甘藍型油菜線粒體未知基因的克隆與功能分析

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1、‘分類號０９４密級ＵＤＣ論文編號敞化也一ｆ碩±學位論文論文題目：甘藍型油萊線粒體未知基因的克隆與功能分析研究生：范世航■導師；．楊之帆教授華韓研究員．專業(yè)：植物學；研究方向：油菓功能基因組學．２０１５年５月：１０５１２分類號：Ｑ９４學校代號學號；２０１２１１１１０７０００８０２湖北大學碩±學位論文甘藍型油菜線粒體未知基因的克隆與功能分析作者姓名：范世航指導教師姓名、職稱：楊之帆教授華諱研究員申請學位類別：植物學；理學碩±學科專業(yè)名稱研究方向

2、：油菜功能基因姐學論文提交日期；么年＞月知日論文答辯日期：＞解巧務日學位授予單位：湖北大學學位授予日期：年月曰答辯委員會主席；主為ＡＣｌｏｎｉａｎｄＦｕｎｃ枯ｏｎａｌＡｊａａｌｓｉｓｏｆｎｋｏｗｎｎｇｙＵＭｉｔｏｃｈｏｎｄｒｉａＧｅｎｅｓｉｎＢｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓＬ．ＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄｆｏｒｔｈｅＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒＣａｎｄｉｄａｔｅ：Ｆａｎ凱化ａｎｇＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：Ｐｒｏｆ．ＹａｎｇＺｈｉｆａｎＰｒｏｆ．ＨｕａＷｅｉＨｕｂｅｉ

3、ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＷｕｈａｎ，Ｃｈｉｎａ學位論文使用授權(quán)書、本論文作者完全了解學校關(guān)于保存使用學位論文的管理辦法及規(guī)定，巧學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)巧口或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版．本人完全同意《，允許論文被查閱和借閥中國博壬＂＂》、《中國》化乂下簡稱章程學位論文全文數(shù)據(jù)庫出版章程優(yōu)秀碩±學位論文全文數(shù)據(jù)庫出版章程，見ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ），愿意將本人的學位淪文提交中國學術(shù)期刊（光盤版）電子雜志杜在《中國博壬》、學位論文全文數(shù)據(jù)庫、《中國優(yōu)秀碩±學位論文全文數(shù)據(jù)庫》中全文發(fā)表和Ｗ電子網(wǎng)絡及其他數(shù)字媒體形式公開出

4、版，并同意編入州ＫＩ《中國知識資源總庫》，在《中國博碩±學位論文評價數(shù)據(jù)＂＂》，同意按章程規(guī)定享受相關(guān)權(quán)益，庫中使用和在互聯(lián)網(wǎng)上傳播（請作者直接與雜志社聯(lián)系聯(lián)系人：栗老師：通訊地址：；電話郵編：一本授權(quán)書簽署。式蘭份，交湖北大學學位評定委員會辦公室＾：學位論文作者簽名：導師簽名／月Ｖ曰）化心年＞：年＾月＞０湖北大學研究生學位論文作者信息論文題目甘藍型油菜線粒體未知基因的克隆與功能分析姓名范世化學號２０口１１１１０７０００８０２答辯日期２０１５年５月３０曰論文級別博：ｔ□碩擊院生命科學

5、學院?！乐参飳W＾Ｅｍａ聯(lián)系電話作者ｉｌ＿作者通信地址含郵編：（）奮注：注：本論文如需保密，保密級別是，解密時間是＿＿年＿＿月。條密學位論文在解密后適用于本授權(quán)書）甘藍型油菜線粒體未知基因的克隆與功能分析摘要線粒體是植物細胞內(nèi)具有半自主性功能的細胞器，具有自身的ＤＮＡ和蛋白質(zhì)合成體系，是植物的能量供給單位，直接參與脂肪酸的分解代謝，是細胞內(nèi)將有機物氧化產(chǎn)生的能量轉(zhuǎn)化為ＡＴＰ（ＡｄｅｎｏｓｉｎｅＴｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ）的主要場所，而ＡＴＰ又是植株進行其他一切生理生化反應的基礎。研究線粒

6、體基因的功能對于解析生物學過程、揭示線粒體基因參與的代謝通路和作物改良研究具有重大的探索前景。目前甘藍型油菜的線粒體基因組測序工作已經(jīng)完成，發(fā)現(xiàn)其中含有大量功能未知的開放閱讀框餅？Ｆ（ＯｐｅｎＲｅａｄｉｎｇＦｒａｍｅ），對于線粒體未知基因的研究還有待開展，其基因功能的確定對于研究油菜諸多重要農(nóng)藝性狀具有千分重要的現(xiàn)實意義。針對于甘藍型油菜線粒體基因組中未知的開放閱讀框，本課題做了Ｗ下研究：１．通過對兩種胞質(zhì)類型（，〇／型和》巧；型）的甘藍型油菜線粒體基因組測序比對，篩？５選出序列特異和序列差異開放閱讀框共計１４個：餅？／

7、７八、餅？／７的、餅Ｗ／２２、ＯＲＦ１２３、ＯＲＦ１３２、ＯＲＦ１８８、ＯＲＦ２８６、ＯＲＦ２９３、ＯＲＦ２２２、ＯＲＦ２２４、ＯＲＦ２６１、０５ＯＲＦ３２２。ＯＲＦ２６５、ＯＲＦ３、２．克隆了上１４個甘藍型油菜線粒體功能未知基因，同時為了將目的基因表達的蛋，白定位到線粒體，通過融合ＰＣＲ在其５１＾添加煙草基因戶２的線粒體轉(zhuǎn)運狀７７１ｘ（ＴｒａｎｓｉｔＰｅｔｉｉｄｅ）３６Ｈｓ，ｐ，末端添加標簽（六組氨酸）構(gòu)成融合基因并重組到－－－餅３站ａｒｅａｔｅ１．ｖＴＴ．；咒ｐＥｌｙＧ００，最終獲得植物表達載體５站餅？仍／３、３５

8、ＳＴＰ－ＯＲＦ１２２－－－：：＞３５Ｓ：：ＴＰＯＲＦ１２３、３５Ｓ：：ＴＰＯＲＦＨ２、３５