對(duì)a431細(xì)胞經(jīng)典自噬水平的初步研究

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1、SOOCHOWUNIVERSITY碩士專(zhuān)業(yè)學(xué)位論文研究生姓名_________________張?jiān)浦笇?dǎo)教師姓名_________________座_^______專(zhuān)業(yè)名稱(chēng)__________皮膚病與性病學(xué)研究方向____________光相關(guān)皮膚病論文提交日期______________2015年5月蘇州大學(xué)學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不含其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果,也不含為獲得蘇州大學(xué)或其他教

2、育機(jī)構(gòu)的學(xué)位證書(shū)而使用過(guò)的材料。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)體和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。論文作者簽名:JkL日期:M?丄學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人完全了解蘇州大學(xué)關(guān)于收集、保存和使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)位論文著作權(quán)歸屬蘇州大學(xué)。本學(xué)位論文電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容一致。蘇州大學(xué)有權(quán)向國(guó)家圖書(shū)館、中國(guó)社科院文獻(xiàn)信息情報(bào)中心、中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所(含萬(wàn)方數(shù)據(jù)電子出版社)、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊(光盤(pán)版)電子雜志社送交本學(xué)位論文的復(fù)印件和電子文檔,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印

3、或其他復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文,可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索。涉密論文□本學(xué)位論文屬在_____年_月解密后適用本規(guī)定。非涉密論文□對(duì)A431細(xì)胞經(jīng)典自噬水平的初步研究中文摘要對(duì)A431細(xì)胞經(jīng)典自噬水平的初步研究中文摘要目的:探討經(jīng)典自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素和饑餓處理對(duì)A431細(xì)胞自噬水平的影響。方法分別將A431細(xì)胞和HeLa細(xì)胞設(shè)置為對(duì)照組、DMSO組、20nM雷帕霉素組、80nM雷帕霉素組、EBSS組。免疫印跡法(WesternBlotting)檢測(cè)A431細(xì)胞和HeLa細(xì)胞自噬相關(guān)蛋

4、白LC3A/B、GAPDH、GABARAP的表達(dá)水平。吖啶橙(acridineorange,AO)染色觀察不同處理后A431細(xì)胞、HeLa細(xì)胞自噬體表達(dá)水平。結(jié)果:westernblot結(jié)果顯示HeLa細(xì)胞的對(duì)照組與DMSO組中LC3II/LC3I的比值相一致,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);20nM雷帕霉素、80nM雷帕霉素、EBSS的LC3II/LC3I比值比較對(duì)照組明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。A431細(xì)胞的對(duì)照組與DMSO組中LC3II/LC3I的比值無(wú)明顯變化,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.0

5、5);20nM雷帕霉素、80nM雷帕霉素、EBSS的LC3II/LC3I比值跟對(duì)照組相比明顯升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。通過(guò)SPSS將HeLa、A431細(xì)胞的GABARAP、LC3I和LC3II進(jìn)行雙變量的相關(guān)性分析。結(jié)果顯示HeLa細(xì)胞的LC3I型與GABARAP的pearson相關(guān)性為0.669,說(shuō)明LC3I和GABARAP為正相關(guān)。LC3II型與GABARAP的pearson相關(guān)性為-0.742,說(shuō)明負(fù)相關(guān)。A431細(xì)胞LC3I型與GABARAP的pearson相關(guān)性為0.837,說(shuō)明LC3I

6、和GABARAP為正相關(guān)。LC3II型與GABARAP的pearson相關(guān)性為-0.184,說(shuō)明負(fù)相關(guān)。HeLa細(xì)胞吖啶橙染色后在顯微鏡下觀察,可見(jiàn)雷帕霉素組(33.307%±0.715%)跟對(duì)照組(14.117%±0.295%)相比自噬陽(yáng)性細(xì)胞率明顯增高(P<0.05);EBSS組(66.097%±1.141%)跟對(duì)照組相比,自噬陽(yáng)性細(xì)胞率明顯增高(P<0.05)。A431細(xì)胞雷帕霉素組(23.750%±0.260%)與對(duì)照組(15.987%±0.242%)比較,自噬陽(yáng)性細(xì)胞率明顯增高(P<0.05);EBS

7、S組(32.450%±0.488%)跟對(duì)照組比較,自噬陽(yáng)性細(xì)胞率同樣增高(P<0.05)。結(jié)論:經(jīng)典自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素和饑餓能夠上調(diào)A431細(xì)胞的自噬水平,通過(guò)相關(guān)性分析GABARAP蛋白可能與LC3高度相關(guān)。關(guān)鍵詞:自噬;A431;GABARAP作者:張?jiān)浦笇?dǎo)教師:施辛IAbstract對(duì)A431細(xì)胞經(jīng)典自噬水平的初步研究Theclassicalautophagylevelsofhumansquamouscellcarcinoma(A431):apreliminarystudyAbstractObjectiv

8、e:Toinvestigatetheeffectsofautophagyinducedbytheclassicalinducerofrapamycinandstarvationinhumansquamouscellcarcinoma(A431).Methods:A431andHeLacellswererespectivelyclassifiedinto5groupstoremainun

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