蛋白激酶c在小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化中的作用研究

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1、單位代碼：１０４７２學(xué)術(shù)學(xué)位囚專業(yè)學(xué)位口學(xué)號(hào)：１２１７００１中圖分類號(hào)：Ｑ２密級(jí)：公開(kāi)知解｜‘多ｉ碩：ｔ學(xué)位論文蛋白激酶Ｃ在小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化中的作用研究ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎＫｉｎａｓｅＣｏｎＯｓ化ｏｂｌａｓｔＤｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＭｏｕｓｅＢｏｎｅＭａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌＳｔｅｍＣｅ化作者姓名：崔陽(yáng)陽(yáng)導(dǎo)師姓名：豐慧根教授馮志偉教授學(xué)科口類；理學(xué)專業(yè)名稱：生物學(xué)培養(yǎng)院系；生

2、命科學(xué)技術(shù)學(xué)院—完成時(shí)間：二〇五年蘭月ＥｆｆｅｃｔｓｏｆＰｒｏｔｅｉｎＫｉｎａｓｅＣｏｎＯｓｔｅｏｂｌａｓｔＤ－ｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＭｏｕｓｅＢｏｎｅＭａｒｒｏｗｄｅｒｉｖｅｄＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌＳｔｅｍＣｅ化Ａ了ｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄｆｏｒｔｈｅＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒＣａｎｄｉｄａｔｅ：ＣｕｉＹａｎａｎｇｙｇＳｕｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＦｅｎＨｕｉｅｎｐｇｇＰｒｏｆ．ＦｅｎｇＺｈｉｗｅｉＣｏｌ

3、ｌｅｇｅｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＸｉｎｘｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的研究成果。除了文中特別加Ｗ標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的成果作品。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中Ｗ明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。作者簽名：日期：＞〇ｒ年ｉｒ月ｊ：ｋ）日｜學(xué)位論文版

4、權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院可Ｗ將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可Ｗ采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于＂’（請(qǐng)?jiān)冢紫孪鄳?yīng)方框內(nèi)打?。海崳姡保Ｃ堋酰谀杲饷芎筮m用本授權(quán)書(shū)。２．不保密囚。作者簽名：Ｐ０日期女年月：日捧戶｛導(dǎo)師簽名：日期｜臺(tái)：扣；年Ｖ月如日手目錄摘要１Ａｂ

5、ｓｔｒａｃｔ３刖胃５機(jī)６；炬巧１１淵１９２６結(jié)３０參考：＾獻(xiàn)３１綜述３７附錄４８攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況４９麵５０個(gè)人簡(jiǎn)Ｍ５１新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院碩±學(xué)位論文窒白激酶Ｃ在小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化中的作巧研究摘要背景一個(gè)復(fù)雜的調(diào)控過(guò)程細(xì)胞的成骨分化是，涉及很多信號(hào)通路的參與。蛋白激酶一ＣｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅＣＰＫＣ為細(xì)胞信號(hào)通路中種重要的激酶，可調(diào)節(jié)細(xì)胞的代謝、（ｐ，）生長(zhǎng)、增殖和分化等多個(gè)生理活動(dòng)。

6、多項(xiàng)研究表明ＰＫＣ與細(xì)胞的成骨分化過(guò)程密。ｂｏｎｅｍａ－ｍａｔｅｍ切相關(guān)但其是巧在小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（ｒｒｏｗｄｅｒｉｖｅｄｍｅｓｅｎｃｈｙｌｓｃｅｌｌｓ，ＳＭＳＣｓ）的成骨分化過(guò)程中起作用Ｗ及起到什么作用，則很少有人研究。目的本研究旨在探討不同亞型的ＰＫＣ分子在小鼠ＢＭＳＣｓ成骨分化中所起的作用，Ｗ期可Ｗ為骨質(zhì)疏松癥、骨腫瘤及骨損傷等臨床疾病提供新的治療粗點(diǎn)。方法－１．ＢＭＳＣｓ的成骨誘導(dǎo)：將８０９０％融合度的第３代ＢＭＳＣｓ進(jìn)行鋪板，添加終濃度為５０心１－二鋼１

7、００ｎＭ的地塞米松、ｎＭ的抗壞血酸和０ｍＭ的Ｐ憐酸甘油的成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基進(jìn)行不同時(shí)間段的誘導(dǎo)，使ＢＭＳＣｓ在體外向成骨細(xì)胞分化；２．Ｗｅｓｔｅｒｎ印跡檢測(cè)ＢＭＳＣｓ成骨誘導(dǎo)中不同ＰＫＣ亞型的活化情況并確定ＰＫＣ阻斷劑ＧＦ１０９２０３ＸＧＦＸ的最適作用濃度（）；３ＰＣ民ｔｔ－ｔ．采用茜素紅染色、實(shí)時(shí)巧光定量ｕａｎｔｉａｉｖｅｒｅａｌｉｍｅＰＣ民Ｃ（ｑ，巧巧及堿性憐酸酶活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)等多種手段檢測(cè)ＢＭＳＣｓ的成骨分化情況，并借此確定那個(gè)（些）亞型的ＰＫＣ分子參與了對(duì)ＢＭＳＣｓ成骨

8、分化的調(diào)節(jié)。結(jié)果１．Ｗｅｓｔｅｒｎ印跡結(jié)果顯示小鼠ＢＭＳＣｓ成骨誘導(dǎo)過(guò)程中ＰＫＣｐＩＩ、ＰＫＣＳ、ＰＫ邱、ＰＫＣＡ均有顯著的活化，而ＰＫＣｃｕＰＫＣ０則沒(méi)有明顯的活化Ｃ；２ＰＫＣＦＸ的．Ｗｅｓｔｅｒｎ印跡結(jié)果顯示阻斷劑Ｇ最適工作濃度為３該濃度下的ＧＦＸ可明顯阻斷ＢＭＳＣｓ成骨誘導(dǎo)中ＰＫＣｐＩＩ的活化；３．茜素紅染色、ｑＰＣ艮及堿性磯酸酶活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)均提示ＰＫ邱ＩＩ