基于微電極農(nóng)藥殘留快速檢測用生物傳感器制備方法研究

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3、ｉ學(xué)位論文評價(jià)數(shù)據(jù)庫》中使用和在互聯(lián)網(wǎng)上傳播，同意按章程規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益。作者簽名：導(dǎo)師簽名．年月皆日年＾月日＿心－生學(xué)號１〇４巧所在院系｜丫ＩＷ。棘ＩＩ旬防霞ＶＩ敲姑矮獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得山東理工大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名：時(shí)間：年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解山東理工大

4、學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢杂貌煌绞皆诓煌襟w上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)研究生簽名：時(shí)間：年月日導(dǎo)師簽名：時(shí)間：年月日山東理工大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要摘要農(nóng)藥大量、不合理使用，對食品安全和人體健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。對農(nóng)藥殘留進(jìn)行現(xiàn)場、快速檢測是監(jiān)控農(nóng)藥合理使用，提高農(nóng)產(chǎn)品安全的有效途徑。傳統(tǒng)的儀器分析方法樣品處理復(fù)雜，儀器需專業(yè)人員維護(hù)，不適于現(xiàn)場快速檢測?；谖㈥嚵须姌O的生物傳感器農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)具有選擇

5、性好、檢測時(shí)間短、靈敏度高、易于微型化等優(yōu)點(diǎn)，是當(dāng)前國內(nèi)外農(nóng)藥殘留快速檢測研究熱點(diǎn)，可實(shí)現(xiàn)農(nóng)產(chǎn)品現(xiàn)場在線檢測。本文將微電極和生物傳感技術(shù)相結(jié)合，制備了基于微電極的生物傳感器。研究了不同修飾材料、修飾方法，對微電極生物傳感器性能的影響，并以電化學(xué)阻抗值為響應(yīng)信號，以毒死蜱為模板農(nóng)藥，構(gòu)建了基于微電極的生物傳感器制備方法，并用于蔬菜實(shí)際樣品中農(nóng)藥殘留的快速檢測。具體研究內(nèi)容和研究成果如下：(1)探索了基于叉指微陣列電極構(gòu)建免疫傳感器用于農(nóng)藥殘留檢測的可行性。通過對抗體在微陣列電極上的固定方法（物理吸附、蛋白A定向固定及對苯二甲硫醇(MTB)/納米金(AuNPs)自組裝和蛋白A協(xié)同

6、定向固定法）進(jìn)行了比較，結(jié)果表明，采用MTB/AuNPs自組裝和蛋白A協(xié)同定向固定法進(jìn)行抗體固定時(shí)，可有效保持抗體的活性及增大抗體固定量，使免疫反應(yīng)結(jié)合效率更高。因此，選用此法構(gòu)建了基于微陣列電極的此免疫傳感器，結(jié)果表明，農(nóng)藥濃度在0.05ng/mL-500ng/mL范圍內(nèi)，基于叉指微陣列電極的免疫傳感器的阻抗差值變化與濃度之間成良好的相關(guān)關(guān)系，回歸方程：ΔR=382.6+84.545lgC(ng/mL)，相關(guān)系數(shù)R2=0.97131，最低檢測限為為：0.017ng/mL。將此傳感器用于生菜、白菜和黃瓜實(shí)際樣品檢測，分別研究了三種樣本中三個(gè)水平的添加回收率，回收率在81.3-

7、99.7%之間。(2)創(chuàng)建了一種基于自組裝技術(shù)和蛋白A定向固定法的免疫傳感器，并結(jié)合微流控芯片技術(shù)，用于農(nóng)藥殘留檢測，實(shí)現(xiàn)了樣品的自動(dòng)進(jìn)樣。采用聚二烯基丙二甲基氯化銨(Polydimethyldiallylammoniumchloride,PDDA)和納米金(GoldNanoparticles,AuNPs)進(jìn)行自組裝，將抗體固定到微流控芯片的微通道上，解決了微流控通道易堵塞的問題。在最佳測試條件下，農(nóng)藥濃度在0.5ng/mL-500ng/mL范圍內(nèi)，基于微流控芯片的免疫傳感器的阻抗差值變化與濃度之間成良