蠟梅小gtp結(jié)合蛋白基因cprac1的克隆及功能初步驗證

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1、單位代碼１０６３５學(xué)號１１２０１２３２５００１７９４碩士學(xué)位論文蠟梅?。牵裕薪Y(jié)合蛋白基因ＣｐＲＡＣｌ的克隆及功能初步驗證論文作者：門維停指導(dǎo)教師：眭順照教授李名揚教授學(xué)科專業(yè)：風(fēng)景園林學(xué)研究方向：園林植物資源與培育提交論文日期：２０１５年５月２０日論文答辯日期１５年５月２８曰：２０學(xué)位授予單位：西南大學(xué)Ｖ■＞Ｔ‘中國？重慶？２０１５年０５月、獨創(chuàng)性聲明學(xué)位論文題目：錯梅?。牵裕薪Y(jié)合蛋白基因似ａ的克降及功能初步驗證本人提交的學(xué)位論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得

2、的研究成果。論文中引用他人已經(jīng)發(fā)表或出版過的研究成果，文中已加了特別標注。對本研究及學(xué)位論文撰寫曾做出貢獻的老師、朋友、同仁在文中作了明確說明并表示衷心感謝。＂二Ｃ學(xué)位論文作者：簽字日期：么年月日ｔ／ｉ］約Ｊ學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解西南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)西南大學(xué)研究生院（籌）可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以釆用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。（保密的學(xué)位論文在解

3、密后適用本授權(quán)書，本論文：Ｅｆ不保密，口保密期限至年月止）。Ｚ學(xué)位論文作者簽名：導(dǎo)師簽名：丨簽字日期：石Ｏｉ年月２日簽字曰期：／ｒ年＾月么日ｌ＃Ｊ６目錄股ｉ■胃ＩＡｂｓｔｒａｃｔＩｌｌ一１第章文獻綜述１．１１錯梅研究進展１．１．１形態(tài)與分布１１．１．２種屬關(guān)系與品種分類１１．１．３蠟梅的幵發(fā)和應(yīng)用２１．１．４分子生物學(xué)在蠟梅研究中的應(yīng)用３１．２ＧＴＰ３小結(jié)合蛋白概述．１ＧＴＰ結(jié)合蛋白１．２３１．２．２小ＧＴＰ結(jié)合蛋白４．Ｐ１．２３?。牵越Y(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)和作用機制４

4、１．２．４小ＧＴＰ蛋白的分類和生物學(xué)功能５１．３Ｒａｃ／Ｒｏｐ蛋白概述６１．３．１Ｒａｃ／Ｒｏｐ蛋白的發(fā)現(xiàn)６１３２ＲａｃＲ７．．／ｏｐ蛋白的結(jié)構(gòu)特點和分類．Ｒａ理１３．３ｃ／Ｒｏｐ蛋白的作用機８１．３．４Ｒａｃ／Ｒｏ蛋白的生物學(xué)功能９ｐ第二章引言１５２．１研究背景１５２．２研究Ｈ的、內(nèi)容及意義１５．１５２３研究技術(shù)路線第三章蠟梅小ＧＴＰ結(jié)合蛋白基因ＣｐＭＣＩ的克隆和分子特征分析１７３．１實驗材料１７３１．１ＤＮＡ１７．錯梅ｃ文庫及植物材料３．１．２菌株與載體１７３１．３７

5、．主要試劑及試劑盒１．．３１４主要儀器設(shè)備１７３．１．５自配的主要試劑１８３２１８．實驗方法．ＳＴ３．２１Ｅ序列特征分析及目標克隆子的鑒定１８ｉ西南大學(xué)碩士學(xué)位論文３．２．２蠟梅ＣｐＲＡＣｌ基因ｃＤＮＡ序列的獲得１９３．２．３蠟梅ＣｐＲＡＣｌ基因的生物信息學(xué)分析２２３．３結(jié)果與分析２２３．３．１蠟ｃＤＮＡ的獲得及其序列特征梅ＣｐＲＡＣｌ基因２２３．３．２蠟梅ＣｐＲＡＣｌ基因編碼蛋白的基本特征預(yù)測分析２４３．３．３蠟梅ＣｐＲＡＣｌ基因編碼蛋白的同源性分析２５３．３．４蠟梅ＣｐＲＡａ基因編碼蛋白的

6、聚類分析２６３．３．５婚梅ＣｐＲＡＣｌ蛋白與擬南芥ＲＡＣ蛋白的聚類分析與多重序列比對．．．．．２８３，４討論２９第四章蠟梅基因的表達特性分析３１４１．實驗材料３１４．２實驗方法３１４．２．１錯梅不同組織、不同時期及不同脅迫處理材料的采集３１４２２總ＲＮＡ的提ＤＮＡ第一３２．．取及ｃ鏈的獲得４．２．３ＣｐＲＡＣｌ基因表達特性的實時焚光定量分析３２４．３結(jié)果與分析３４４．３．１蠟梅總ＲＮＡ提?。墸常矗崳姡矗常玻牐茫穑遥粒茫旎虻谋磉_特性分析３４４．４討論４０第五章蠟梅Ｃｐ見４Ｃ７基因表達

7、載體的構(gòu)建及擬南芥遺傳轉(zhuǎn)化研究４１５．１實驗材料４１５．１．１植物材料４１５．１．２載體及菌株４１５．１．３試劑盒及主要試劑４１５．１．４自配的主要試劑４１５．２實驗方法４２５．２．１蠟梅ＣｐＲＡａ基因植物超表達載體的構(gòu)建４２５．２．２農(nóng)桿菌ＥＨＡ１０５凍融法感受態(tài)的制備４４５．２．３凍融法轉(zhuǎn)化農(nóng)桿菌ＥＨＡ１０５感受態(tài)細胞４４５．２．４農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化子的ＰＣＲ鑒定及反轉(zhuǎn)化大腸桿菌鑒定４４５．５．２花序侵染法轉(zhuǎn)化擬南芥４５５．２．６轉(zhuǎn)基因擬南芥的蹄選鑒定４６５７．２．轉(zhuǎn)基因擬南芥的表型觀察