹤作者：芮琴指導
8、老師：王愛東主任技師IIStudyonfluorescenttracingrolesofGFPingreennudemiceAbstractsStudyonFluorescentTracingRolesofGFPinGreenNudeMiceAbstractsPartITheexpressionofEGFPinthebraintissuesof"greennudemice"【Objective】Toanalyzetheexpressionlevelsofenhancedgreenf
